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MSMafromScienCellResearchLaboratoriesareisolatedfromadultC57BL/6mousespleen.MSMaarecryopreservedafterpurificationanddeliveredfrozen.Eachvialcontains>1x10^6cellsin1mlvolume.
Macrophagesarecellsdifferentiatedfromcirculatingbonemarrow-derivedmonocytes.ThemainfunctionofmacrophagesistoremovecellulardebrisanddestroyinvADIngpathogens.MouseSplenicMacrophages(MSMa)resideinthespleenandplayancriticalroleinmaintainingbloodhomeostasis[1].Therearethreedistinctpopulationsofsplenicmacrophagesincluding:redpulpmacrophages,marginalzonemacrophages,andmarginalzonemetallophillicmacrophages[1,2].MSMaperformironprocessingfunctionsandaidinthecaptureofmicrobesandvirusesinthecirculatorysystem[1,2].Recentstudieshaveshownthatsplenicmacrophagescontributetostrokepathologyandautoimmunediseases[3,4].MSMaareanexcellentmodelforstudyingmacrophagefunctionsundernormalphysiologicalandpathologicalconditions.
MSMafromSciencellResearchLaboratoriesareisolatedfromadultC57BL/6mousespleen.MSMaarecryopreservedafterpurificationanddeliveredfrozen.Eachvialcontains>1x106cellsin1mlvolume.MSMaarecharacterizedbyimmunofluorescencewithantibodytoF4/80.MSMaarenegativeformycoplasma,bacteria,yeast,andfungi.MSMaareguaranteedtofurthercultureintheconditionsprovidedbyScienCellResearchLaboratories;however,MSMaarenotrecommendedforexpandingorlong-termculturessincethecellsdonotproliferateinregularculture.
RecommendedMedium
ItisrecommendedtouseMacrophageMedium(MaM,Cat.#1921)forculturingMSMainvitro.
Specifications:
| CatalogNo. | M5550-57 |
| CountryofManufacture | UnitedStates |
| ProductCode | MSMa |
| Size/Quantity | Eachvialcontains>1x10^6cellsin1mlvolum |
| ProductUse | MSMaareforresearchuseonly.Theyarenotapprovedforhumanoranimaluse,orforapplicationininvitrodiagnosticprocedures |
| Storage | Uponreceiving,directlyandimmediatelytransferthecellsfromdryicetoliquidnitrogenandkeepthecellsinliquidnitrogenuntiltheyareneededforexperiments. |
| ShippingInfo | Dryice. |
| References | [1]BorgesdaSilvaH,FonsecaR,PereiraR,CassadoAdosA,AlvarezJ,D"Imperio,LimaM.(2015)"Splenicmacrophagesubsetsandtheirfunctionduringblood-borneinfections."FrontImmunol.6:480.[2]GammellaE,BurattiP,CairoG,RecalcatiS.(2014)"Macrophages:centralregulatorsofironbalance."Metallomics.6(8):1336-1345.[3]LiuZ,ChenCLiF,ShenJ,YangY,LeakR,JiX,DuH,HuX.(2015)"Splenicresponsesinischemicstroke:newinsightsintostrokepathology."CNSNeurosciTher.21(4):320-326.[4]McGabaT,KarlssonM.(2016)"Apoptoticcellresponsesinthesplenicmarginalzone:aparadigmforimmunologicreactionstoapoptoticantigenswithimplicationsforautoimmunity."ImmunolRev.269(1):26-43. |
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该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2019-04-01
北京裕恒丰科技有限公司在发布的#M1700小鼠雪旺细胞-ScienCell原代细胞供应信息，浏览与#M1700小鼠雪旺细胞-ScienCell原代细胞相关的产品或在搜索更多与#M1700小鼠雪旺细胞-ScienCell原代细胞相关的内容。 查看更多
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2018-03-20
威斯腾生物在发布的细胞原代/传代培养及细胞生物学相关检测(原代细胞培养、细胞培养、细胞鉴定、RTCA检测 、CCK8/MTT检测、细胞划痕实验、流式分选、Transwell迁移、侵袭实验、细胞克隆、细胞周期/凋亡检测等整体服务） 威斯腾生物，让科研更简单！供应信息，浏览与细胞原代/传代培养及细胞生物学相关检测(原代细胞培养、细胞培养、细胞鉴定、RTCA检测 、CCK8/MTT检测、细胞划痕实验、流式分选、Transwell迁移、侵袭实验、细胞克隆、细胞周期/凋亡检测等整体服务） 查看更多
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2018-12-25
北京裕恒丰科技有限公司在发布的#R2100大鼠表皮角质细胞-ScienCell原代细胞供应信息，浏览与#R2100大鼠表皮角质细胞-ScienCell原代细胞相关的产品或在搜索更多与#R2100大鼠表皮角质细胞-ScienCell原代细胞相关的内容。 查看更多
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2021-08-05
北京裕恒丰科技有限公司在发布的#7010人子宫内膜微血管内皮细胞-ScienCell原代细胞供应信息，浏览与#7010人子宫内膜微血管内皮细胞-ScienCell原代细胞相关的产品或在搜索更多与#7010人子宫内膜微血管内皮细胞-ScienCell原代细胞相关的内容。 查看更多
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2021-08-25
#1840人脑干星形胶质细胞-ScienCell原代细胞是由北京裕恒丰科技有限公司代理或销售的ScienCell品牌的试剂，产品来源于美国ScienCell。北京裕恒丰科技有限公司是中国最权威的#1840人脑干星形胶质细胞-ScienCell原代细胞试剂销售服务商之一，在北京丰台区等地方销售#1840人脑干星形胶质细胞-ScienCell原代细胞试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业#1840人脑干星形胶质细胞-ScienCell原代细胞仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的#1840人脑干星形胶质细 查看更多
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2021-07-30
进口原代细胞贵吗？(北京裕恒丰科技有限公司)提供进口原代细胞产商首选美国ScienCell。美国ScienCell产品研究实验室是美国著名的生物技术公司。 ScienCell为研究界提供各种高质量的正常人类原代细胞和正常动物原代细胞，Sciencell细胞培养基和Sciencell试剂，Sciencell培养基添加因子，细胞来源的RNA，cDNA和蛋白质。ScienCell的科学家们以改善生活质量，实现细胞的能力，打击人类退... 查看更多
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2019-03-08
江阴雨汐生物科技有限公司在发布的卵巢癌组织源性原代细胞供应信息，浏览与卵巢癌组织源性原代细胞相关的产品或在搜索更多与卵巢癌组织源性原代细胞相关的内容。 查看更多
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2021-07-27
妙通生物携手DV Biologics专业提供生理与各病理人源原代细胞，人原代细胞、组织及其相关产品是医学研究和药物研发领域的必备品，其来源的可靠性与品质的卓越程度攸关科研成果的真实性和研发企业的生命。妙通生物携手DV Biologics公司专业提供生理与各病理 查看更多
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欣润生物... 查看更多
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2018-06-09
广州柏赛柯生物技术有限公司在发布的小鼠肝原代细胞供应信息，浏览与小鼠肝原代细胞相关的产品或在搜索更多与小鼠肝原代细胞相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
球体细胞培养 1.琼脂铺底的培养瓶：30ml无菌培养瓶，每瓶中加5ml2%琼脂培养基，冷却，形成平坦底层后备用。 2.取生长状态良好已连接成片的细胞，用弯头吸管伸入瓶内，把细胞纵横割划成若干小区后，倒出培养液。 3.加入0.25%的胰蛋白酶液，在倒置显微镜下边消化边观察，当细胞小区边缘微卷起后便立 查看更多
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2017-10-16
#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞是由北京裕恒丰科技有限公司代理或销售的ScienCell品牌的试剂，产品来源于美国ScienCell。北京裕恒丰科技有限公司是中国最权威的#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞试剂销售服务商之一，在北京丰台区等地方销售#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业#2630人牙周膜成纤维细胞-ScienCell原代细胞仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的#2630人牙周膜成纤维细 查看更多
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原代肝细胞培养污染总是污染怎么办,大家看看 123
WJ_mumulin2021-07-25
从接种的第一天细胞就是脏脏的～培养液里也是老有黑点～用了双抗，还有两性和泰乐～～～细胞一直在长…但是今天突然发现这种黑色东西，跟细胞不在一个层面～肉眼看皿也没有黑色脏东西～液体也澄清
怎样才能在实验中提高原代细胞培养的成功率啊???123
詹兵红2021-07-20
怎样才能在实验中提高原代细胞培养的成功率啊？？？
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基; 2.关键还是生长因子等的浓度; 3.如果需要的话,需要明胶包被.
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基; 2.关键还是生长因子等的浓度; 3.如果需要的话,需要明胶包被.
【求助】肿瘤组织原代培养消化后研磨出现一大堆粘液而细胞极少是怎么...123
那孩子11NJ2017-10-06
原代培养心肌细胞作为一种主要的研究模型，被广泛应用于心血管研究之中.我们实验室经过长期尝试，摸索出了一些行之有效的方法，并积累了一些经验，现总结如下：
1新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力.因此，大鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长.大量观测表明，选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果最佳.
2消化酶的选择及使用
新生大鼠心肌细胞的分离可采用组织块法和消化法，前者因不易获得密度均一的细胞且难控制成纤维细胞的生长而较少采用.消化法中常使用的酶有3种：胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶.透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用.胰蛋白酶作用较强，容易造成心肌细胞损坏.胶原酶作用较缓和，能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞，对细胞损伤小，且在新生大鼠心肌组织，以胶原I为主,故我们选用胶原酶I.文献报道胶原酶的工作浓度一般在0.6~1 g・L1,我们使用的为0.8 g・L1.胶原酶最好现用现配.
3消化程度的把握
新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力;消化不足，细胞聚集成团，无法分清细胞边界，难以形态学观测.消化过程中使用磁力搅拌器时应注意1)转速一般控制在60~80 r・min1左右.(2)每次消化的时间须结合消化酶浓度确定.(3)将粘附在搅拌子上的心肌组织吹散，使酶液充分接触组织.(4)适宜温度为35~37℃.(5)当组织由红转白呈半透明状态时，应停止消化.
4接种的细胞密度
心肌细胞接种密度不仅影响细胞间的相互接触，进而影响细胞对肥大刺激的反应，而且影响长期培养细胞的成活率.接种细胞的绝对数量应经精确计算.一般而言，应根据实验的观测目的决定单位面积上的细胞数量.例如，如作形态学观测,六孔板中每孔的接种细胞数量应控制在1×105~2×105个;若需收获心肌细胞作mRNA或蛋白表达水平的观测，则每孔的接种密度可增加到5×105~6×105个.
1新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力.因此，大鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长.大量观测表明，选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果最佳.
2消化酶的选择及使用
新生大鼠心肌细胞的分离可采用组织块法和消化法，前者因不易获得密度均一的细胞且难控制成纤维细胞的生长而较少采用.消化法中常使用的酶有3种：胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶.透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用.胰蛋白酶作用较强，容易造成心肌细胞损坏.胶原酶作用较缓和，能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞，对细胞损伤小，且在新生大鼠心肌组织，以胶原I为主,故我们选用胶原酶I.文献报道胶原酶的工作浓度一般在0.6~1 g・L1,我们使用的为0.8 g・L1.胶原酶最好现用现配.
3消化程度的把握
新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力;消化不足，细胞聚集成团，无法分清细胞边界，难以形态学观测.消化过程中使用磁力搅拌器时应注意1)转速一般控制在60~80 r・min1左右.(2)每次消化的时间须结合消化酶浓度确定.(3)将粘附在搅拌子上的心肌组织吹散，使酶液充分接触组织.(4)适宜温度为35~37℃.(5)当组织由红转白呈半透明状态时，应停止消化.
4接种的细胞密度
心肌细胞接种密度不仅影响细胞间的相互接触，进而影响细胞对肥大刺激的反应，而且影响长期培养细胞的成活率.接种细胞的绝对数量应经精确计算.一般而言，应根据实验的观测目的决定单位面积上的细胞数量.例如，如作形态学观测,六孔板中每孔的接种细胞数量应控制在1×105~2×105个;若需收获心肌细胞作mRNA或蛋白表达水平的观测，则每孔的接种密度可增加到5×105~6×105个.
原代细胞和传代细胞培养有哪些区别123
荷饭23082017-10-02
原代细胞和传代细胞培养有什么区别
请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好 123
洛熙゛652017-10-02
请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
原代细胞和传代细胞培养有哪些区别 123
御妹′d15002017-10-06
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
为什么接种原代细胞到培养皿密度不同? 细胞技术讨论版 专业...123
权限狗箭哔932021-07-22
细胞很微小，接种进去，都是随机的，我们看不见。有可能两个细胞黏在一起，也有可能分离的很开。
就好像撒一撮芝麻在培养基那么大的地方上，我们不能知道它会怎么落。
就好像撒一撮芝麻在培养基那么大的地方上，我们不能知道它会怎么落。
原代心肌细胞培养 123
玖柒殷儿00282021-08-06
原代培养心肌细胞作为一种主要的研究模型，被广泛应用于心血管研究之中.我们实验室经过长期尝试，摸索出了一些行之有效的方法，并积累了一些经验，现总结如下：
1新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力.因此，大鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长.大量观测表明，选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果最佳.
2消化酶的选择及使用
新生大鼠心肌细胞的分离可采用组织块法和消化法，前者因不易获得密度均一的细胞且难控制成纤维细胞的生长而较少采用.消化法中常使用的酶有3种：胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶.透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用.胰蛋白酶作用较强，容易造成心肌细胞损坏.胶原酶作用较缓和，能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞，对细胞损伤小，且在新生大鼠心肌组织，以胶原I为主,故我们选用胶原酶I.文献报道胶原酶的工作浓度一般在0.6~1 g・L1,我们使用的为0.8 g・L1.胶原酶最好现用现配.
3消化程度的把握
新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力;消化不足，细胞聚集成团，无法分清细胞边界，难以形态学观测.消化过程中使用磁力搅拌器时应注意1)转速一般控制在60~80 r・min1左右.(2)每次消化的时间须结合消化酶浓度确定.(3)将粘附在搅拌子上的心肌组织吹散，使酶液充分接触组织.(4)适宜温度为35~37℃.(5)当组织由红转白呈半透明状态时，应停止消化.
4接种的细胞密度
心肌细胞接种密度不仅影响细胞间的相互接触，进而影响细胞对肥大刺激的反应，而且影响长期培养细胞的成活率.接种细胞的绝对数量应经精确计算.一般而言，应根据实验的观测目的决定单位面积上的细胞数量.例如，如作形态学观测,六孔板中每孔的接种细胞数量应控制在1×105~2×105个;若需收获心肌细胞作mRNA或蛋白表达水平的观测，则每孔的接种密度可增加到5×105~6×105个.
1新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞，不再具有分裂增殖能力.因此，大鼠出生时间越短，其心肌细胞分离后成活率越高，越容易贴壁生长.大量观测表明，选择1~3 d龄大鼠分离其心肌细胞进行原代培养较为理想.其中尤以半日龄大鼠心肌细胞培养效果最佳.
2消化酶的选择及使用
新生大鼠心肌细胞的分离可采用组织块法和消化法，前者因不易获得密度均一的细胞且难控制成纤维细胞的生长而较少采用.消化法中常使用的酶有3种：胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶.透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用.胰蛋白酶作用较强，容易造成心肌细胞损坏.胶原酶作用较缓和，能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞，对细胞损伤小，且在新生大鼠心肌组织，以胶原I为主,故我们选用胶原酶I.文献报道胶原酶的工作浓度一般在0.6~1 g・L1,我们使用的为0.8 g・L1.胶原酶最好现用现配.
3消化程度的把握
新生大鼠心肌细胞对酶消化极为敏感.消化过度可使肌原纤维出现萎缩，细胞死亡率增加或丧失贴壁能力及搏动能力;消化不足，细胞聚集成团，无法分清细胞边界，难以形态学观测.消化过程中使用磁力搅拌器时应注意1)转速一般控制在60~80 r・min1左右.(2)每次消化的时间须结合消化酶浓度确定.(3)将粘附在搅拌子上的心肌组织吹散，使酶液充分接触组织.(4)适宜温度为35~37℃.(5)当组织由红转白呈半透明状态时，应停止消化.
4接种的细胞密度
心肌细胞接种密度不仅影响细胞间的相互接触，进而影响细胞对肥大刺激的反应，而且影响长期培养细胞的成活率.接种细胞的绝对数量应经精确计算.一般而言，应根据实验的观测目的决定单位面积上的细胞数量.例如，如作形态学观测,六孔板中每孔的接种细胞数量应控制在1×105~2×105个;若需收获心肌细胞作mRNA或蛋白表达水平的观测，则每孔的接种密度可增加到5×105~6×105个.
【求助】请教组织块法原代培养的问题 细胞技术讨论版论坛123
神剑沼删92021-08-09
细胞培养—组织块法(细胞培养,原代培养,培养瓶,培养液)] 组织块培养法1概述 组织块培养是常用的、简便易行和成功率较高的原代培养方法，即将组织剪切成小块后，接种于培养瓶。培养瓶可根据不同细胞生长的需要做适当处理。例如预先涂以胶原薄层，以利于上皮样细胞等的生长。如果原代细胞准备做组织染色、电镜等检查，可在做原代培养前先在培养瓶内放置小盖玻片，小盖玻片要清洗干净，在消毒前放置，并在放入组织块前预先用1-2滴培养液湿润瓶底，使之固定。
细胞原代培养实验 实验方法123
2021-07-26
原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培 养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。
操作步骤
（一）胰酶消化法
1、器材：将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死，置75%酒精泡2—3秒钟（时间不能过长、以免酒精从口和肛门浸入体内）再用碘酒消毒腹部，取胎鼠带 入超净台内（或将新生小鼠在超净台内）解剖取肝脏，置平皿中。
2、用Hank’s液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。
3、用手术剪将肝脏剪成小块（1mm2），再用Hank’s液洗三次，转移至小青霉素瓶中。
4、视组织块量加入5—6倍的0.25%胰酶液，37℃中消化20—40分钟，每隔5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。
5、加入3—5ml培养液以终止胰酶消化作用（或加入胰酶抑制剂）。
6、静置5—10分钟，使未分散的组织块下沉，取悬液加入到离心管中。
7、1000rpm，离心10分钟，弃上清液。
8、加入Hank’s液5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。
9、加入培养液l—2 ml（视细胞量），血球计数板计数。
10、将细胞调整到5×105/ml左右，转移至25ml细胞培养瓶中，37℃下培养。 上述消化分离的方法是最基本的方法，在该方法的基础上，可进一步分离不同细胞。细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如 胶原酶，透明质酶等）。
（二）组织块直接培养法 自上方法第3步后，将组织块转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织块。入37℃静置3—5小时，轻 轻翻转培养瓶，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。
操作步骤
（一）胰酶消化法
1、器材：将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死，置75%酒精泡2—3秒钟（时间不能过长、以免酒精从口和肛门浸入体内）再用碘酒消毒腹部，取胎鼠带 入超净台内（或将新生小鼠在超净台内）解剖取肝脏，置平皿中。
2、用Hank’s液洗涤三次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。
3、用手术剪将肝脏剪成小块（1mm2），再用Hank’s液洗三次，转移至小青霉素瓶中。
4、视组织块量加入5—6倍的0.25%胰酶液，37℃中消化20—40分钟，每隔5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。
5、加入3—5ml培养液以终止胰酶消化作用（或加入胰酶抑制剂）。
6、静置5—10分钟，使未分散的组织块下沉，取悬液加入到离心管中。
7、1000rpm，离心10分钟，弃上清液。
8、加入Hank’s液5ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。
9、加入培养液l—2 ml（视细胞量），血球计数板计数。
10、将细胞调整到5×105/ml左右，转移至25ml细胞培养瓶中，37℃下培养。 上述消化分离的方法是最基本的方法，在该方法的基础上，可进一步分离不同细胞。细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如 胶原酶，透明质酶等）。
（二）组织块直接培养法 自上方法第3步后，将组织块转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织块。入37℃静置3—5小时，轻 轻翻转培养瓶，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。
小鼠成纤维细胞原代培养 123
解脱y3rT2017-10-06
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
原代细胞_细胞_iPS细胞_细胞培养基_CRO细胞实验赛百慷(上海)...123
锦瑟萧萧灬无端2017-10-02
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