Description Leukemia Inhibitory Factor (LIF), a lymphoid factor, is widely used to maintain the pluripotency of mouse embryonic stem cells. LIF is also involved in a wide variety of biological processes including hematopoietic cell proliferation, neuronal survival and formation, and bone formation. Removal of LIF pushes stem cells toward differentiation, but they retain their proliferative potential or pluripotency. Therefore LIF is used in mouse embryonic stem cell culture. It is necessary to maintain the stem cells in an undifferentiated state. Mouse LIF is a 20 kDa protein containing 181 amino acid residues. mLIF is expressed in E. coli and purified by HPLC chromatography.
Purity > 99% (by SDS Page)
BufferSolution, 0.2 μm filtered, in phosphate buffered saline containing with
1% W/V BSA
Endotoxin Level < 1.0 EU/ug as determined by the LAL method
Biologic Activity LIF activity is assessed on mouse embryonic stem (ES) cells and shown to maintain ES cell pluripotency in culture when used at 850U/ml.
Undifferentiated mouseES cells cultured in media containing800 Units/mL LIF
Storage and HandlingStore at 4°C. Freeze-thaw should be avoided.
Stability Stable for up to 6 months from date of receipt when stored as directed.
References Williams R.L., Hilton, D.J., Pease, S., Willson, T.A., Stewart, C.L., et al (1988)
Myeloid leukemia inhibitory factor maintains the developmental potential of
embryonic stem cells. Nature 336:686-7.
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
根据传统定义,自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney,R.I.(1987).CultureofAnimalCells.AManualofBasicTechnique.(NewYork,AlanR.Liss,Inc.)].这类细胞直接从组织分离,生命周期有限,经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的最大生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。
细胞系是不断生长、分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。
但实际上,经过长时间、连续的传代培养后,细胞系随着代数的增加,细胞的基因型和表型都有可能发生改变。
需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群,除非细胞经过了遗传改造。
二、倍增和代数有什么区别?
倍增是培养物中细胞总数的翻倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的,是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
三、接收到的冻存细胞该如何处理?
收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快,以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
四、有多少经验才能开始正常人类细胞培养?
推荐有经验者在无菌环境下用洁净操作台工作,如果有细胞系培养经验的话,对原代细胞的培养也是很有益处的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家(裕恒丰科技有限公司)。
五、冻存的细胞该如何开始培养?
(1)将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。
(2)将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。
(3)将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。
(4)用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。
(5)打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。
(6)用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。
(7)盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。
(8)将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)
(9)放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。
六、当我第一次复苏正常人类细胞时,是否需要先离心细胞以去除二甲基亚枫吗?
第一次复苏正常人类冻存细胞时,我们不推荐离心去除二甲基亚枫。与残留的二甲基亚枫相比,离心过程对细胞的伤害更大,尤其是不适当的高速离心时。我们的经验是:如果二甲基亚枫的浓度很低,细胞不会受毒害。如果你将1ml细胞放入含15ml培养基的T-75培养瓶中,二甲基亚枫的浓度将小于0.67%,没有发现负面影响。实际上,如果细胞的接种密度为每平方厘米5000-10000个,二甲基亚枫的浓度很低。
七、细胞培养过程中,多久更换一次培养基?
这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基,许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:冻存细胞复苏后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。
八、我能扩增培养和再次冻存Sciencell的正常人类细胞吗?
这取决于细胞的类型。一些细胞类型像神经细胞,神经胶质细胞和一些生长缓慢的上皮细胞,不推荐扩增培养和再次冻存。其它的细胞类型像成纤维细胞、星形细胞、肾系膜细胞、星形胶质细胞等等,可以扩增培养和再次冻存。然而,需要注意的是再次冻存的过程可能导致细胞生长性能的改变。如果你想要再次冻存细胞,请亲自咨询我们的技术支持并使用ScienCell无血清细胞冻存液(SF-CFM)和特定的无血清培养基,以获得最佳冻存效果。
九、我能长时间的冷冻保存ScienCell的原代细胞培养基吗?
我们不推荐冷冻保存培养基,高营养的培养基经过冷冻和复温后,可能导致培养基成分的不可逆降解,从而影响细胞的生长。
十、培养瓶中应该加入多少体积的培养基?
我们推荐的用量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。文章来源北京裕恒丰科技有限公司官方微信
哪种要好,有什么要求吗?接种多少代的细胞?
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基; 2.关键还是生长因子等的浓度; 3.如果需要的话,需要明胶包被.

