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  在无菌条件下培养小鼠原代细胞 查看更多>
2019-04-01
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威斯腾生物走进科室讲座第二场——原代细胞培养技术成功举办 上午10点,威斯腾生物2016走进科室系列讲座9月份第二场——原代细胞培养技术讲座顺利在重庆新桥医院医技楼3楼学习室举办。 我公司的技术支持严君从原代细胞培养技术原理、原代细胞培养实验步骤重难点、原代细胞培养实例剖析等几个方面为大家分享了原代细胞培养技术的一些经验和技巧。细胞组负责人何久香也参与了此次讲座,并现场解答了很多同学提出的实际操作中遇到的问题。 原代细胞培养技术这... 查看更多>
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                                                            应上海交通大学新华医院博导、中华肝病学会脂肪肝和酒精性肝病学组组长——范建高教授课题组诚挚邀请,齐氏培训团——8年细胞培养工程师,于10.19下午,走进新华医院与部分科研工作者聊了聊细胞培养那些事。                                                           ... 查看更多>
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从悬浮细胞培养物中吸取样品,细胞计数,接种适量的悬浮细胞至新培养瓶的新鲜培养基中,使细胞浓度与开始培养时一致。 查看更多>
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循环肿瘤细胞(CTC)检测.pdf123
beijing19822021-08-10
一、原代细胞与细胞系有什么区别?

根据传统定义,自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney,R.I.(1987).CultureofAnimalCells.AManualofBasicTechnique.(NewYork,AlanR.Liss,Inc.)].这类细胞直接从组织分离,生命周期有限,经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的最大生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。
细胞系是不断生长、分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。
但实际上,经过长时间、连续的传代培养后,细胞系随着代数的增加,细胞的基因型和表型都有可能发生改变。
需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群,除非细胞经过了遗传改造。
二、倍增和代数有什么区别?

倍增是培养物中细胞总数的翻倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的,是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
三、接收到的冻存细胞该如何处理?

收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快,以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

四、有多少经验才能开始正常人类细胞培养

推荐有经验者在无菌环境下用洁净操作台工作,如果有细胞系培养经验的话,对原代细胞的培养也是很有益处的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家(裕恒丰科技有限公司)。
五、冻存的细胞该如何开始培养?

(1)将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。

(2)将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体完全融化。

(3)将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。

(4)用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。

(5)打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。

(6)用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。

(7)盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

(8)将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)

(9)放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。

六、当我第一次复苏正常人类细胞时,是否需要先离心细胞以去除二甲基亚枫吗?

第一次复苏正常人类冻存细胞时,我们不推荐离心去除二甲基亚枫。与残留的二甲基亚枫相比,离心过程对细胞的伤害更大,尤其是不适当的高速离心时。我们的经验是:如果二甲基亚枫的浓度很低,细胞不会受毒害。如果你将1ml细胞放入含15ml培养基的T-75培养瓶中,二甲基亚枫的浓度将小于0.67%,没有发现负面影响。实际上,如果细胞的接种密度为每平方厘米5000-10000个,二甲基亚枫的浓度很低。

七、细胞培养过程中,多久更换一次培养基?

这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基,许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:冻存细胞复苏后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。
八、我能扩增培养和再次冻存Sciencell的正常人类细胞吗?

这取决于细胞的类型。一些细胞类型像神经细胞,神经胶质细胞和一些生长缓慢的上皮细胞,不推荐扩增培养和再次冻存。其它的细胞类型像成纤维细胞、星形细胞、肾系膜细胞、星形胶质细胞等等,可以扩增培养和再次冻存。然而,需要注意的是再次冻存的过程可能导致细胞生长性能的改变。如果你想要再次冻存细胞,请亲自咨询我们的技术支持并使用ScienCell无血清细胞冻存液(SF-CFM)和特定的无血清培养基,以获得最佳冻存效果。
九、我能长时间的冷冻保存ScienCell的原代细胞培养基吗?

我们不推荐冷冻保存培养基,高营养的培养基经过冷冻和复温后,可能导致培养基成分的不可逆降解,从而影响细胞的生长。
十、培养瓶中应该加入多少体积的培养基?

我们推荐的用量为:T-25培养瓶5ml,T-75培养瓶15ml,T-150培养瓶30ml。文章来源北京裕恒丰科技有限公司官方微信
原代细胞,即原代培养的细胞,也就是培养不超过10次的细胞,是细胞培养的一个阶段传代细胞,即传代培养的细胞,也就是培养在10到50次之间的细胞,也是胞培养的一个阶段二倍体细胞就是细胞内含有两个染色体组的细胞,没什么作用,就是个二倍体。杂交瘤细胞是细胞融合的产物,用于制备单克隆抗体
细胞很微小,接种进去,都是随机的,我们看不见。有可能两个细胞黏在一起,也有可能分离的很开。

就好像撒一撮芝麻在培养基那么大的地方上,我们不能知道它会怎么落。
动物细胞培养有什么特点?_123
钩距黄堇662017-10-01
原代培养离体时间短,遗传性状和体内细胞相似,适于做细胞形态、功能和分化等研究。一般动物和人的所有组织都可以用于培养,但幼体组织和细胞(如胚胎组织、幼仔的脏器等)更容易进行原代培养。
结肠肿瘤_可以看出哪一期123
dxy_h2lc4whq2021-08-03

如题,本人在做结肠肿瘤细胞时,每次从医院拿回来的组织都只有一指甲盖大小,我是剔除肉眼可见的一些血丝之类的,然后就进行处理了,不知道这样对不对,有没有清除干净,不知道大家在做肿瘤原代时,是怎么判断那一部分是肿瘤组织,有什么建议么?大家可以分享自己的经验。

原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。

各位专家们大家好,最近在做一些原代细胞相关实验。细胞是自己分离提取的,老板说直接用就行。我想问问大家一般都会做鉴定吗?如果做鉴定是什么方法?普通的鉴定与检测一般都会做,我想咨询的是大家有没有一整套完整的原代细胞检测及鉴定方案。小小10蚁豆敬上,求大神解答!

怎样才能在实验中提高原代细胞培养的成功率啊???
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基; 2.关键还是生长因子等的浓度; 3.如果需要的话,需要明胶包被.

各位大神,求指导,我最近在提取大鼠原代肝星状细胞,因为实验室地方比较小,在细胞房的缓冲间操作,也是按一般的步骤,先消毒,备皮,开腹,然后门静脉穿刺进行灌注,灌注的时间大概接近一个小时,实验用的器械也都用酒精泡一整夜才用,灌注结束后剪下肝脏,放入烧杯中消化震荡半小时,之后离心。整个操作的过程也很小心,用的东西也都高压灭菌过,但是每次提取的细胞刚开始还好,放几天就出现污染,孵箱里面的空培养液体镜下观察却没有问题,到底是哪里出了问题,求教


您好,现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。
其次要看下你选择单位的规模如何,上海这边的,你可以看下基尔顿生物,原代细胞培养,动物造模,整体课题外包。
原代培养细胞会分裂.原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡.传代培养一般传到40-50代,这种传细胞叫细胞株.细胞株的遗传物质没有改变.其分裂能力与原代培养的一样.当细胞株传至50代以后又出现“危机”,不能再传下去,但有的细胞遗传物质发生改变,并带有癌变的特点称细胞系.这部分细胞的分裂能力比原代培养的强得多.它有无限增殖的特点.
细胞原代培养和传代培养的区别
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。