本人做动物实验，每组设7只，需要测定小鼠的相关指标，初次接触有几点不明白
1、测定指标时，是否可以每组7只，每只测定一次，一共测定7次？
2、是否可以每组选择3只，每只测定一次，共3次？
3、是否可以每组选择3只，每只自身平行测定3次，共9次？
4、测定指标时，是否可以前3只鼠测定A指标，后4只鼠测定B指标吗？
请问1、2、3中的三个方法哪种方法是否具有可行性？4中的测定方法是否可以？

Nutrients.2017May10;9(5).

ClinicalSignificanceandPrognosticEffectofSerum25-hydroxyvitaminDConcentrationsinCriticalandSevereHand,FootandMouthDisease.

手足口病危重儿血清25-羟维生素D浓度的临床意义与预后影响

作者党红星，刘成军，李静，程时骄，许峰

摘要

Abstract

目的：探讨血清25羟维生素D[25（OH)D]浓度与手足口病危重症的关系及评估手足口病危重儿血清25-羟维生素D浓度的临床意义与预后影响。

OBJECTIVE:

Toexaminetheassociationofserum25-hydroxyvitaminD[25(OH)D]concentrationswithcriticalandseverehand,footandmouthdisease(HFMD)andassesstheclinicalsignificanceandprognosticeffectof25(OH)DconcentrationsinchildrenwithHFMD.

方法：本研究为前瞻性观察研究。

METHODS:

ThisisaProspectiveobservationalstudy.

将138例手足口病患儿分为普通组（49例）、重症组（52例）和危重组（37例）。另选取同期门诊体检的59例健康儿童作为对照组。

The138childrenwithHFMDweredividedintocommon(49cases),severe(52cases),andcritical(37cases)HFMDgroups.Another59healthychildrenundergoingoutpatientmedicalexaminationsduringthesameperiodwerechosenasthecontrolgroup.

测定所有对象的血清25（OH）D浓度，每组再分为血清25（OH）D正常组（≥30ng/mL）；不足组（20-29.9ng/mL）；缺乏组（低于20ng/mL）。

Serum25(OH)Dconcentrationsweremeasuredinallthesubjects,andeachgroupwassuBDividedbyserum25(OH)Dconcentrationinto25(OH)Dnormal(≥30ng/mL);insufficiency(20-29.9ng/mL),anddeficiency(<20ng/mL)groups.

手足口病危急重症组在入住儿科ICU（PICU）时记录小儿危重病例评分（PCIS）。

Thepediatriccriticalillnessscore(PCIS)wasrecordedforthecriticalandsevereHFMDgroupuponadmissiontothepediatricintensivecareunit(PICU).

监测小儿危重手足口病患者血乳酸（LAC）、血清钙离子（Ca2+）、D-二聚体（DD）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平；脑干脑炎、神经源性肺水肿、循环衰竭的发生情况；14天病死率。

ChildrenwithcriticalandsevereHFMDwerealsomonitoredforbloodlactate(LAC),serumcalciumions(Ca++),D-dimer(DD),lactatedehydrogenase(LDH),andcreatinekinase-MB(CK-MB)levels;theincidencesofbrainstemencephalitis,neurogenicpulmonaryedema,andcirculatoryfailure;andthe14-daymortalityrate.

结果：

RESULTS：

各组血清25（OH）D浓度普遍较低。

Serum25(OH)Dconcentrationsweregenerallylowinallgroups.

与对照组（28.1±6.6ng/mL,8%）、普通组（29.5±8.1ng/mL,10%）和重症组（31.9±9.7ng/mL,8%）相比，危重组患者血清25（OH）D平均浓度（20.0±8.4ng/mL）明显较低，血清25（OH）D缺乏比例（18％）明显较高(P＜0.05）。

ThecriticalHFMDgroupshowedasignificantlylowerserum25(OH)Dmeanconcentration(20.0±8.4ng/mL)andahigherproportionofdeficiency(18%)comparedwiththecontrolgroup(28.1±6.6ng/mL,8%),common(29.5±8.1ng/mL,10%)andsevere(31.9±9.7ng/mL,8%)HFMDgroups(p<0.05).

在危重组中，25（OH）D缺乏组比25（OH）D正常组及不足组具有更低的PCIS值（P＜0.05）；而比后两组具有更高LAC、LDH、CK-MB和DD；具有（更高的）脑干脑炎、神经源性肺水肿、循环衰竭发生率及病死率（P＜0.05）。

InthecriticalandsevereHFMDgroups,the25(OH)DdeficiencygrouphadlowerPCISsthanthe25(OH)Dnormalandinsufficiencygroups(p<0.05);andhadhighervaluesthanthelattertwogroupsforLAC,LDH,CK-MBandDD;andtheincidencesofbrainstemencephalitis,neurogenicpulmonaryedema,circulatoryfailure,andmortality(p<0.05).

死亡组较存活组具有显著降低的血清25（OH）D浓度和PCIS（P＜0.05），具有较高的LAC、LDH、CK-MB和DD水平；较高的脑干脑炎、神经源性肺水肿、循环衰竭发病率（P＜0.05）。

Thedeathgroupshowedsignificantlylowerserum25(OH)DconcentrationsandPCISsthanthesurvivalgroup(p<0.05)andhadhigherLAC,LDH,CK-MBandDDlevelsandhigherincidencesofbrainstemencephalitis,neurogenicpulmonaryedema,andcirculatoryfailure(p<0.05).

Logistic回归分析显示，血清25（OH）D浓度是影响重症手足口病患儿病死率的独立因素。

Logisticregressionanalysisrevealedthattheserum25(OH)DconcentrationwasanindependentfactorthatinfluencedmortalityinchildrenwithcriticalandsevereHFMD.

CONCLUSIONS:

结论：

在这项研究中，我们发现，血清25（OH）D浓度在手足口病危重患儿中大幅降低，并与手足口病的严重程度相关。

Inthisstudy,wefindtheserum25(OH)DconcentrationsaresubstantiallyreducedinchildrenwithcriticalandsevereHFMDandareassociatedwiththeseverityofHFMD.

血清25（OH）D浓度对判断重症手足口病进展和预测死亡风险具有临床价值。

Theserum25(OH)DconcentrationsmayhaveclinicalvaluefordeterminingtheprogressionofcriticalHFMDandpredictingtheriskofdeath.

在确定25（OH）D浓度在手足口病诊断的临床价值之前，仍需进一步的证据。

Furtherevidenceisneededbeforeitcanbestatedthat25(OH)DconcentrationshaveclinicalvalueinHMFDdiagnosis.

关键词：

KEYWORDS:

25-hydroxyvitaminD;criticalillness;footandmouthdisease;hand

25羟维生素D；危重病；手足口病

想做临床的血标本的一些代谢组学研究，不知道应该用血浆还是血清，大家的说法好像也不太一致，请大神指导啊，最好有些参考文献，谢谢！