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| 2-Cl-IB-MECAA3 adenosine receptor agonist |
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Nature.2017 Jan 19;541(7637):417-420.
Nature.2018 Nov;563(7731):407-411.Nature.2018 Jun 13.Nature.2018 Jun 27.Nature.2018 Mar 29;555(7698):673-677.Nature.2017 Sep 7;549(7670):96-100.Nature.2016 Apr 21;532(7599):398-401.
Science.2016 Aug 5;353(6299)594-8Nat Nanotechnol.2017 Dec;12(12):1190-1198.Nature Biotechnology.2017 Jun;35(6):569-576Nat Med.2018 Sep 17.Cell.2018 Dec 21. pii: S0092-8674(18)31561-7.Cell.Available online 25 October 2018.Cell.2018 Sep 27. pii: S0092-8674(18)31183-8.Cell.2018 Jun 28;174(1):172-186.e21.Cell.2018 Feb 22;172(5):1007-1021.e17.Cell.2017 Nov 30;171(6):1284-1300.e21.Cell.2017 Aug 17. pii: S0092-8674(17)30869-3.Cell.2017 Jul 13;170(2):312-323Nat Med.2018 Jan 29.Nat Med.2017 Nov;23(11):1342-1351.Cell.2017 Apr 6;169(2):286-300.Cell.2015 Aug 27;162(5):987-1002.Cell.2015 Feb 12;160(4):729-44.Nature Medicine.2017 Apr;23(4):493-500.Cancer Cell.2018 May 14;33(5):905-921.e5.Cancer Cell.2018 Apr 9;33(4):752-769.e8.Cancer Cell.2018 Mar 12;33(3):401-416.e8.Cancer Cell.2017 Aug 14;32(2):253-267.e5.Nat Methods.2018 Jul;15(7):523-526.Cell Stem Cell.2018 May 3;22(5):769-778.e4.Cell Stem Cell.2017 Nov 20. pii: S1934-5909(17)30375-2.Quality Control & MSDS
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- COA (Certificate Of Analysis)
- HPLC
- NMR (Nuclear Magnetic Resonance)
- MSDS (Material Safety Data Sheet)
Chemical structure
2-Cl-IB-MECA Dilution Calculator
calculate
2-Cl-IB-MECA Molarity Calculator
calculate
| Cas No. | 163042-96-4 | SDF | Download SDF |
| Synonyms | N/A | ||
| Chemical Name | (2S,3S,4R,5R)-5-(2-chloro-6-((3-iodobenzyl)amino)-9H-purin-9-yl)-3,4-dihydroxy-N-methyltetrahydrofuran-2-carboxamide | ||
| Canonical SMILES | IC1=CC(CNC(N=C(N=C23)Cl)=C3N=CN2[C@@H]([C@@H]4O)O[C@H](C(NC)=O)[C@H]4O)=CC=C1 | ||
| Formula | C18H18ClIN6O4 | M.Wt | 544.74 |
| Solubility | ≥54.5mg/mL in DMSO | Storage | Store at -20°C |
| Physical Appearance | A solid | Shipping Condition | Evaluation sample solution : ship with blue ice.All other available size:ship with RT , or blue ice upon request |
| General tips | For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.Stock solution can be stored below -20℃ for several months. | ||
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-09-03
Apexbio品牌DBIBB LPA2激动剂优势订购 查看更多
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2021-09-04
自 1950 年代以来，电磁场刺激便时常被用于促进骨折愈合。一般认为该方法可抑制破骨细胞的活性，刺激血管形成，促进骨形成。甚至曾有双盲随机对照研究证实脉冲式电磁场刺激对于胫骨干骨折延迟愈合具有促进作用 [1]。然而，JBJS 最新的一项多中心双盲随机对照研究显示，脉冲式电磁场刺激对于新鲜胫骨干骨折的愈合并没有明显的促进作用。 该研究共纳入了 6 个医院的 2 查看更多
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2021-09-13
抑制素，生理名。于1932年，McCullagh在睾丸提取物中发现。抑制素源于睾丸支柱细胞的一种大分子多肽，具有强烈的抑制FSH分泌的作用，但对LH的分泌仅具轻微的抑制作用。抑制素由卵巢颗粒细胞分泌，相对分子质量为32000。抑制素可以反馈抑制垂体前叶促卵泡激素的释放，调节卵泡的生成。... 查看更多
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2021-09-15
以往抑郁症方向的前瞻性系列治疗性试验提示，超过 60% 的抑郁症（MDD）患者在治疗起初接受药物治疗时未取得明显收效，这一比例随后期治疗策略的更换呈现下降趋势，直至换用第四种药物进行治疗时，预期缓解率或可低至 10% 至 15%。难治性抑郁症一般指 MDD 患者经两种不同的常规药物或疗法治疗后，病情仍不见好转甚至转向恶化的特殊临床情形。既往研究提示，32% 到 41% 的 查看更多
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2021-08-03
ß - GAL Filter Assaystreak yeasts to single colony replica plate onto NC-filter (leave 10 sec.) use tweezers to lift filter and slowly submerge in liquid 查看更多
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2021-09-14
卵巢过度刺激综合征（OHSS）是辅助生殖技术中诱发排卵过程引起的常见并发症。以往对于卵巢过度刺激综合征的描述包括卵巢肿大、腹水，血液浓缩、高凝状态以及电解质紊乱。症状的轻重取决于疾病的严重程度和发病的时间长短。重度 OHSS 可以导致严重的并发症，包括胸腔积液、急性肾功能不全以及深静脉血栓。以下为 OHSS 症状的详细分类：OHSS 症状分类 OHSS 等级临床表现 查看更多
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Making library DNA from the DNA we send youThe library is distributed as individual pools in the form of DNA. You will be sent about a microgram of each pool a 查看更多
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2021-09-05
约翰霍普金斯的科学家完成的动物研究发表在五月刊的《Nature Neuroscience》杂志上，其认为大脑特定区域中的一些新生的神经细胞能影响食量和体重。约翰霍普金斯大学医学院 Solomon H. Snyder 神经科学部的副教授，该研究负责人 Seth Blackshaw 博士说，人在进入成年期后，其大脑仍然会形成新的神经细胞或神经元，在过去的几十年中这一观点非常明确。他补充道，然而研究者之前认 查看更多
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2021-08-07
Mike Schultz, Pavel Aprikian, Steve Hahnlast modified6/28/99Grow 2 liters yeast in YPD (with 3% glucose) to an A600 of 1.5 to 2.0 (inoculate ~1.5 ml saturated 查看更多
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2021-09-01
1．实验前三天，向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml（勿注入肠内）。2．引颈杀死动物，手提鼠尾将全鼠浸入70％酒精中3～5秒。3．置动物于解剖台上，用针头固定四肢，双手持镊撕开皮肤拉向两侧，暴露出腹膜，但勿伤及腹膜壁。4．再用70％酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10ml Eagle液注入腹腔中 查看更多
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2021-08-26
1.什么是细胞转化？何时会发生细胞转化？ 细胞转化是细胞发生遗传性状改变的一种变化，它的基础是DNA或基因的突变。从属性上说，基因突变导致生物体发生的转化，有利于生物体的转化，也有不利于生物体的转化（例如癌变）。 在体外培养的细胞，受到致突变作用时便可发生转化，凡能诱发DN 查看更多
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2021-09-16
细胞的生长，主要是指细胞体积的增大，细胞分化完成后并不是所有的细胞都有生长的过程，大多数的组织器官都是通过不断的细胞分裂以增加细胞数量的方式来实现器官生长，只有很少数细胞（像神经元细胞）是通过增大细胞体积的方式来实现器官生长的，随着个体的不断发育，神经元细胞，特别是... 查看更多
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大豆胰蛋白酶抑制因子试剂盒一般能测多少个样品 123
云筒灼452021-07-30
一般情况下试剂盒是有两种规格的，96T盒48T分别可以测85个样本和37个样本。上海恒远生物专业提供各大品牌elisa试剂盒代理。
细胞P300CBP组蛋白乙酰转移酶(P300CBPHAT)活性123
whz和平2017-09-28
基因转录有关组蛋白乙酰转移酶（HAT），家族成员包括HATA／Gcn5p、p300／CBP、p／CAF、ACTR、 Src1、 TAFⅡ 250、 Elp3等。因此，要看你是针对哪个酶的活性了。我简单查了一下:
1. 姜黄素是一个典型的HAT抑制剂。
2. 针对P300: 在大约10年前，Cole和他的同事设计出了一种p300/CBP抑制剂，发表在nature杂志上。
希望能帮到你，望采纳！
1. 姜黄素是一个典型的HAT抑制剂。
2. 针对P300: 在大约10年前，Cole和他的同事设计出了一种p300/CBP抑制剂，发表在nature杂志上。
希望能帮到你，望采纳！
【实验求助】急求STAT4特异性抑制剂,用来刺激淋巴细胞 细胞生物...123
linrucq2021-08-03
急求STAT4特异性抑制剂，用来刺激细胞
...为什么细胞增殖会明显受到抑制?_问答详情_刺激/抑制试剂_细胞...123
2017-09-28
绝对有影响，我们血液科很多白血病都是从事过化工的。很多化学试剂严重抑制骨髓增生，影响血小板生成。
【既可以吸收水又可以吸收二氧化碳的无机试剂有哪些?我知道的是过...123
hwy993202021-07-28
石灰石与稀盐酸
支原体清除试剂中的什么成分能抑制支原体dna合成 123
唯爱一萌3910722017-09-28
都是检查解脲支原体的方法。支原体DNA检测是通过荧光定量PCR检查样本中支原体的多少，可以定量，能划分出阳性强弱，表明感染程度。
支原体培养则是取样后在培养基上培养，看有多少支原体菌落会长出，是比较直观和可信的结果。
总体来讲，这两种检查手段可信度都较高，结合一起，不仅可以可靠的知道有无解脲支原体感染，还能知道感染是否严重。
支原体培养则是取样后在培养基上培养，看有多少支原体菌落会长出，是比较直观和可信的结果。
总体来讲，这两种检查手段可信度都较高，结合一起，不仅可以可靠的知道有无解脲支原体感染，还能知道感染是否严重。
怎么用fret测量camp的浓度123
改密死10482017-09-28
1.检测原理：
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析，该反应是一个竞争免疫反应，即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素（streptavidin）与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时，340nm的激发光激发铕标分子，导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上，结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体，激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低，而拮抗剂则可以逆转这一效应；对于偶联Gαi的受体，在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生，那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成，因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高，室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
2.保存条件
避光2~4℃保存，过期时间见外包装。
3.盒内试剂
cAMP标准品：1管，1ml。（50μM）
生物素标记的cAMP（b-cAMP）：1管，25μl。
铕标的抗生物素蛋白链菌素：1管，25μl。
荧光标记的cAMP抗体：1管，40μl。
检测缓冲液：1瓶，25ml。
4.需要自配的其他溶液
l Hank’s balanced salt solution (HBSS): NaCl 8.0g、CaCl2 0.14g、KCl 0.4g、 KH2PO4 0.06g、Na2HPO4?7H2O0.09g、MgCl2.6H2O0.10 g、MgSO4.7H2O0.10 g、NaHCO30.35g、葡萄糖1.0g，加H2O至 1000ml (用7.5%NaHCO调节PH值=7.4)
l Versene消化液（1L）：EDTA 0.372 g，NaCl 8.0g，KCl 0.20 g，KH2PO40.20g，Na2HPO4 1.15 g，D-glucouse 0.2 g，pH 7.4
l HEPES缓冲液(1mol/L)：取2.383gHEPES溶于10ml去离子水中。
l 7.5%BSA溶液：取0.75gBSA溶于10ml去离子水中
l 0.5M IBMX溶液：11.11mg IBMX溶于100μl DMSO中，-20℃冻存。
l 刺激缓冲液（SB）：14 ml HBSS(1×)+75μlHEPES(1mol/L)+200μlBSA (7.5%)。(注：在测定细胞cAMP时，反应缓冲液中要加入IBMX 0.5mmol/L)
l 吗啡贮存液(10mM)：盐酸吗啡37.585mg溶于10ml生理盐水中，0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
l 纳络酮母液(100mM)：纳络酮4mg溶于100μl 生理盐水中，用时工作液按照1:500稀释，溶剂为含有IBMX的反应缓冲液。
该试剂盒是一种时间分辨的荧光共振能量转移免疫分析，该反应是一个竞争免疫反应，即铕标的cAMP示踪复合物与体系中的cAMP竞争结合标有Alexa Fluor 647染料的cAMP抗体。铕标cAMP示踪复合物是通过Biotin标记的cAMP与铕标的抗生物素蛋白链菌素（streptavidin）与抗体的复合物紧密结合产生的。
当抗体结合到示踪剂上时，340nm的激发光激发铕标分子，导致能量转移到Alexa Fluor 647染料上，结果产生665nm的发射光。荧光的强度与样品中的cAMP含量成反比。
本试剂盒用于检测在GPCR激动剂刺激下活细胞或者细胞膜制备品产生的cAMP。对于偶联Gαs的受体，激动剂刺激导致665nm的荧光强度降低，而拮抗剂则可以逆转这一效应；对于偶联Gαi的受体，在激动剂刺激的同时用forskolin刺激cAMP产生，那么激动剂则抑制forskolin诱导的cAMP的生成，因此对照只给forskolin的细胞组可以通过665nm荧光强度的增加反应激动剂的效应。
该试剂盒的灵敏度很高，室温下反应在20h内是稳定的。本试剂盒适用于在384孔板中进行24μl的微量分析。
2.保存条件
避光2~4℃保存，过期时间见外包装。
3.盒内试剂
cAMP标准品：1管，1ml。（50μM）
生物素标记的cAMP（b-cAMP）：1管，25μl。
铕标的抗生物素蛋白链菌素：1管，25μl。
荧光标记的cAMP抗体：1管，40μl。
检测缓冲液：1瓶，25ml。
4.需要自配的其他溶液
l Hank’s balanced salt solution (HBSS): NaCl 8.0g、CaCl2 0.14g、KCl 0.4g、 KH2PO4 0.06g、Na2HPO4?7H2O0.09g、MgCl2.6H2O0.10 g、MgSO4.7H2O0.10 g、NaHCO30.35g、葡萄糖1.0g，加H2O至 1000ml (用7.5%NaHCO调节PH值=7.4)
l Versene消化液（1L）：EDTA 0.372 g，NaCl 8.0g，KCl 0.20 g，KH2PO40.20g，Na2HPO4 1.15 g，D-glucouse 0.2 g，pH 7.4
l HEPES缓冲液(1mol/L)：取2.383gHEPES溶于10ml去离子水中。
l 7.5%BSA溶液：取0.75gBSA溶于10ml去离子水中
l 0.5M IBMX溶液：11.11mg IBMX溶于100μl DMSO中，-20℃冻存。
l 刺激缓冲液（SB）：14 ml HBSS(1×)+75μlHEPES(1mol/L)+200μlBSA (7.5%)。(注：在测定细胞cAMP时，反应缓冲液中要加入IBMX 0.5mmol/L)
l 吗啡贮存液(10mM)：盐酸吗啡37.585mg溶于10ml生理盐水中，0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
l 纳络酮母液(100mM)：纳络酮4mg溶于100μl 生理盐水中，用时工作液按照1:500稀释，溶剂为含有IBMX的反应缓冲液。
Nature重磅综述 | 从机制到治疗——深度解析细胞衰老与个体衰老123
小雨和桥2021-07-23
如题目，想知道这个细胞是什么细胞～
2008年《心理学》首轮复习自测模拟试题(三)123
老大白2021-07-29
我做的是细胞因子的刺激和抑制某条通路后观察是否有影响，分组为空白组，空白+抑制剂，刺激组，刺激+抑制剂，最开始用的单因素方差分析，LSD-T和SNK-Q检验，但是同学说我这里面有两个处理因素，所以不能单因素方差分析，应该直接空白和空白+抑制，空白和刺激，刺激和刺激+抑制剂进行独立样本T检验，现在脑子是混乱的，拜托园子里的大神们帮我看看，感激不尽！！
在细胞培养时怎么去除里边的成纤维细胞123
胆蒙擦522021-08-07
最快的办法，用齐氏生物的FibrOutTM成纤维抑制剂，效果还是不错的！
成纤维细胞生长抑制试剂盒—FibrOut™ 是由多种生化复合物组成的混合物、抗体或特殊的试剂。它能够抑制成纤维细胞过度增长或污染从而有效地增加靶细胞的产量。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都可定制到特定组织和特定细胞，经验证可与对应的PrimaCellTM系统高效协同工作，可为您带来每一类原代细胞培养的最佳结果。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都配备了最合适的缓冲液。
FibrOut™ 是一种包含几种生化复合物和试剂的完整系统，它在原代细胞培养中能抑制成纤维细胞增殖，从而促进靶细胞生长。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都可定制到特定组织和特定细胞，经验证可与对应原代细胞培养试剂盒-PrimaCellTM高效协同工作，可为您带来每一类原代细胞培养的最好结果。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都配备了最合适的缓冲液。成分包括 (1)胰蛋白酶；(2)胶原酶；(3)D-缬氨酸；(4)顺式羟基脯氨酸；(5)硫柳汞；(6)苯巴比妥；(7)系列血清替代品；(8)抗中胚层带抗体。
参考文献：
1. Cancer Res. 2010 May 1;70(9):3537-46，Epub 2010 Apr 20. Requirement of the NF-kappaB subunit p65/RelA for K-Ras-induced lung tumorigenesis. Bassères DS, Ebbs A, Levantini E, Baldwin AS.
2. Nat Commun. 2013;4:1795. Recruitment of mesenchymal stem cells into prostate tumours promotes metastasis. Jung Y, Kim JK, Shiozawa Y, Wang J, Mishra A, Joseph J, Berry JE, McGee S, Lee E, Sun H, Wang J, Jin T, Zhang H, Dai J, Krebsbach PH, Keller ET, Pienta KJ, Taichman RS.
3. Mol Biol Cell. 2012 Jul;23(14):2755-69. Calcium-calmodulin kinase I cooperatively regulates nucleocytoplasmic shuttling of CCTα by accessing a nuclear export signal. Agassandian M, Chen BB, Pulijala R, Kaercher L, Glasser JR, Mallampalli RK.展开
成纤维细胞生长抑制试剂盒—FibrOut™ 是由多种生化复合物组成的混合物、抗体或特殊的试剂。它能够抑制成纤维细胞过度增长或污染从而有效地增加靶细胞的产量。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都可定制到特定组织和特定细胞，经验证可与对应的PrimaCellTM系统高效协同工作，可为您带来每一类原代细胞培养的最佳结果。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都配备了最合适的缓冲液。
FibrOut™ 是一种包含几种生化复合物和试剂的完整系统，它在原代细胞培养中能抑制成纤维细胞增殖，从而促进靶细胞生长。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都可定制到特定组织和特定细胞，经验证可与对应原代细胞培养试剂盒-PrimaCellTM高效协同工作，可为您带来每一类原代细胞培养的最好结果。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都配备了最合适的缓冲液。成分包括 (1)胰蛋白酶；(2)胶原酶；(3)D-缬氨酸；(4)顺式羟基脯氨酸；(5)硫柳汞；(6)苯巴比妥；(7)系列血清替代品；(8)抗中胚层带抗体。
参考文献：
1. Cancer Res. 2010 May 1;70(9):3537-46，Epub 2010 Apr 20. Requirement of the NF-kappaB subunit p65/RelA for K-Ras-induced lung tumorigenesis. Bassères DS, Ebbs A, Levantini E, Baldwin AS.
2. Nat Commun. 2013;4:1795. Recruitment of mesenchymal stem cells into prostate tumours promotes metastasis. Jung Y, Kim JK, Shiozawa Y, Wang J, Mishra A, Joseph J, Berry JE, McGee S, Lee E, Sun H, Wang J, Jin T, Zhang H, Dai J, Krebsbach PH, Keller ET, Pienta KJ, Taichman RS.
3. Mol Biol Cell. 2012 Jul;23(14):2755-69. Calcium-calmodulin kinase I cooperatively regulates nucleocytoplasmic shuttling of CCTα by accessing a nuclear export signal. Agassandian M, Chen BB, Pulijala R, Kaercher L, Glasser JR, Mallampalli RK.展开
【求助】raybiotech ELISA试剂盒怎么样?? 蛋白质和糖学技术讨论...123
K斐狗RGa12017-09-28
1
、
Cell-Based ELISA
的优点：
Cell-Based ELISA
（基于细胞的
ELISA
）是一种全新的
ELISA
技术，有两个最突出的优点：
1.1
不需要抽提蛋白、包被微孔板：细胞直接在微孔板里培养，待检测的时候，将细胞固定在微孔板上并
进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时，由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
程度上偏离了实际情况。
同时不用包被微孔板，
简化了实验流程，
有助于提高效率。
科研人员在一个
96
孔
酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样
本的损失也能降到最低，比起其他普通的
ELISA
测定方法，这项全新的
ELISA
技术能更快速、更方便
地一次检测大量的细胞内蛋白。
1.2
可同时检测两种不同蛋白：
封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗，
然后再加入不同的
二抗，加入两种荧光底物，检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的，可以减少工作量，此
外还可以满足一些特殊的实验需要，例如，需要测定某个蛋白的磷酸化比例，就需要测定磷酸化蛋白的数
量和总蛋白的数量，这两个测定在同一次实验进行，有助于消除实验误差，得到更为精确的实验结果。
2
、
Cell-Based ELISA
的两种技术：
某些公司发展了双通道
Cell-Based ELISA
技术；
双通道与单通道
Cell-based ELISA
比较：
双通道
cell-based ELISA
，顾名思义，即一次可以同时检测两种目的蛋白，
R&D Systems
提供的
Cell-based ELISA
就是双通道
cell-based ELISA
，原理略：（需要荧光检测方式和相应仪器）；
单通道
cell-based ELISA
，即一次只能检测一种目的蛋白，他和普通
ELISA
的主要区别在于样品处理过
程
3
、
cell-based ELISA
的应用：
该产品，最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量；
4
、有
cell-based ELISA
产品的公司：目前，多家
elisa
产品提供
商均
提供
cell
based
elisa
试剂盒，
如
Rnd
systems
，
raybiotech
，
ebioscience
，
millipore
等公司；
5
、如何自己进行
cell based elisa
实验？
事实上，根据单通道的
cell based elisa
原理，可以自己建立
cell based elisa
实验系统；
细胞加入培养板中；
加入刺激物或者抑制剂进行培养；
对细胞进行固定或者封闭；
加入第一抗体；
加入
HRP
结合的二抗（二抗的选择，同
western blot
）；
加入底物进行显色；
、
Cell-Based ELISA
的优点：
Cell-Based ELISA
（基于细胞的
ELISA
）是一种全新的
ELISA
技术，有两个最突出的优点：
1.1
不需要抽提蛋白、包被微孔板：细胞直接在微孔板里培养，待检测的时候，将细胞固定在微孔板上并
进行通透处理即可。这样就避免了抽提蛋白时，由于客观和主观上引起样品的损失而导致实验结果在一定
程度上偏离了实际情况。
同时不用包被微孔板，
简化了实验流程，
有助于提高效率。
科研人员在一个
96
孔
酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样
本的损失也能降到最低，比起其他普通的
ELISA
测定方法，这项全新的
ELISA
技术能更快速、更方便
地一次检测大量的细胞内蛋白。
1.2
可同时检测两种不同蛋白：
封闭后加入两种抗不同蛋白且来源于不同宿主的一抗，
然后再加入不同的
二抗，加入两种荧光底物，检测两个波长。同时检测两种蛋白的好处是显而易见的，可以减少工作量，此
外还可以满足一些特殊的实验需要，例如，需要测定某个蛋白的磷酸化比例，就需要测定磷酸化蛋白的数
量和总蛋白的数量，这两个测定在同一次实验进行，有助于消除实验误差，得到更为精确的实验结果。
2
、
Cell-Based ELISA
的两种技术：
某些公司发展了双通道
Cell-Based ELISA
技术；
双通道与单通道
Cell-based ELISA
比较：
双通道
cell-based ELISA
，顾名思义，即一次可以同时检测两种目的蛋白，
R&D Systems
提供的
Cell-based ELISA
就是双通道
cell-based ELISA
，原理略：（需要荧光检测方式和相应仪器）；
单通道
cell-based ELISA
，即一次只能检测一种目的蛋白，他和普通
ELISA
的主要区别在于样品处理过
程
3
、
cell-based ELISA
的应用：
该产品，最多发展起来的是用于检测磷酸化和非磷酸化蛋白的相对含量；
4
、有
cell-based ELISA
产品的公司：目前，多家
elisa
产品提供
商均
提供
cell
based
elisa
试剂盒，
如
Rnd
systems
，
raybiotech
，
ebioscience
，
millipore
等公司；
5
、如何自己进行
cell based elisa
实验？
事实上，根据单通道的
cell based elisa
原理，可以自己建立
cell based elisa
实验系统；
细胞加入培养板中；
加入刺激物或者抑制剂进行培养；
对细胞进行固定或者封闭；
加入第一抗体；
加入
HRP
结合的二抗（二抗的选择，同
western blot
）；
加入底物进行显色；
抑制素 123
腐姐控百合5852021-08-09
1.洗液：在100ml浓缩洗液中加入900ml去离子水稀释。室温密封情况下可保存1个月。
2.微孔板：选择实验所需的板条数。剩余不用的部分随同干燥剂密封放回原袋。 1.包被有抗抑制素bB亚单位抗体的微孔板（Anti-InhibinB-CoatedMicrotitrationStrips）：96孔，2-8ºC下密封保存。
2.标准品A/样本稀释液（InhibinBStandardA/SampleDiluent）：2ml×1瓶，胎牛血清，含0pg/mL二聚体抑制素B。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
3.标准品B-G（InhibinBStandardsB-G）：1ml×6瓶，胎牛血清，含二聚体抑制素B的浓度为10,30,100,250,500,1000pg/mL。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
4.质控（InhibinBControls）：1ml×2瓶，浓度I、II，胎牛血清，含低浓度和高浓度的抑制素A二聚体。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
5.样本稀释液A（InhibinBSampleBufferA）：10ml×1瓶，2-8ºC下保存。
6.样本稀释液B（InhibinBSampleBufferB）：10ml×1瓶，2-8ºC下保存。
7.抗体-生物素结合物（InhibinBAntibody-BiotinConjugate）（即用型）：10ml×1瓶，含生物素标记的抗抑制素a亚单位抗体。2-8ºC下保存。
8.酶结合物（浓缩）（Streptavidin-EnzymeConjugate）（即用型）：10ml×1瓶，含链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。2-8ºC下保存。
9.TMB底物溶液（TMBChromogenSolution）：15ml×1瓶，2-8ºC下保存。
10.终止液（StoppingSolution）：15ml×1瓶，为0.2M的硫酸。2-8ºC下保存。
11.浓缩洗液（WashConcentrate）：100ml×1瓶，2-8ºC下保存。 操作前所有试剂都应平衡至室温(~25ºC)并充分混匀。标准品、质控及待测样本需同时做双份。
1.取出实验所需板条，并记录各孔位置。
2.在对应的孔中加入标准品、质控及待测样本各50ul。
3.每孔加入25ul样本稀释液A。
4.每孔加入25ul样本稀释液B。
5.封板，以300-400rpm速度震荡，室温下过夜（14-18小时）。
6.洗板3次，在吸水纸上拍干。
7.每孔加入50ul抗体-生物素结合物。
8.封板，以500-700rpm速度震荡，室温下孵育1.5小时。
9.洗板6次，在吸水纸上拍干。
10.每孔加入50ul链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。
11.封板，以500-700rpm速度震荡，室温下孵育20分钟。
12.洗板6次，洗完最后一次以后，将洗液在孔内停留15分钟再除去。在吸水纸上拍干。
13.在每孔中加入100ulTMB底物溶液。
14.以500-700rpm速度震荡，室温下避光孵育15-30分钟。
15.每孔加入100ul终止液。
16.30分钟内在450nm处读数。
注：必须以零标准作空白。如果能做到双波长测定，可在600或620nm处读数，将600（620）nm吸收值从450nm处减去，这样可以减少光学误差。 使用血清样本，静脉穿刺术采集血液。样本于2-8ºC可保存24小时，-20ºC或以下可保存30天。避免反复冻融样本。不应采用溶血或脂血的样本。冰冻的样本在实验前应解冻，并充分混匀。向左转|向右转
2.微孔板：选择实验所需的板条数。剩余不用的部分随同干燥剂密封放回原袋。 1.包被有抗抑制素bB亚单位抗体的微孔板（Anti-InhibinB-CoatedMicrotitrationStrips）：96孔，2-8ºC下密封保存。
2.标准品A/样本稀释液（InhibinBStandardA/SampleDiluent）：2ml×1瓶，胎牛血清，含0pg/mL二聚体抑制素B。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
3.标准品B-G（InhibinBStandardsB-G）：1ml×6瓶，胎牛血清，含二聚体抑制素B的浓度为10,30,100,250,500,1000pg/mL。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
4.质控（InhibinBControls）：1ml×2瓶，浓度I、II，胎牛血清，含低浓度和高浓度的抑制素A二聚体。使用前2-8ºC下保存。打开后2-8ºC下可保存2周。于-20ºC可长期保存。
5.样本稀释液A（InhibinBSampleBufferA）：10ml×1瓶，2-8ºC下保存。
6.样本稀释液B（InhibinBSampleBufferB）：10ml×1瓶，2-8ºC下保存。
7.抗体-生物素结合物（InhibinBAntibody-BiotinConjugate）（即用型）：10ml×1瓶，含生物素标记的抗抑制素a亚单位抗体。2-8ºC下保存。
8.酶结合物（浓缩）（Streptavidin-EnzymeConjugate）（即用型）：10ml×1瓶，含链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。2-8ºC下保存。
9.TMB底物溶液（TMBChromogenSolution）：15ml×1瓶，2-8ºC下保存。
10.终止液（StoppingSolution）：15ml×1瓶，为0.2M的硫酸。2-8ºC下保存。
11.浓缩洗液（WashConcentrate）：100ml×1瓶，2-8ºC下保存。 操作前所有试剂都应平衡至室温(~25ºC)并充分混匀。标准品、质控及待测样本需同时做双份。
1.取出实验所需板条，并记录各孔位置。
2.在对应的孔中加入标准品、质控及待测样本各50ul。
3.每孔加入25ul样本稀释液A。
4.每孔加入25ul样本稀释液B。
5.封板，以300-400rpm速度震荡，室温下过夜（14-18小时）。
6.洗板3次，在吸水纸上拍干。
7.每孔加入50ul抗体-生物素结合物。
8.封板，以500-700rpm速度震荡，室温下孵育1.5小时。
9.洗板6次，在吸水纸上拍干。
10.每孔加入50ul链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。
11.封板，以500-700rpm速度震荡，室温下孵育20分钟。
12.洗板6次，洗完最后一次以后，将洗液在孔内停留15分钟再除去。在吸水纸上拍干。
13.在每孔中加入100ulTMB底物溶液。
14.以500-700rpm速度震荡，室温下避光孵育15-30分钟。
15.每孔加入100ul终止液。
16.30分钟内在450nm处读数。
注：必须以零标准作空白。如果能做到双波长测定，可在600或620nm处读数，将600（620）nm吸收值从450nm处减去，这样可以减少光学误差。 使用血清样本，静脉穿刺术采集血液。样本于2-8ºC可保存24小时，-20ºC或以下可保存30天。避免反复冻融样本。不应采用溶血或脂血的样本。冰冻的样本在实验前应解冻，并充分混匀。向左转|向右转
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