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PromoCell/Calcium Chloride Solution
品牌 / 
PromoCell
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C-34006
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Some types of primary human cells, especially Normal Human Epidermal Keratinocytes (NHEK), respond sensitively to the calcium concentration in the culture medium. Calcium Chloride solution allows the adjustment of the optimal amount of calcium required by the cells. PromoCell Calcium Chloride (CaCl2) Solution is prepared as a solution from highly pure tissue culture tested Calcium Chloride and cell culture-grade water. It is a clear colorless and sterile solution.The concentration of CaCl2 is 0.5 M.

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细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展,转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目,各有千秋,然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的,成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响显著,是转染试剂选择的重要依据,选试剂时要留意成分哦。严格来讲,转染的方法可以基于化学法、物理法(电穿孔、显微注射等)以及病... 查看更多>
脂质体介导的真核细胞转染实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高,重复性更好。 查看更多>
体内DNA转染试剂是由上海新睿生物科技有限公司代理或销售的SignaGen品牌的试剂,产品来源于美国。上海新睿生物科技有限公司是中国最权威的体内DNA转染试剂试剂销售服务商之一,在上海等地方销售体内DNA转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业体内DNA转染试剂仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的体内DNA转染试剂产品 查看更多>
                   SignaGen转染试剂的比较和特点 转染细胞广谱:转染几十种哺乳动物细胞和/或难转染细胞以及悬浮细胞 转染形式多样:转染DNA、mRNA、siRNA、miRNA、shRNA以及共转染DNA/RNA 转染技术优化提升:生物可降解聚合物的合成、增强型脂质体构建和PDCC优化技术等 转染试剂 转染的分子 特性   PolyJet™ 长DNA片段(<89kb... 查看更多>
河南佰柯生物科技有限公司在发布的Transfection Reagent(DNA/RNA)(转染试剂)供应信息,浏览与Transfection Reagent(DNA/RNA)(转染试剂)相关的产品或在搜索更多与Transfection Reagent(DNA/RNA)(转染试剂)相关的内容。 查看更多>
小提.pdfplasmid.pdfVigoFect.pdfmatrigel.pdf 查看更多>
很多实验室的研究生都要自己清洗试验用品并进行高压灭菌,这里有一份高压锅注意事项,希望对大家有用。啊?不能上传附件,那么就拷在这里吧。使用HVE-50高压蒸汽灭菌器时请先阅读此说明WARNING一.不能使用此高压蒸汽灭菌器消毒任何有破坏性材料和含碱金属成份的物质。消毒这些物品将会导致爆炸 查看更多>
Preparation of the probe. Probes are prepared as Digoxigenin labelled RNA . The labelling mix as well as all antibodies are purchased from Boehringer All condi 查看更多>
上海钰博生物科技有限公司在发布的Trans-fect常见细胞系转染试剂供应信息,浏览与Trans-fect常见细胞系转染试剂相关的产品或在搜索更多与Trans-fect常见细胞系转染试剂相关的内容。 查看更多>
纤维样细胞特效转染试剂-GenoFect是由北京吉利奥生物科技发展有限公司代理或销售的GENOBIO品牌的试剂,产品来源于北京。北京吉利奥生物科技发展有限公司是中国最权威的纤维样细胞特效转染试剂-GenoFect试剂销售服务商之一,在北京等地方销售纤维样细胞特效转染试剂-GenoFect试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业纤维样细胞特效转染试剂-GenoFect仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的纤维样细胞特效转染试剂-GenoFect产品 查看更多>
北京嘉美纽诺生物科技有限公司在发布的现货提供罗氏(Roche)生物公司HP转染细胞和新转染试剂X-tremeGENE9产品供应信息,浏览与现货提供罗氏(Roche)生物公司HP转染细胞和新转染试剂X-tremeGENE9产品相关的产品或在搜索更多与现货提供罗氏(Roche)生物公司HP转染细胞和新转染试剂X-tremeGENE9产品相关的内容。 查看更多>
相关专题 脂质体介导是目前条件下最方便的转染方法之一,适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,其转染率高,优于磷酸钙法,比它高5~100倍,能把DNA和RNA转染到各种细胞。 用LR进行转染时,首先需优化转染条件,应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等,对每批LR都要做:第一,先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细 ... 查看更多>
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悬浮细胞的转染方法:(以下内容转自生物帮资讯)
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
看了一篇文献说,某某干预对SV40转染的人成纤维细胞有细胞毒性。不明白他想说明什么。#细胞生物学#
质粒转染细胞后多久能提RNA做PCR
实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒,转染细胞没问题。
我觉得只要是注意以下2点就可以了:
1,注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染,收集菌体沉淀时防止菌液散落,经常用75%的乙醇擦拭手套。
2,最后洗脱时最好使用无内毒素的水,我们是用注射用水的。
无论是小提还是大提我们都是用的日常型的,并没有刻意用转染级的,因为转染量大,去内毒素的操作太麻烦,损失太大。
个人经验,BHK、CHO是很常用的转染用细胞,而且跟抗体非特异性反应也不高。一般来说,大多数可传代细胞的转染效率都是可以的,还要考虑所用转染剂的类型。

不建议你用MDCK细胞,非常难转染。
传统的转染试剂有一定的细胞毒性,在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如,阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的 磷酸基团 形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。另外,使用脂质体等转染 试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基,转染后 4-6h在更换成有血清培养基,这其实是为了减轻转染造成的细胞毒性。
我目前遇到的瞬时转染,没有专门做细胞同步化的。

但是有在转染前,将细胞进行重新传代的情况,这样做的目的在于保持细胞的活性状态。
“转染前将细胞以1.5-4.5X104 cells/well 的量(具体接细胞数请参考表1)接种在孔板中,于37℃, 5%CO2 的条件下进行培养,18-24小时( sf9细胞为3-4小时)后转染。”
细胞 (英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一般来说,细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成,即单细胞生物,高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类,但也有人提出应分为三类,即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞生物学。细胞体形极微,在显微镜下始能窥见,形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成,表面有细胞膜。高等植物细胞膜外有细胞壁,细胞质中常有质体,体内有叶绿体和液泡,还有线粒体。
转化(transformation)、转导(transduction)、转染(transfection)和感染(infection)是分子生物学实 验中将外源基因导入受体细胞的4 种技术,它们词形相近,概念上容易混淆。
“转化”是指含外源基因的重组质粒(载体)将外源基因直接导入原核细胞(如细菌);
“转导”指通过重组病毒载体将外源基因导入真核细胞或原核细胞;
“转染”指重组质粒载体或游离核苷酸在脂质体等介导下进入真核细胞;
“感染”在基因转移实验中强调重组病毒载体入侵受体细胞的过程。
在使用这4 个名词时, 应仔细分析基因转移实验的四要素——转移物、载体、介导方法、受体细胞类型,而正确区 分载体和受体细胞类型是辨析的关键点。当载体是重组质粒时,如受体细胞是原核细胞应使 用“转化”,如受体细胞是真核细胞则使用“转染”;当载体是重组病毒时,如强调转移物进 入受体细胞应使用“转导”,如强调重组病毒载体进入受体细胞的过程则使用“感染”。
细胞转染 123
忻忻相惜4582021-08-01
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染,此法可以快速100%感染,检测成功率高。向左转|向右转
请教做过DNA 脂质体法转染细胞的高手
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。

HAC15细胞转染,目前用的lip3000、lip2000都用过,不知道是试剂剂量使用问题,还是购买试剂问题,荧光显微镜一个视野下好的有几个荧光,有得没荧光,没荧光,没荧光,求HAC15细胞转染用什么转染试剂转染效率高!!!

heck293细胞,铺完板后,一共七块24孔板。发现有两块板的其中两个孔变黄,然后用脂质体试剂转染质粒(质粒浓度1600ng/ul)后细胞,溶液没有变黄。(一般正常情况下都会变黄)没变黄的孔里的细胞都没了。。。什么原因呢