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Gibco/Lipofectamine 3000 Transfection Reagent/0.75 mL/L3000008
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4000-520-616
Description
Lipofectamine®3000TransfectionReagentleveragesourmostadvancedlipidnanoparticletechnologytoprovidesuperiortransfectionperformancewithimprovedapplicationoutcomesandreproducIBLeresults.ThisreagentdeliverssuperiortransfectionefficiencyandimprovedcellviABIlityforthewidestrangeofhard-to-transfectandcommoncells(e.g.,HEK293,HeLa).SuccessfullytransfectthewidestvarietyofBIOLOGicallyrelevantcelltypeswithareagentthatoffers:
•Superiorperformance—ourhighestefficiencyreagentfordifficult-to-transfectcells
•Improvedcellviability—gentleonyourcells,withlowtoxicity
•Versatile—onereagentforDNA,RNA,andco-transfection
EfficientlyTransfectDifficult-to-TransfectCells
Lipofectamine®3000reagentisdesignedtoefficientlytransfectdifficult-to-transfectcells,yieldingsuperiortransfectionperformanceacrossthebroadestarrayofcelltypes.Successfullytransfectedcelltypesinclude:
| Fibroblast(3T3,COS-7) | Myoblast(C2C12,L6CRL-1458) |
| Hepatocyte(HepG2,HuH7) | Erythroleukemiccell(K562) |
| Breastcarcinoma(MCF7,Hs578T) | Prostatecarcinoma(LNCap) |
| Lungcarcinoma(A549,NCI-H460) | Osteosarcoma(U-2OS,Saos-2) |
| Coloncarcinoma(Caco2,SW480) | Pancreaticcarcinoma(PANC-1) |
| Skinmelanoma(SK-MEL-28) |
Viewperformancedatafor60+celllinespluscomparisontoLipofectamine2000>
TransfectCommonCellsEfficientlyandCost-Effectively
Forcommoncelltypes,Lipofectamine®3000reagentismorecost-effectivethanotherreagentsduetoitshighconcentrationandlowusageamount.The1.5mLsizeprovidesupto1500transfectionreactions(in24-wellplates).
AchieveSuperiorTransfectionEfficiencyWhileMaintainingLowToxicity
Lipofectamine®3000reagentmaintainsahightransfectionefficiencywithinarobustdynamicrangeoflipiddosesforquickandeasyoptimization.Alowtoxicitylipiddose(0.75µLfor24-wellplates)issuggestedforapplicationsrequiringminimaldisruptionofthecells.
EnableHighTransfectionEfficiencyinNovelGenomeEditingApplications
Lipofectamine®3000reagentissuitablefornovelgenomeeditingapplications.ItincreasesthelikelihoodofsuccessfulcleavageandrecombinationwithTALENsorCRISPRsthroughhighlyefficienttransfection,ultimatelymaximizingtheefficiencyofgeneticmodificationsandsimplifyingthedownstreamprocesses.
ForResearchUseOnly.Notforuseindiagnosticprocedures.
Figures
Part1:BetterperformanceinanarrayofcelllinescomparedtoLipofectamine®2000reagent
Lipofectamine®3000transfectionproceduredetails
Lipofectamine®3000transfectionworkflow
EnhancedtransfectionefficiencyusingLipofectamine®3000
Part2:BetterperformanceinanarrayofcelllinescomparedtoLipofectamine®2000reagent
CleavageefficiencyforGeneArt®TALENsandCRISPRs
Specifications
| CellType: | EstablishedCellLines, Hard-to-TransfectCells, PrimaryCells, StemCells |
|---|---|
| SampleType(Specific): | PlasmidDNA, RNAiPlasmids(shRNA,miR), SyntheticsiRNA |
| Classification: | AnimalOrigin-Free |
| TransfectionTechnique: | Lipid-BasedTransfection |
| SerumCompatible: | Yes |
| ProductLine: | Lipofectamine® |
| ProductSize: | 0.1mL |
Contents&storage
ContainsonevialofLipofectamine®3000ReagentandonevialofP3000TMEnhancerReagent.Storeat2–8°C.Donotfreeze.
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
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2020-05-07
南京诺唯赞生物科技有限公司在发布的【正品直销，售后保障】ExFect Transfection Reagent（Vazyme细胞转染试剂）供应信息，浏览与【正品直销，售后保障】ExFect Transfection Reagent（Vazyme细胞转染试剂）相关的产品或在搜索更多与【正品直销，售后保障】ExFect Transfection Reagent（Vazyme细胞转染试剂）相关的内容。 查看更多
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2018-11-03
Altogen 细胞转染 试剂 代理 Altogen细胞转染试剂代理美国Altogen公司是细胞类型特异性,预优化转染试剂,转染试剂盒,生物分子细胞内转送的全球领先制造商。为了高效交付... 查看更多
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2019-06-02
汉恒生物科技（上海）有限公司在发布的Lipo系列高效低毒细胞转染试剂供应信息，浏览与Lipo系列高效低毒细胞转染试剂相关的产品或在搜索更多与Lipo系列高效低毒细胞转染试剂相关的内容。 查看更多
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2020-01-06
北京裕恒丰科技有限公司在发布的成纤维细胞转染试剂盒供应信息，浏览与成纤维细胞转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与成纤维细胞转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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2018-07-16
上海通善生物科技有限公司是qiagen DNA转染试剂盒专业供应商，价格低，质量好，批次最新，免费技术指导，免费产品代测，免运费，服务周到，是国家重点实验室及国内各大院校长期指定供应商。qiagen DNA转染试剂盒品牌的核心供应商——上海通善生物公司简介如下:依托复旦大学，集研发、销售、实验室技术服务于一体的高科技企业。产品领域：分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域。qiagen 查看更多
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2018-07-21
货号：SL100499 查看更多
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2019-02-13
北京嘉美纽诺生物科技有限公司在发布的现货提供罗氏（Roche）生物公司HP转染细胞和新转染试剂X-tremeGENE9产品供应信息，浏览与现货提供罗氏（Roche）生物公司HP转染细胞和新转染试剂X-tremeGENE9产品相关的产品或在搜索更多与现货提供罗氏（Roche）生物公司HP转染细胞和新转染试剂X-tremeGENE9产品相关的内容。 查看更多
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2021-07-14
基因转染技术将特定的遗传信息传递到真核细胞 中，这种技术不但革新了生物学和医学中许多基本问题的研究，也推动了诊断和治疗方面的分子技术 发展，并使基因治疗 成为可能。基因转染已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等研究。... 查看更多
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2018-12-26
用DAPI进行细胞染色DAPI的配置Stock solution of 1mg/ml in ddH2O; working solution of 0.25mg/ml to 50mg/ml in ddH2O or PGM. 1.Place sample on slide. 2.Add a few drops worki 查看更多
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2021-07-19
河南佰柯生物科技有限公司在发布的Transfection Reagent（DNA／RNA）（转染试剂）供应信息，浏览与Transfection Reagent（DNA／RNA）（转染试剂）相关的产品或在搜索更多与Transfection Reagent（DNA／RNA）（转染试剂）相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
小提.pdfplasmid.pdfVigoFect.pdfmatrigel.pdf 查看更多
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2021-07-21
汉恒生物科技（上海）有限公司在发布的汉恒生物LipoFiter转染试剂供应信息，浏览与汉恒生物LipoFiter转染试剂相关的产品或在搜索更多与汉恒生物LipoFiter转染试剂相关的内容。 查看更多
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商品咨询
细胞转染的详细过程123
dppezmiu2017-10-02
您好，现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵，技术要求高，都会寻求外包。但是现在竞争也比较大，的得看单位这边整体做的怎么样。
其次要看下你选择单位的规模如何，上海这边的，你可以看下基尔顿生物，原代细胞培养，动物造模，整体课题外包。
其次要看下你选择单位的规模如何，上海这边的，你可以看下基尔顿生物，原代细胞培养，动物造模，整体课题外包。
BV2细胞用什么方法做转染123
风雨gHY22A2021-07-21
BV2细胞用什么方法做转染
悬浮细胞的转染方法：（以下内容转自生物帮资讯）
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
悬浮细胞的转染方法：（以下内容转自生物帮资讯）
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
关于Raw264.7转染的求助 细胞技术讨论版论坛123
qingwudarao2021-08-11
细胞转染 实验方法 123
一直攀爬的蜗牛2021-07-31
为什么转染的时候有细胞密度的要求呢? 实验室综合讨论区 干细胞...123
妮露LJB2017-10-02
大致是两个因素：转染对细胞有一定损伤，细胞密度大些，有利于减少平均损伤；转染试剂、DNA用量与细胞量有关。
转染前细胞长到多少比较合适做实验 123
蘑菇头丌Nj6R2021-08-18
细胞 （英文名：cell）并没有统一的定义，比较普遍的提法是：细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一般来说，细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成，即单细胞生物，高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类，但也有人提出应分为三类，即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞生物学。细胞体形极微，在显微镜下始能窥见，形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成，表面有细胞膜。高等植物细胞膜外有细胞壁，细胞质中常有质体，体内有叶绿体和液泡，还有线粒体。
【求助】DC细胞转染 细胞技术讨论版123
蓝天98962021-08-15
U2OS 细胞转染 分子生物 干扰/敲除论坛学术科研互动平台123
盩羉2021-07-29
可以。常用脂质体转染法。
脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹入内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。
脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用将DNA分子包裹入内，形成DNA一脂复合体，也能被表面带负电荷的细胞膜吸附，再通过膜的融合或细胞的内吞作用，偶尔也通过直接渗透作用，DNA传递进入细胞，形成包涵体或进入溶酶体 其中一小部分DNA能从包涵体内释放，并进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。
signagen_signagen【价格，厂家，图片，批发，采购】_123
粉爱天晴2021-07-22
我刚开始做转染，悬浮细胞，分别做过表达和敲减，看了很多文献，大都没有提及转染后是用转染的这同一批细胞同时做pcr，wb，cck8，凋亡，细胞周期；还是说这次转染只做pcr或wb，再转染一次做cck8或细胞周期。剩下的功能试验均同前，转染一次做一次？我养的是悬浮细胞，转染后做cck8这些功能试验前需要离心换液吗？跪谢解答！
【求助】真核表达,基因克隆时是否要考虑3·端非翻译序列。123
sen4042021-08-09
细胞转染可以：（1）真核细胞可以掺入外源DNA而获得新的遗传标志；（2）应用于转基因动植物；（3）应用于生物制药、基因治疗、RNA干扰。
脂质体介导法
实验原理
上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。
利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。
本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
脂质体介导法
实验原理
上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。
外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。
利用脂质体转染法最重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。
上图是本次实验采用的脂质体中阳离子组分的结构的示意图。
本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。
转染后,细胞发生死亡怎么回事 123
KyoyaRB352017-10-02
可能有多种原因：
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；
转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；
细胞贴壁转染之后没有正常换液。
建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection；对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。
以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。祝顺利，加油~
siRNA转染后什么时候做蛋白检测(如WesternBlot)最好?_sales 123
狗狗乓北252021-08-08
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