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+,GAPDH antibody, 蚂蚁淘商城
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covalab/GAPDH antibody/250 ug/mab71548
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covalab
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Product Codemab71548
ImmunogenHuman or rabbit GAPDH.
Target Specificity Reacts with bovine GAPDH. Cross reacts with goat, human, porcine, rabbit and rat protein.
NameGAPDH
Uniprot IDP04406
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Product typePrimary antibodies, Loading controls
ClonalityMonoclonal antibody
IsotypeIgG1
Produced inMouse
SpeciesHuman, Rat, Rabbit, Goat, Bovine, Porcine
LabellingNone
AppearanceLiquid
Conc. / Activity6 mg/ml
FormPurified (protein A)
ConstituentsPBS, pH 7.4
Preservatives0.1% NaN3
StorageMay be stored at 4°C for short-term only. For long-term storage and to avoid repeated freezing and thawing, aliquot and store at -20°C. Aliquots are stable for at least 12 months at -20°C.
ApplicationsWestern Blot, IHC - Paraffin sections, Immunocytochemistry, ELISA
Working dilutionsELISA, ICC, IHC-P (5 µg/ml), WB
Print datasheet

GAPDH antibody<br/>(mab71548)<br/>Anti-GAPDH antibody IHC of human skin. Immunohistochemistry of formalin-fixed, paraffin-embedded tissue after heat-induced antigen retrieval. Antibody dilution 5 µg/ml.

  • (mab71548)Anti-GAPDH antibody IHC of human skin. Immunohistochemistry of formalin-fixed, paraffin-embedded tissue after heat-induced antigen retrieval. Antibody dilution 5 µg/ml.">
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ASTRACT We describe a rapid and quantitative flow cytometric method for determining the apoptotic or anti-apoptotic potential of a gene in various cell types. 查看更多>
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  凋亡扮演哪些重要的角色?凋亡,经常也说“细胞自杀”,对于身体各器官的发育和正常发挥功能来说非常重要,我们的身体需要清除一些不需要的、损伤的、可能有害的细胞。但是在某些情况下如癌症的发生,凋亡过程紊乱导致细胞不可控的存活及生长,或者另一种情况如心脏受袭导致凋亡过激而杀死了更多无辜的细胞。对于人类健康来说,这个过程如此重要,于是科学家们投入了大量的热情去了解不同的疾病环境下如何抑制或诱导凋亡。  什么诱导了一个细胞的凋亡?突然消除了... 查看更多>
ELISA试剂盒接收到凋亡信号后, 核基质蛋白(NMPs)释放。NMP的释放与细胞死亡相,MERCK的Cell Death Detection(NMP) ELISA可定量检测细胞培养上清中的NMP水平变化。此种检测方法优于其它方法的原因在于 查看更多>
一、细胞凋亡实验外包形态学观察方法:1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细... 查看更多>
I. Protocol1. Harvest cellsOptional: wash plate with 37°C PBS (gently, so as not to lose cells); check on microscope,after aspirate PBS or mediaPlace plate on 查看更多>
TIGAR,细胞凋亡和糖酵解的一种p53诱导调节因子p53肿瘤抑制蛋白能够通过多种机制阻止癌症的发展,包括使细胞周期停滞、细胞凋亡和维持基因组的稳定性等。研究人员确定出一种叫做TIGAR(TP53诱导糖酵解和凋亡调节因子)的p53诱导基因。通派生物 现货供应:耳炎差异球菌 ATCC 51267通派生物 现货供应:杀鲑气单胞菌日本鲑亚种 ATCC 27013通派生物 现货供应:栖冷克吕沃尔菌 ATCC 33435TIGA 查看更多>
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细胞凋亡检测技术与方法有哪些 查看更多>
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CCK8试剂盒细胞凋亡检测的创举,MTT法被彻底抛弃,现附上一篇应用engreen生物的CCK8试剂盒研究黄酮和单宁通过通过线粒体和p53信号通路诱导人肺腺癌细胞凋亡的文献,以供参考。



hinaL.RhizomeInduceApoptosisViaMitochondrialPathwayandMDM2-p53SignalinginHumanLungAdenocarcinomaCells.pdf(8891.03k)
常用细胞凋亡检测方法123
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细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。


一、细胞凋亡的形态学检测


根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。


1光学显微镜和倒置显微镜


(1)未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。

贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。


(2)染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割

成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。


2荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜


一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。


常用的DNA特异性染料有:HO33342(Hoechst33342),HO33258(Hoechst33258),DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。


Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。


DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5~1mg/ml。


结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;Ⅱb期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体(图1)。


3透射电子显微镜观察


 结果评判:凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期(pro-apoptosisnuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构(图2);Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。

之前一直做的是四氯化碳引起的小鼠肝组织急性损伤石蜡切片,买的是50t的试剂盒,做了四组重复,中间有一组结果较不好,又买了20t的试剂盒做重复,但是再也做不出来,后面换了DAB,结果还是不理想,DAB显色已经延长至8个小时,才有细微的显色,所有实验条件跟之前保持一样!求大神

流式细胞仪细胞凋亡率对照组凋亡率高,贴壁细胞,对照组凋亡率比加药处理组还高,30%多,做了好几次都这样,有大神知道怎么解决么

,多谢

方式不同:凋亡是突然死亡,程序性死亡是渐进性死亡。
诱因不同:凋亡是受外因,细胞程序性死亡是受内因。
意义不同:凋亡是为了机体健康,意义积极。程序性死亡是顺应基因突变,意义消极。
主要是:细胞变圆,染色质凝聚、分块,胞质皱缩.之后整个细胞通过发芽、起泡等方式形成一些 球形的突起,并在其基部绞断而脱落形成大小不等的内含胞质、细胞器及核碎片的凋亡小体,然后被周围细胞所吞噬.
其他的特征是:1.由基因控制,2,不引起炎症.3.质膜不破裂,4,染色质DNA的有控裂
细胞凋亡最终是被吞噬细胞吞噬的,具体过程比较复杂,如下:
细胞凋亡首先出现的是细胞体积缩小,连接消失,与周围的细胞脱离,然后是细胞质密度增加,线粒体膜电位消失,通透性改变,释放细胞色素C到胞浆,核质浓缩,核膜核仁破碎,DNA降解成为约180bp-200bp片段;胞膜有小泡状形成,膜内侧磷脂酰丝氨酸外翻到膜表面,胞膜结构仍然完整,最终可将凋亡细胞遗骸分割包裹为几个凋亡小体,无内容物外溢,因此不引起周围的炎症反应,凋亡小体可迅速被周围专职或非专职吞噬细胞吞噬。
刚开始做实验,看文献的小白,想知道氧化应激导致细胞凋亡的哪些通路,因为打算检测SOD,MDA,等指标并没有找到这些与细胞通路的相关性,看过战友发过相似的帖子,但是回复的没有,所以重新发,望多多指教
细胞凋亡受到严格调控,在正常细胞Caspase处于非活化的酶原状态,凋亡程序一旦开始,Caspase被活经随后发生凋亡蛋白酶的层叠级联反应,发生不可逆的凋亡——细胞调节细胞凋亡的举例如下。 迄今为止,人类已发现多种凋亡抑制分子,包括P53,CrmA,IAPs,FLIPs以及Bcl-2家族的凋亡抑制分子。
1)P53和CrmA是广谱凋亡抑制剂,体外研究结果表明P35以竞争性结合方式与靶分子形成稳定的具有空间位阻效应的复合体并且抑制Caspases活性,同时P53在位点DMQD!G被靶Caspases特异切割,切割后的P35与caspase的结合更强,CrmA(Cytokine response modfer A)是血清蛋白酶抑制剂,能够直接抑制多种蛋白酶的活性,但还未发现在哺乳动物中发现P35和CrmA的同源分子。
2)FLIPs(FLICE-imhibirory proterins)能抑制Fas/TNFR1介导的细胞凋亡。它有多种变异体,但其N-端功能前区(Prodomain)完全相同,C端长短不一。FLIPs通过DED功能区,与FADD和Caspase-8,10结合,拮抗它们之间的相互作用,从而抑制Caspase8,10募集到死亡受体复合体和它们的起始化。
3)凋亡抑制蛋白(IAPs,inhibitors of Apoptosisprotien)为一组具有抑制凋亡作用的蛋白质,首先是从杆状病毒基因组克隆到,发现能够抑制由病毒感染引起的宿主细胞死亡应答。其特性是有大约20氨基酸组成的功能区,这对IAPs抑制凋亡是必需要的,它们主要抑制Caspase3,-7,而不结合它的酶原,对Caspase则即可以结合活化的,又可结合酶原,进而抑制细胞凋亡。 这一家族有众多成员,如Mcl-1、NR-B、A1 、Bcl-w、Bcl-x、Bax、Bak、Bad、Bim等,它们分别既有抗凋亡作用,也有促凋亡的作用。多数成员间有两个结构同源区域,在介导成员之间的二聚体化过程中起重要作用。Bcl-2成员之间的二聚体化是成员之间功能实现或功能调节的重要形式。Bcl-2生理功能是阻遏细胞凋亡,延长细胞寿命,在一些白血病中Bcl-2呈过度表达。
Bcl-2的亚细胞定位已经明确,它在不同的细胞类型可以定位于线粒体、内质网以及核膜上,并通过阻止线粒体细胞色素C的释放而发挥抗凋亡作用。此外, Bcl-2具有保护细胞的功能, Bcl-2的过度表达可引起细胞核谷胱苷肽(GSH)的积聚,导致核内氧化还原平衡的改变,从而降低了Caspase的活性。Bax是Bcl-2家族中参与细胞凋亡的一个成员,当诱导凋亡时,它从胞液迁移到线粒体和核膜。有人研究发现,细胞毒性药物诱发凋亡时,核膜Bax水平的上升与lamin及PARP两种核蛋白的降解呈正相关。用Bax寡核苷酸处理的细胞,只能特异地阻断Lamin的降解,对PARP的降解不起作用。这种效应的调控机制仍然不清楚。
总之,细胞凋亡的调节是非常复杂的,参与的分子也非常多,还有很多不为我们所知的机理需要我们一步的探索。向左转|向右转
细胞凋亡的速率与它们的功能是有关系的。向左转|向右转
凋亡是多基因严格控制的过程。这些基因在种属之间非常保守,如Bcl-2家族、caspase家族、癌基因如C-myc、抑癌基因P53等,随着分子生物学技术的发展对多种细胞凋亡的过程有了相当的认识,但是迄今为止凋亡过程确切机制尚不完全清楚。而凋亡过程的紊乱可能与许多疾病的发生有直接或间接的关系。如肿瘤、自身免疫性疾病等,能够诱发细胞凋亡的因素很多,如射线、药物等。
其实从严格的词学意义上来说,细胞程序性死亡(PCD)与细胞凋亡是有很大区别的。细胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的,并受到严格程序控制的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙,其变态过程中尾部的消失伴随大量细胞死亡,高等哺乳类动物指间蹼的消失、颚融合、视网膜发育以及免疫系统的正常发育都必须有细胞死亡的参与。这些形形色色的在机体发育过程中出现的细胞死亡有一个共同特征:即散在的、逐个地从正常组织中死亡和消失,机体无炎症反应,而且对整个机体的发育是有利和必须的。因此认为动物发育过程中存在的细胞程序性死亡是一个发育学概念,而细胞凋亡则是一个形态学的概念,描述一件有着一整套形态学特征的与坏死完全不同的细胞死亡形式。但是一般认为凋亡和程序性死亡两个概念可以交互使用,具有同等意义。细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。
受环境影响;
凋亡虽是自主的但一般有外界因素刺激,致使信号传导,近而控制基因表达
生物性状是外界环境与基因共同决定的
比如,正常的杨树在北方到秋天会落叶,这是细胞凋亡,程序化的。但是,在南方,它不会在秋天凋亡.因此,细胞凋亡受环境影响。

细胞凋亡是细胞程序化死亡的一种,是指细胞在凋亡因子刺激下发生的受基因调控的细胞自杀性行为。本文威正翔禹/缔一生物为您分析什么是细胞凋亡?它与细胞坏死有什么区别?

细胞凋亡存在于正常生理情况下,是在个体发育、多细胞生物体平衡和疾病发生中起重要作用的一种细胞死亡形式。细胞凋亡有别于细胞死亡的另一种方式——细胞坏死(necrosis)。

细胞坏死与细胞凋亡的区别首先在于外观形态上变化不同,坏死的细胞表现为体积胀大,细胞膜失去了完整性,易被染料(如台盼蓝)所透过;而凋亡的细胞则表现为细胞体积变小。

细胞凋亡是一个受基因严密调控的生物过程,而细胞坏死则通常是偶然因素,如受热和药物损伤等引起溶酶体的颗粒内容物释放失控引起;坏死细胞会引发炎症初期的免疫反应,而凋亡细胞在通常情况下并不诱导抗炎症反应。然而,细胞坏死和细胞凋亡的区别也不是绝对的,同一种诱导因素(如局部缺血、H202)可能引发凋亡或坏死,取决于诱导因素的强弱和损伤的严重性。

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本文转自:威正翔禹/缔一生物官方网站:http://www.viansaga.com/h-col-124.html