细胞自噬染色检测试剂盒
(MDC
法
)
简介：
自噬
(autophagy)
是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞食物在溶
酶体内降解的过程，自噬体
(autophagosome)
为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细
胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、
病毒和细菌等。单丹磺酰尸胺
(Dansylcadaverine,MDC)
是一种荧光色素，是嗜酸性染色
剂，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长
355nm
。阻
断滤光片波长
512nm
。
Leagene
细胞自噬染色检测试剂盒
(MDC
法
)
，适用于培养细胞的
自噬染色，又称为
MDC
染色液，可与
EB
合用双染。
组成：
操作步骤
(
仅供参考
)
：
(
一
)
、
MDC
单独染色：
1
、
用去离子水稀释
1
×
Washbuffer
至
1
×。
2
、
离心，收集细胞，用
1
×
Washbuffer
清洗细胞
1
次，弃上清。
3
、
加入适量的
1
×
Washbuffer
重悬细胞，计数并调节细胞浓度至
10
6
/ml
。
4
、
取适量细胞悬液至新的
EP
管中，加入
MDCStain
，轻轻混匀。
5
、
室温避光染色。
6
、
离心收集细胞，用
1
×
Washbuffer
清洗细胞
2
次，弃上清。
7
、
加入
Collectionbuffer
重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。
8
、
荧光显微镜下观察
(
激发滤光片波长
355nm
，阻断滤光片波长
512nm)
，计数并拍照。
(
二
)
、与
EB
双染色：
1
、
用去离子水稀释
1
×
Washbuffer
至
1
×。
2
、
离心收集细胞，用
1
×
Washbuffer
清洗细胞
1
次，弃上清。
3
、
加入适量的
1
×
Washbuffer
重悬细胞，计数并调节细胞浓度至
10
6
/ml
。
4
、
取适量细胞悬液至新的
EP
管中，分别加入
MDCStain
和
EB
染色液，轻轻混匀。
5
、
滴加于在玻片上，室温避光染色，加盖玻片。
编号
名称
DA0041
Storage
试剂
(A):MDCStain
1ml
-20
℃
避光
试剂
(B):10
×
Washbuffer
20ml
4
℃
试剂
(C):Collectionbuffer
10ml
4
℃
使用说明书
1
份
北京雷根生物是一家集研发与生产的高新技术企业，公司自主研发染色液、生化检测试剂盒以及蛋白类、核酸类、细胞类、免疫类等生命科学类试剂。
