价格闯关物价上升?叶檀的中金博客
集中于T细胞的许多基础和临床免疫研究包括增殖测定,都是为了确定T细胞是否能够在不同的体外或体内条件下增殖。流式细胞仪术是测量T细胞增殖的理想方法,现在有一套染色产品,可以在现有的流式细胞仪染色板中加入增殖染料。与所有流式细胞术染色步骤一样,一定要做一个预实验确定染色试剂的用量和确定采集的细胞数,在下一个T细胞实验确定使用其中的一个染色方案来检测细胞的增殖。
胞内荧光染色:
羧基荧光素二乙酸酯琥珀酰亚胺酯(CFSE)或类似的荧光染料是可以进入活细胞内的。在增殖期间,随着细胞分裂荧光染料的浓度也随之稀释,并且可以在流式细胞检测分析时作为离散峰测量多次细胞分裂。当您在预实验中检测这些染料时,需确保这些增殖染料不影响细胞活性或形态。
以上T细胞增殖方法的可能有一种更适合您正在进行的实验,或者可用于您的流式细胞仪。每种方法都相对容易应用到您的下一个实验,并可以根据该检测更好地了解细胞功能。
胞内荧光染色:
羧基荧光素二乙酸酯琥珀酰亚胺酯(CFSE)或类似的荧光染料是可以进入活细胞内的。在增殖期间,随着细胞分裂荧光染料的浓度也随之稀释,并且可以在流式细胞检测分析时作为离散峰测量多次细胞分裂。当您在预实验中检测这些染料时,需确保这些增殖染料不影响细胞活性或形态。
DNA合成:
细胞增殖还可以通过胸苷合成类似物5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)检测细胞周期S期的DNA合成量来测定。通常在细胞培养中添加BrdU以确定体外增殖,并且使用抗BrdU的二抗与细胞内因子结合来测量BrdU掺入。
细胞增殖还可以通过胸苷合成类似物5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)检测细胞周期S期的DNA合成量来测定。通常在细胞培养中添加BrdU以确定体外增殖,并且使用抗BrdU的二抗与细胞内因子结合来测量BrdU掺入。
以上T细胞增殖方法的可能有一种更适合您正在进行的实验,或者可用于您的流式细胞仪。每种方法都相对容易应用到您的下一个实验,并可以根据该检测更好地了解细胞功能。
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发布于 : 2018-12-16
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