请教：细胞凋亡和细胞增殖目前用的最多的方法是什么啊？
2021-08-04
问题描述：
刚入实验坑的新人一枚，有关凋亡和增殖的检测方法看来看去有好多啊，我想问下大神们目前用的最多的有关细胞凋亡和增殖的检测方法分别是什么？哪些相对更加精确一些，而哪些只是粗略的看一下啊？？
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ma1991zx
用户
求大神指点啊！！！
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东月来星
用户这个看看文献吧。像凋亡用的试剂盒比较多。AnnexinV-FITC/PI通过流式检测的细胞的凋亡。能看到早期的跟晚期的是吧。也有tunel染色的方法，不过注意假阳性吧。当然也有看到是通过WB检测凋亡的蛋白吧。对于细胞增殖的话，也有试剂盒吧。普遍的用的有MTT和CCK8法测细胞增殖。这两个原理都差不多，不过现在多用CCK8了。毒性低，精确度高，重复性好。就是贵。也有用Brdu或者EDU法测细胞增殖的。利用外来的Brdu或者EDU处理细胞进而在细胞复制过程中充当T碱基进行DNA的复制。可以通过荧光或者流式检测细胞的增殖。也有一些公司的其他的试剂盒。对于细胞增殖来说的话，CCK8可以结合一个BRDU或者EDU的说服力更好的。荧光染色的同样注意下非特异性这个是最近做的BRDU染色测细胞增殖的。绿色FITC的测的是BRDU，蓝色的是DAPI染的细胞核。这个是文献上用流式的方法检测BRDU的。就是BRDU的抗体染色，跟PI双染。图中紫色的就是增殖的S期的细胞。
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woaigrace1204
用户ma1991zx刚入实验坑的新人一枚，有关凋亡和增殖的检测方法看来看去有好多啊，我想问下大神们目前用的最多的有关细胞凋亡和增殖的检测方法分别是什么？哪些相对更加精确一些，而哪些只是粗略的看一下啊？？最初一般用流式
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fxiao
用户展开引用东月来星这个看看文献吧。像凋亡用的试剂盒比较多。AnnexinV-FITC/PI通过流式检测的细胞的凋亡。能看到早期的跟晚期的是吧。也有tunel染色的方法，不过注意假阳性吧。当然也有看到是通过WB检测凋亡的蛋白吧。对于细胞增殖的话，也有试剂盒吧。普遍的用的有MTT和CCK8法测细胞增殖。这两个原理都差不多，不过现在多用CCK8了。毒性低，精确度高，重复性好。就是贵。也有用Brdu或者EDU法测细胞增殖的。利用外来的Brdu或者EDU处理细胞进而在细胞复制过程中充当T碱基进行DNA的复制。可以通过荧光或者流式检测细胞的增殖。也有一些公司的其他的试剂盒。对于细胞增殖来说的话，CCK8可以结合一个BRDU或者EDU的说服力更好的。荧光染色的同样注意下非特异性这个是最近做的BRDU染色测细胞增殖的。绿色FITC的测的是BRDU，蓝色的是DAPI染的细胞核。这个是文献上用流式的方法检测BRDU的。就是BRDU的抗体染色，跟PI双染。图中紫色的就是增殖的S期的细胞。......你好，这个具体的步骤可以透露一下吗？还有这篇文献的原文可以共享一下吗？最近在做这个
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东月来星
用户展开引用fxiao东月来星这个看看文献吧。像凋亡用的试剂盒比较多。AnnexinV-FITC/PI通过流式检测的细胞的凋亡。能看到早期的跟晚期的是吧。也有tunel染色的方法，不过注意假阳性吧。当然也有看到是通过WB检测凋亡的蛋白吧。对于细胞增殖的话，也有试剂盒吧。普遍的用的有MTT和CCK8法测细胞增殖。这两个原理都差不多，不过现在多用CCK8了。毒性低，精确度高，重复性好。就是贵。也有用Brdu或者EDU法测细胞增殖的。利用外来的Brdu或者EDU处理细胞进而在细胞复制过程中充当T碱基进行DNA的复制。可以通过荧光或者流式检测细胞的增殖。也有一些公司的其他的试剂盒。对于细胞增殖来说的话，CCK8可以结合一个BRDU或者EDU的说服力更好的。荧光染色的同样注意下非特异性这个是最近做的BRDU染色测细胞增殖的。绿色FITC的测的是BRDU，蓝色的是DAPI染的细胞核。这个是文献上用流式的方法检测BRDU的。就是BRDU的抗体染色，跟PI双染。图中紫色的就是增殖的S期的细胞。你好，这个具体的步骤可以透露一下吗？还有这篇文献的原文可以共享一下吗？最近在做这个......EthanolinducescytostasisofcorticalbasalProgenitors12929_2016_Article_225.pdf(1557.98k)
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火一样
用户细胞凋亡实验做了三种方法：DNAladder，hoechst33258染色和流式检测都没有好结果，共勉多做做。
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dxy_qv31iwk2
用户凋亡是细胞死亡的一种基本形式，在胚胎发育，组织分化和一些疾病发生过程中起着重要的调控作用。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）位于细胞膜内侧，一旦发生细胞凋亡，可以从细胞膜的内侧迅速翻转到细胞膜外侧，使得PS暴露在细胞膜表面。在体外可以用PS与抗凝血剂AnnexinV的相互作用检测外翻的PS。在Ca2+存在的情况下，AnnexinV与PS有很高的亲和力，可以与之迅速结合。PS外翻发生在细胞核破裂、DNA片段化以及凋亡相关蛋白出现之前，这使得AnnexinV与PS的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。细胞凋亡检测推荐汉恒高效AnnexinV/PI凋亡检测试剂盒哦，灵敏度高，操作方便http://www.hanbio.net/cn/products/item/417
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