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【求助】活细胞标记的方法?
2021-08-09
问题描述:

请问各位老师,有没有简单的办法(转染技术除外),可以使一种活细胞带上荧光?请赐教啊!

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lits
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直接使用DAPI或Hochest染胞核也可以,至于采用那种方法最好,要看你的实验设计了。两者的主要原理是细胞DNA结合,发出蓝色荧光。参考图片:http://images.google.cn/imgres?imgurl=http://bio.fsu.edu/~maroun/images2/PIC00004.JPG&imgrefurl=http://bio.fsu.edu/~maroun/images2/DAPI.html&h=1024&w=1280&sz=276&hl=zh-CN&start=5&um=1&tbnid=4vSBNeYoS5XNfM:&tbnh=120&tbnw=150&prev=/images%3Fq%3DDAPI%26svnum%3D10%26um%3D1%26complete%3D1%26hl%3Dzh-CN%26newwindow%3D1
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烟波浩荡
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谢谢!请问使用DAPI后细胞可以活多长时间?我想在细胞悬液的时候,加DAPI,然后接种在玻片上养两天,不知可行性如何?有没有这种做法?
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lits
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你这种做法应该是可行的。我们这里有人用DAPI标记细胞,然后植入动物体内一个月后,在紫外激发下,仍可以见到蓝色的胞核。
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kirkwood
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如果想标记胞浆,也可以用DiI,效果也不错
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烟波浩荡
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非常感谢!
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水水草
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请问标记后的细胞会不会随着细胞增殖而逐渐减弱,以至于时间长后观察不到荧光标记?标记后的细胞植入动物体内,大概能活多长时间?一般的标记对细胞的生活力有多大影响? 谢谢!
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seanyx
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你可以用frar-2或是fluo-3,目的不同,观察方式不同,采用的标记物是可以选择的,我用过这两种,感觉过程简单、时间短,你可以查一查。
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lits
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seanyx 你可以用frar-2或是fluo-3,目的不同,观察方式不同,采用的标记物是可以选择的,我用过这两种,感觉过程简单、时间短,你可以查一查。能给出相关的参考文献吗?谢谢!!
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mohanmud
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kirkwood 如果想标记胞浆,也可以用DiI,效果也不错DiI是标记胞膜的
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seanyx
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我说的fura-2适合做膜片钳同步测钙,而fluo-3则用于激光共聚焦测钙多一些。还有他是不染核的。你要查的话文献是很多的,研究方向不同,给你文献也没有用处,因为我不知道你想做什么,你的protocol应该简单的说一下,大家才能给你更多的帮助啊!
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