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怎么检测细胞通透性
2017-10-03
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一日不见兮01
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(1)死/活细胞染色法 : 使用选择性死/活细胞染色的特殊染料如不易穿透活细胞膜的台盼兰、苯胺黑及用于活细胞着色的中性红、健那绿、亚甲蓝、甲苯胺蓝等,通过染色区分死活细胞并计数来间接判断细胞膜通透性的改变情况。该方法简单,方便,价廉;但灵敏度和精确性差。(2)荧光标记法 : 使用二乙酸荧光素(FDP)、碘化丙啶(PI)或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育,用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是(1)法的“荧光”版,但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。(3)硝酸镧(La)示踪法: 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙,但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜),也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时, 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内, 并在电镜下显示, 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。(4)LDH释放法: 在正常情况下,细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的, 但在细胞膜受损伤而通透性增加时,可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
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