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EDC活化微球后超声,微球与缓冲液分成
2021-07-22
问题描述:

像图中所示,我1%的羧基微球用EDC活化,离心后用50Mm、PH7.2的PB缓冲液悬浮,用超声波超声5分钟,然后就分层了,上层是微球。

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诊断试剂小学生
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在线等,有同行交流一下不。
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lillian7040
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超声5分钟也太久了吧,微球都聚集了,还有用MES缓冲液比较好
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诊断试剂小学生
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加入抗体后,室温孵育3小时,离心后测上清液,抗体包被量能达到0.5mg/ml,可是测试校准品没反应。很是郁闷,快崩溃了。
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食安天下
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微球聚集后一般是浮在上面的,猜测可能是超声功率不够没超开的缘故
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wdgawyco
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超生有分散微球的功能,但是实验过程中不需要超声5min这么长时间会起到反作用的,一般超声十秒就能达到分散的作用了
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一盏离愁2190
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标记时候用的缓冲液有点问题吧,很多公司的微球不能有磷酸盐体系的,而且50mM的PBS离子浓度也太高了。这个肯定有聚集了还有EDC的量也是很容易导致聚集的
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13456ACDEF
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同意前面的说法,建议试一下一步法包被,EDC活化30分钟后直接加入抗体反应。偶联完成后再离心清洗。超声是需要对粒径检测的情况下适当进行,超到粒径均一即可。
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dxy_0akap4a2
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5分钟?是不是都要发热了啊,抗体都要失活了
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光年一夏
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我是1min超声分散的
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沪夜凛风
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应该不是超声问题,你换个缓冲液,比如用100MMMES,还有看看是不是EDC加多了
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dxy_0akap4a2
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展开引用一盏离愁2190标记时候用的缓冲液有点问题吧,很多公司的微球不能有磷酸盐体系的,而且50mM的PBS离子浓度也太高了。这个肯定有聚集了还有EDC的量也是很容易导致聚集的......能线下交流吗
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