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RayBiotech/Human NF-κB Pathway Phosphorylation Array C1/2 Sample Kit/AAH-NFKB-1-2
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RayBiotech/Human NF-κB Pathway Phosphorylation Array C1/2 Sample Kit/AAH-NFKB-1-2
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
AAH-NFKB-1-2
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4000-520-616

Antigen Information

Gene Symbols:
ATM | EIF2S1 | HDAC2 | HDAC4 | MAP3K7 | NFKBIA | RELA | RPS6KA5 | STAT1 | TBK1 View more Hide

Assay Format

Pathway:
  • MAPK Signaling
  • mTOR Signaling
  • NFkB Signaling
  • p53 Signaling
  • PKC Signaling
Number of Targets Detected:
11
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Culture Supernatants
  • Cell Lysates
  • Plasma
  • Serum
  • Tissue Lysates
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Chemiluminescence
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Semi-Quantitative
Solid Support:
Membrane

Product Specifications

Size:
2, 4, or 8 Sample Kit

Product Features

  • Easy to use
  • No specialized equipment needed
  • Compatible with nearly any liquid sample
  • Proven technology (many publications)
  • Highly sensitive (pg/ml)
  • Sandwich ELISA specificity
  • Higher density than ELISA, Western blot or bead-based multiplex

Target Names

Scroll over each target protein for more information
ATM (P-Ser1981)
  • Gene Symbol: ATM
  • Gene ID: 472;
  • Accession #: Q13315
  • ELISA Kit: RayBio Human Phospho-ATM (S1981) ELISA
eIF-2a (P-Ser52)
  • Gene Symbol: EIF2S1 EIF2A
  • Gene ID: 1965;
  • Accession #: P05198
  • ELISA Kit: RayBio Human Phospho-eIF-2A (S52) ELISA
HDAC2 (P-Ser394)
  • Gene Symbol: HDAC2
  • Gene ID: 3066
  • Accession #: Q92769
  • ELISA Kit: RayBio Human, Mouse and Rat Phospho-HDAC2 (S394) ELISA
HDAC4 (P-Ser632)
  • Gene Symbol: HDAC4 KIAA0288
  • Gene ID: 9759;
  • Accession #: P56524
  • ELISA Kit: RayBio Human/Mouse/Rat Phospho-HDAC4 (S632)
IKB-alpha (P-Ser32)
  • Gene Symbol: NFKBIA IKBA MAD3 NFKBI
  • Gene ID: 4792;
  • Accession #: P25963
  • ELISA Kit: RayBio Custom Human Phospho-IkB-alpha (Ser32) and Total IKB-alpha Cell-Based ELISA
MSK1 (P-Ser376)
  • Gene Symbol: RPS6KA5 MSK1
  • Gene ID: 9252;
  • Accession #: O75582
  • ELISA Kit: RayBio Human Phospho-MSK1 (S376) ELISA
NF-kB (P-Ser536)
  • Gene Symbol: RELA NFKB3
  • Gene ID: 5970;
  • Accession #: Q04206
  • ELISA Kit: RayBio Human/Mouse/Rat Phospho-NF-KB p65 (S536) ELISA
STAT1 (P-Ser727)
  • Gene Symbol: STAT1
  • Gene ID: 6772;
  • Accession #: P42224
  • ELISA Kit: RayBio Custom Human Phosphotyrosine STAT1 ELISA
TAK1 (P-Ser412)
  • Gene Symbol: MAP3K7 TAK1
  • Gene ID: 6885;
  • Accession #: O43318
  • ELISA Kit: RayBio Human Phospho-TAK1 (Ser412) ELISA
TBK1 (P-Ser172)
  • Gene Symbol: TBK1 NAK
  • Gene ID: 29110;
  • Accession #: Q9UHD2
  • ELISA Kit: RayBio Human, Mouse and Rat Phospho-TBK1 (S172) ELISA
ZAP70 (P-Tyr292)
  • Gene Symbol: ZAP70 SRK
  • Gene ID: 7535;
  • Accession #: P43403
  • ELISA Kit: RayBio Human Phospho-ZAP70 (Y493) ELISA

Application Notes

Suggested Application
Multiplexed Protein Detection; Detection of Relative Protein Expression; Detecting Patterns of Cytokine Expression; Biomarker/ Key Factor Screening; Identifying Key Factors; Confirming a Biological Process
Kit Components
  • Human NF-kB Pathway Phosphorylation Array C1 Membranes
  • Blocking Buffer
  • Detection Antibody Cocktail
  • 1,000X HRP-Anti-Rabbit-IgG Concentrate
  • 20X Wash Buffer I Concentrate
  • 20X Wash Buffer II Concentrate
  • 2X Cell Lysis Buffer Concentrate
  • Detection Buffer C
  • Detection Buffer D
  • 8-Well Incubation Tray w/ Lid
  • Protease Inhibitor Cocktail
  • 100x Phosphatase Inhibitor Cocktail I
  • Phosphatase Inhibitor Cocktail II
  • Plastic Sheets
  • Array Map Template
  • Manual
Other Materials Required
  • Pipettors, pipet tips and other common lab consumables
  • Orbital shaker or oscillating rocker
  • Tissue Paper, blotting paper or chromatography paper
  • Adhesive tape or plastic Wrap
  • Distilled or de-ionized water
  • A chemiluminescent blot documentation system: CCD camera, X-ray Film and a suitable film processor, gel documentation system, or another chemiluminescent detection system capable of imaging a western blot.
Protocol Outline
  1. Block membranes
  2. Incubate with Sample
  3. Incubate with Detection Antibody Cocktail
  4. Incubate with HRP-Conjugated anti-IgG
  5. Incubate with Detection Buffers
  6. Image with chemiluminescent imaging system
  7. Perform densitometry and analysis

Typical Data

Figure 1 - HeLa cells were grown to 80% confluency and then serum starved overnight. Cells were either untreated (bottom panel) or treated (top panel) with TNF alpha and Calyculin A. Data shown are from a 20 second exposure using a chemiluminescence imaging system.

Note the strong signals of the Positive Control spots in the upper left and lower right corners. (See below for further details on the control spots.)

The signal intensity for each antigen-specific antibody spot is proportional to the relative concentration of the antigen in that sample. Comparison of signal intensities for individual antigen-specific antibody spots between and among array images can be used to determine relative differences in expression levels of each analyte sample-to-sample or group-to-group.

Storage/Stability

For best results, store the entire kit frozen at -20°C upon arrival. Stored frozen, the kit will be stable for at least 6 months which is the duration of the product warranty period. Once thawed, store array membranes and 1X Blocking Buffer at -20°C and all other reagents undiluted at 4°C for no more than 3 months.
It worked well in our hands. It is a quick and easy way to assess several targets at same time. I recommend it.
University of Michigan
We used it to detect the NF-KB pathway phosphorylation, the background is acceptable, works fine.
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静电场的标势称为电势,或称为静电势。在电场中,某点电荷的电势能跟它所带的电荷量(与正负有关,计算时将电势能和电荷的正负都带入即可判断该点电势大小及正负)之比,叫做这点的电势(也可称电位),通常用φ来表示。电势是从能量角度上描述电场的物理量。(电场强度则是从力的角度描... 查看更多>
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【文题】InhibitionofCa2+-activatedandvoltage-dependentK+currentsby2-mercaptophenyl-1,4-naphthoquinoneinpituitaryGH3cellsContributiontoitsantiproliferativeeffect
【杂志】lifescience7020021185-1203
【作者】Mei-HanHuang,Sheng-NanWu,Chi-PienChen,Ai-YuShen
【单位】DepartmentofPharmaceuticalScience,FooYinInstituteofTechnology,Ta-Liao,KaohsiungCounty,Taiwan,R.O.C.DepartmentofMedicalEducationandResearch,KaohsiungVeteransGeneralHospital,KaohsiungCity,TaiwanDepartmentofPharmacy,TajenInstituteofTechnology,Pingtung,Taiwan,R.O.C.
【文摘】Quinoneshavebeenshowntopossessantineoplasticactivity;however,theireffectsonioniccurrentsremainunclear.Theeffectsof2-mercaptophenyl-1,4-naphthoquinone(2-MPNQ),menADIone(MD)and1,4-naphthoquinone(1,4NQ)oncellproliferationandioniccurrentsinpituitaryGH3lactotrophswereinvestigatedinthisstudy.2-MPNQwasmorepotentthanmenadioneor1,4-naphthoquinoneininhibitingthegrowthofGH3cells.2-MPNQdecreasedcellproliferationinaconcentration-dependentmannerwithanIC50valueof3mM.Inwhole-cellrecordingexperiments,2-MPNQreversIBLycausedaninhibitionofCa21-activatedK+current(IK(Ca))inaconcentrationdependentmanner.TheIC50valuefor2-MPNQ-inducedinhibitionofIK(Ca)was7mM.Intheinsideoutconfigurationofsinglechannelrecording,2-MPNQ(30mM)appliedintracellularlysuppressedtheactivityoflarge-conductanceCa21-activatedK+(BKCa)channelsbutdidnotmodifysinglechannelconductance.Menadione(30mM)hadnoeffectonthechannelactivity,whereas1,4-naphthoquinone(30mM)suppresseditbyabout26%.Both2-MPNQandthimerosalsuppressedthedithiothreitol-stimulatedchannelactivity.2-MPNQalsoblockedvoltage-dependentK+currents,butitproducedaslightreductionofL-typeCa21inwardcurrent.However,unlikeE-4031,2-MPNQ(30mM)didnotsuppressinwardlyrectifyingK+currentpresentinGH3cells.Underthecurrentclampconfiguration,thepresenceof2-MPNQ(30mM)depolarizedthecells,andincreasedthefrequencyanddurationofspontaneousactionpotentials.The2-MPNQ-mediatedinhibitionofK+currentswouldaffecthormonesecretionandcellexcitABIlity.Theblockadeoftheseionicchannelsby2-MPNQmaypartlyexplainitsinhibitoryeffectontheproliferationofGH3cells.

【翻译】醌类化合物已经发现具有抗肿瘤的作用,然而它对于离子通道的影响还不是很清楚。此研究的内容是MPNQ和1,4NO的对于垂体瘤GH3细胞的增殖和离子通道方面的影响。2-MPNQ对于GH3细胞的生长抑制作用较甲萘醌和1,4NO更强。2-MPNQ以3uM的浓度能降低细胞增殖的浓度依赖IC50.在全细胞记录的实验中,MPNQ可逆性的引起I(Kca)浓度依赖的抑制。IC50的MPNQ抑制I(Kca)的浓度是7uM。在单一通道的记录中,2-MPNQ(30mM)可以抑制细胞内BKCa的传导,但并不影响单通道的传导。甲萘醌(30mM)对于此通道没有影响,1,4NO在此浓度下的抑制率大约为26%。2-MPNQ和硫柳汞可以抑制二硫苏糖醇刺激性通道的活动。2-MPNQ也可以阻滞电压依赖的钾通道,但对于L型钙通道的内流有轻微的抑制作用。2-MPNQ与E4031不同的是它并不抑制GH3细胞的内流的钾电流。在当前的研究下表明,2-MPNQ可以使GH3细胞增殖,并且能够增加自发动作电位的频率和持续时间。2-MPNQ介导的钾电流的抑制可能会影响到激素的分泌和细胞兴奋性。2-MPNQ对于这些离子通道的阻滞作用可以部分解释它是如何对GH3细胞增殖的抑制作用。

【点评】比较标准的电生理的SCI文章
我用MultiClamp700A和Clampex8.2做全细胞电压钳记录。由于电极内液的成分有所改动,使得电极没入液面后,用Pipetteoffset的电压达到近40mV.实验时,给予Holding-70mV,在RawOutput(MembraneplusOffsetPotential)通道记录到的电压是-30mV,而不是钳定的-70mV。请问一下,这时候细胞膜上真实的钳制电压是-70mV还是-30mV啊?如果是-30mV,那么下次我要钳制到-70mV,是不是我要将钳制电压设到-110mV啊!
电位与电压的单位都是V,看似一样,但电位需要有一个参考点,某点相对参考点的电压称作该点的电位;而电压指电位差,任意两点间的电位差就是这两点间的电压。
例如,我们认为大地的电位为0,这就是参考点,现在有A、B两点,A点对地的电位是+5V,B点对地的电位是-3V。我们可以说,A与地之间的电压是5V,B与地之间的电压是3V,但A与B之间的“电位差”是8V,因此AB两点之间的电压是8V。
电压的方向是由高电位指向低电位,是电位升高的方向
生理书P36说,终板膜上无电压门控钠通道,故无法产生动作电位,那突触后膜上有没有呢?


我是苏州大学心血管内科研究生,我们打算使用电压敏感染料膜电位光学标测技术做体外心肌细胞的实验。但是目前实验室没人做过,想上门拜师学习!谢谢!~~~
我的联系方式:15962175904姓名:林欢单位:苏州大学医学院

电压和电位可以不一样,选择不同的参考电位点,电路中各点的电位值可以不一样,但无论选哪点做参考电位,电路中任意两点的电位差保持不变,也就是说各点电位值可变,任意两点间电压不变。
8版生理第33页钠钾通道都有时间依赖性和电压依赖性,以钠通道为例
问题1,钠通道的大量激活,是只有在达到阈刺激时才能大量激活还是达到一个特定电位(不管骨骼肌还是心肌这个特定电位不变)才能激活?
问题2,激活是一个瞬态,瞬间大量激活,瞬间大量失活,那这个动作电位上升支持续的时间怎么解释?
问题3,钠通道的失活应该也是电压依赖性的,导致失活电压是特定的么?在骨骼肌和心肌一样么?
问题4,在从静息电位到阈电位这一段时间,第106页心肌的图和第39页骨骼肌的图一个兴奋性一个不变一个兴奋性增大怎么解释?
问题5,在第106页的第2个图上在RRP和SNP时期引出动作电位,动作电位的上升支不是应该接近钠离子的平衡电位才终止么,而这个平衡电位应该只跟细胞内外钠离子的浓度变化有关,但动作电位导致的细胞内外钠离子的浓度变化应该不大,怎么会使出现几个动作电位的上升的最高点是不一样的呢?
问题6,怎么理解钠离子通道的时间依赖性?33页的图怎么看?为什么随着电压增大,钠电导增大呢?不是只有在阈刺激时钠通道才大量开放,这个时候才应该钠电导最大么?
刺激为什么会使细胞膜电位去极化,钠内流不是产生去极化吗,但钠通道是电压门控通道,刺激怎么使膜电位改变,还是说刺激使电刺激?
电位是单位正的试验电荷在电场中某点具有的电位能。电压是单位正的试验电荷在电场中某两点之间的电位差。
为什么在化学突触突触前膜的电压门控钙通道,动作电位时程和幅度越大,内流的钙离子越多?我已经陷入动作电位的“全或无”中,实在想不通,求解答~
电位指的是电势。静电场的标势称为电势,或称为静电势。在电场中,某点电荷的电势能跟它所带的电荷量(与正负有关,计算时将电势能和电荷的正负都带入即可判断该点电势大小及正负)之比,叫做这点的电势(也可称电位),通常用φ来表示。电势是从能量角度上描述电场的物理量。(电场强度则是从力的角度描述电场)。电势差能在闭合电路中产生电流(当电势差相当大时,空气等绝缘体也会变为导体)。电势也被称为电位。

参考资料:http://baike.baidu.com/search/word?word=%E7%94%B5%E4%BD%8D

电压(voltage),也称作电势差或电位差,是衡量单位电荷在静电场中由于电势不同所产生的能量差的物理量。其大小等于单位正电荷因受电场力作用从A点移动到B点所做的功,电压的方向规定为从高电位指向低电位的方向。电压的国际单位制为伏特(V,简称伏),常用的单位还有毫伏(mV)、微伏(μV)、千伏(kV)等。此概念与水位高低所造成的“水压”相似。需要指出的是,“电压”一词一般只用于电路当中,“电势差”和“电位差”则普遍应用于一切电现象当中。

参考资料:http://baike.baidu.com/view/10954.htm

希望我的回答能够帮助到你,望采纳,谢谢。
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