
Three antipeptide antibodies were generated in chickens against sequences shared between the mouse (P08551) and human (P07196) gene products. Antibodies were affinity-purified and mixed in equal concentrations. These antibodies have been validated with human, mouse and rat tissues.
Volume: 1000 µL
Concentration: 300 µg/mL
Clonality: Polyclonal
Host Species: Chicken
Species Reactivity:Human, Mouse, Rat
Applications: ICC, IHC, WB
Protein Name / Synonyms: Neurofilament light polypeptide (NF-L) (68 kDa neurofilament protein) (Neurofilament triplet L protein)
Target Description: Human Neurofilament Light Chain (NFL) is a 61,516 dalton protein (543 amino acids) expressed in the axons of CNS and PNS neurons, where it plays a role in maintaining the structural integrity of the axon. Mutations of the NFL gene product are responsible for some forms of autosomal dominant Charcot-Marie-Tooth neuropathies in humans (i.e., CMT type 1F).
Gene ID: NEFL NF68 NFL
Antibody Registry ID (RRID): AB_2313553
Physical State: Liquid
Production Notes: Chickens were immunized with three synthetic peptide / keyhole limpet hemocyanin (KLH) conjugates. These synthetic peptides corresponded to different regions of the NF-L gene product, but are shared between the human (P07196, NCBI) and mouse (P08551, NCBI) protein sequences. After repeated injections, immune eggs were collected, and the IgY fractions were purified from the yolks. These IgY fractions were then affinity-purified using a peptide column, and the concentrations of the eluates adjusted to 300 µg/mL. Finally, equal volumes of each of the three affinitypurified anti-peptide antibodies were mixed, and the preparation was filter-sterilized.
Validation and Application Notes
Molecular Weight: 70 kDa
Western Blot Dilution Range: 1:1000-1:2000
IHC Dilution Range: 1:1000-1:2000
Quality Control
Quality assurance analysis was performed using immunohistochemistry (at a dilution of 1:2000) using fluorescein-labeled goat anti-chicken IgY (1:500 dilution, Aves Labs Cat.# F-1005) as the secondary reagent.
Storage
Store at 4°C in the dark. Under these conditions, the antibodies should have a shelf life of at least 12 months (provided they remain sterile). Do not freeze these antibodies unless you want to store them for longer periods of time. Note, however, that each time an antibody preparation is frozen, about half of its binding activity is lost.
NOTE
Aves Labs products are intended for use as research laboratory reagents. They are not intended for use as diagnostic or therapeutic reagents in humans.
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AvesLabs是一家成立于上世纪九十年代,专注于高亲和性鸡源抗体的研发和准备,生物医药和生命科学行业全球*的鸡多克隆抗体(IgY)及定制抗体/多肽/免疫试剂的专业公司。AvesLabs在鸡源神经系统标志蛋白/抗体研究领域拥有独特优势,不仅品种多样,质量优良,而且适用于人/大小鼠等多个物种的神经系统研究,包括神经元/胶质细胞/雪旺细胞的各亚细胞结构免疫双标/免疫共沉淀研究。公司独有的技术及优质抗体产品有助于全球科研人员更为便捷的解决学术研究及应用研发课题。除了丰富的产品线外,AvesLabs还为客户提供优质的抗体定制服务,您只需要提供需要研究的重组蛋白或合成多肽,我们即可为您生产优质的鸡源多克隆抗体。
神经元标志蛋白抗体该系列产品主要用于神经元细胞的各亚细胞结构研究,可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、小鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗APP3/APP345/APP4/APP5/ABN/TUJ/CAT/DCX/ER1/ER2/ER3/ER5/GAD/GAP43/MAP/NET/NUN/NSE/NFH/NFL/NFM/PER/PRN/PAP/STG/TAU/TYH的抗体。除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
胶质细胞及雪旺细胞标志蛋白抗体该系列产品主要用于胶质细胞及雪旺细胞的各亚细胞结构的研究,可与可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、大鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗COR/GFAP/MAC/MBP/NES/PZO/PLP/VIM抗体。同样,除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
二抗该系列产品特点在于鸡IgY分子与哺乳动物IgG分子截然不同,因此由之制备的二抗不与来源于兔、小鼠或其他哺乳动物的一抗产生交叉反应,特别适用于组织学的免疫双标检测。该系列源于羊的二抗可交联荧光基团/HRP/生物素/琼脂糖,可广泛用于WB,免疫组化/免疫细胞化学及免疫共沉淀研究。
mmunoprecipitationReagents(IP)该系列产品中 HA-PrecipHen® 由鸡anti-HAepitopetag抗体共价结合到琼脂糖粒而成,适用于利用HAepitope-tagged蛋白的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。而IgY-PrecipHen®由羊抗鸡的IgY抗体共价结合到琼脂糖粒上而成,适用于鸡源抗体与目标蛋白之间的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。
对高度保守的哺乳动物基因产物有更高的描述由于鸡与哺乳动物的距离至少有1亿年之久,它们倾向于将哺乳动物的任何基因产物视为外来物,并产生强烈的免疫反应。简单双疣状鸡IgYs可以与小鼠和兔抗体一起使用,没有交叉反应的危险。针对鸡igy的二级抗体不会与哺乳动物igg发生交叉反应。友好型我们从鸡蛋中纯化抗体,而不是血清。与此相反,在兔实验中,通过抑制动物,进行耳出血或心脏穿刺来获得血清。这只是一种更人道的产生抗体的方法。成本效益和更持久的我们的鸡用抗体是>90%IgY,在4度完美呈现5年以上保质期。相比之下,多数公司提供的rabbitserum(兔乳)在4˚C (完美呈现)(以周至月为单位)的货架期非常有限,而且一旦冷冻,一些生物活性会丧失。将兔抗体纯化至相应纯度的成本。蛋白质a纯化)是非常昂贵的。几乎无限量我们从每只母鸡那里收集了大约18个“免疫鸡蛋”,但是只使用了6个“免疫鸡蛋”来准备你的IgY准备。然后我们把剩下的12个“免疫鸡蛋”储存在冰箱里,以备将来你需要更多的抗体。此外,我们可以继续为母鸡提供住宿(另收费),以备您需要我们进行额外的注射。鸡IgY的茎部没有“Fc结构域”这提供了几个优势比兔igg:它减少了在诊断应用中出现假阳性的可能性,因为是哺乳动物的Fc域结合“类风湿因子”或其他自然产生的抗Fc抗体。不激活哺乳动物补体系统,允许鸡IgYs在体内应用。不与哺乳动物Fc受体结合,避免与表达此类受体的细胞(如巨噬细胞和树突状细胞)发生非特异性结合。
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所谓细胞因子是指由免疫细胞(单核细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等)和某些非免疫细胞(如血管内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞)等经刺激而合成、分泌的一类具有多种生物学活性多肽或蛋白质。这些细胞因子分为几个大的家族,临床上常用的可以用于肿瘤治疗领域的有白细胞介素类(IL)、干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子(TNF)、造血因子和各种细胞生长因子等。从治疗目的讲,这些细胞因子可以用于血液肿瘤如白血病、淋巴瘤的治疗以及一些实体肿瘤的治疗,如恶性黑色素瘤、肾癌等。从辅助治疗角度来讲,这些细胞因子可以用于治疗由于化疗、放疗而造成的一些不良反应、并发症的治疗。例如,患者在接受化疗时往往会造成造血抑制,通过应用一些造血刺激因子可以加速患者的造血功能恢复,尽快脱离危险并进入下一周期的治疗
1.淋巴因子(lymphokine) 于命名,主要由淋巴细胞产生,包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等。重要的淋巴因子有IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IFN-γ、TNF-β、GM-CSF和神经白细胞素等。 2.单核因子(monokine) 主要由单核细胞或巨噬细胞产生,如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、G-CSF和M-CSF等。 3.非淋巴细胞、非单核-巨噬细胞产生的细胞因子 主要由骨髓和胸腺中的基质细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等细胞产生,如EPO、IL-7、IL-11、SCF、内皮细胞源性IL-8和IFN-β等。 (二)根据细胞因子主要的功能不同分类 1.白细胞介素(interleukin, IL) 1979年开始命名。由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用,凡命名的白细胞介素的cDNA基因克隆和表达均已成功,目前已报道有三十余种(IL-1-IL-35)。 2.集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF) 根据不同细胞因子刺激造血干细胞或分化不同阶段的造血细胞在半固体培养基中形成不同的细胞集落,分别命名为G(粒细胞)-CSF、M(巨噬细胞)-CSF、GM(粒细胞、巨噬细胞)-CSF、Multi(多重)-CSF(IL-3)、SCF、EPO等。不同CSF不仅可刺激不同发育阶段的造血干细胞和祖细胞增殖的分化,还可促进成熟细胞的功能。 3.干扰素(interferon, IFN) 1957年发现的细胞因子,最初发现某一种病毒感染的细胞能产生一种物质可干扰另一种病毒的感染和复制,因此而得名。根据干扰素产生的来源和结构不同,可分为IFN-α、IFN-β和IFN-γ,他们分别由白细胞、成纤维细胞和活化T细胞所产生。各种不同的IFN生物学活性基本相同,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。 细胞因子
4.肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF) 最初发现这种物质能造成肿瘤组织坏死而得名。根据其产生来源和结构不同,可分为TNF-α和TNF-β两类,前者由单核-巨噬细胞产生,后者由活化T细胞产生,又名淋巴毒素(lymphotoxin, LT)。两类TNF基本的生物学活性相似,除具有杀伤肿瘤细胞外,还有免疫调节、参与发热和炎症的发生。大剂量TNF-α可引起恶液质,因而TNF-α又称恶液质素(cachectin)。 5.转化生长因子-β家族(transforming growth factor-β family, TGF-β family) 由多种细胞产生,主要包括TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGFβ1β2以及骨形成蛋白(BMP)等。 6.生长因子(growth factor,GF)如表皮生长因子(EGF)、血小板衍生的生长因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子-I(IGF-1)、IGF-Ⅱ、白血病抑制因子(LIF)、神经生长因子(NGF)、抑瘤素M(OSM)、血小板衍生的内皮细胞生长因子(PDECGF)、转化生长因子-α(TGF-α)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)等。 7.趋化因子家族(chemokinefamily) 包括两个亚族:(1)C-X-C/α亚族,主要趋化中性粒细胞,主要的成员有IL-8、黑素瘤细胞生长刺激活性(GRO/MGSA)、血小板因子-4(PF-4)、血小板碱性蛋白、蛋白水解来源的产物CTAP-Ⅲ和β-thromboglobulin、炎症蛋白10(IP-10)、ENA-78;(2)C-C/β亚族,主要趋化单核细胞,这个亚族的成员包括巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)、MIP-1β、RANTES、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/MCAF)、MCP-2、MCP-3和I-309。展开
(1)绝大多数细胞因子为分子量小于25kDa的糖蛋白,分子量低者如IL-8仅8kDa。多数细胞因子以单体形式存在,少数细胞因子如IL-5、IL-12、M-CSF和TGF-β等以双体形式发挥生物学作用。大多数编码细胞因子的基因为单拷贝基因(IFN-α除外),并由4-5个外显子和3-4个内含子组成。
(2)主要与调节机体的免疫应答、造血功能和炎症反应有关。
(3)通常以旁分泌(paracrine)或自分泌(autocrine)形式作用于附近细胞或细胞因子产生细胞本身。在生理状态下,绝大多数细胞因子只有产生的局部起作用。
(4)高效能作用,一般在pM(10-12M)水平即有明显的生物学作用。
(5)存在于细胞表面的相应高亲和性受体数量不多,在10-10000/每个细胞。细胞因子受体的研究进展相当迅速,根据细胞因子受体基因DNA序列以及受体胞膜外区氨基酸序列、同源性和结构,可分为四个类型:免疫球蛋白超家族、造血因子受体超家族、神经生长因子受体超家族和趋化因子受体。
(6)多种细胞产生,一种IL可由许多种不同的细胞在不同条件下产生,如IL-1除单核细胞、巨噬细胞或巨噬细胞系产生外,B细胞、NK细胞、成纤维细胞、内皮细胞、表皮细胞等在某些条件下均可合成和分泌IL-1。
(7)多重的调节作用(multipleregulatoryaction),细胞因子不同的调节作用与其本身浓度、作用靶细胞的类型以及同时存在的其它细胞因子种类有关。有时动物种属不一,相同的细胞因子的生物学作用可有较大的差异,如人IL-5主要作用于嗜酸性粒细胞,而鼠IL-5还可作用于B细胞。
(8)重叠的免疫调节作用(overlappingregulatoryaction),如IL-2、IL-4、IL-9和IL-12都能维持和促进T淋巴细胞的增殖。
(9)以网络形式发挥作用,细胞因子的网络作用主要是通过以下三种方式:(1)一种细胞因子诱导或抑制另一种细胞因子的产生,如IL-1和TGF-β分别促进或抑制T细胞IL-2的产生;(2)调节同一种细胞因子受体的表达,如高剂量IL-2可诱导NK细胞表达高亲和力IL-2受体;(3)诱导或抑制其它细胞因子受体的表达,如TGF-β可降低T细胞IL-2受体的数量,而IL-6和IFN-γ可促进T细胞IL-2受体的表达。
(10)与激素、神经肽、神经递质共同组成了细胞间信号分子系统。
(11)自限性分泌。向左转|向右转
我的细胞复苏的时候染菌了,还能不能用来测胞内细胞因子IFN-γ,谢谢大家,帮帮忙。
研究人员将多效生长因子注入骨髓生长因受到辐射而被抑制的实验鼠体内,后者的骨髓干细胞生长速度与未注射多效生长因子的实验鼠相比提高了10倍。在实验室培养皿中,多效生长因子还被确认可促进人类脐带血干细胞的生长。研究人员还证实,多效生长因子不会导致实验鼠出现癌变。
研究人员说,这项成果将来有望使更广泛的人群受益于脐带血移植,更重要的是,对正在接受化疗或放疗的患者而言,利用多效生长因子进行的治疗或许具有加速患者血液和免疫系统恢复的潜力。
【原文见附件】
ellsNatureMedicineNaturePublishingGroup.pdf(1020.57k)
② 干扰素(interferon,IFN)——是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力;
③ 肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)——杀伤或抑制肿瘤细胞(直接杀伤或抑制作用、通过TNF对机体免疫功能的调节作用,促进T细胞及其它杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤、TNF作用于血管内皮细胞,损伤内皮细胞或导致血管功能紊乱,使血管损伤和血栓形成,造成肿瘤组织的局部血流阻断而发生出血、缺氧坏死);提高中性粒细胞的吞噬能力,增加过氧化物阴离子产生,增强ADCC功能,刺激细胞脱颗粒和分泌髓过氧化物酶;抗感染;TNF是一种内源性热原质,引起发热,并诱导肝细胞急性期蛋白的合成;促进髓样白血病细胞向巨噬细胞分化,如促进髓样白血病细胞ML-1、单核细胞白血病细胞U937、早幼粒白血病细胞HL60的分化,机理不清楚;促进细胞增殖和分化;
④ 集落刺激因子(colonystimulating factor,CSF)——集落刺激因子是指能够刺激多能造血干细胞和不同发育分化,阶段造血干细胞增殖分化在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。主要包括:干细胞生成因子(SCF)多能集落刺激因子(IL-3)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和促红细胞生成素(EPO)。上述集落刺激因子除具有刺激不同发育分化阶段造血干细胞增生分化的功能外,其中有些还能促进或增强巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬杀伤功能;

