Reducing SDS-PAGE gel showing purified Norovirus VLPs, showing protein migrating as a band of approximately 60kDa.

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NOROVIRUS GII.4 VP1 VIRUS-LIKE PARTICLES
Norovirus VP1 protein is the capsid protein of Norovirus. It is a 59kD glycoprotein with three key domains. The shell domain (S domain) contains elements essential for the formation of the icosahedron. The Protruding domain (P domain) is divided into sub-domains P1 and P2. P domain interacts in dimeric contacts that increase the stability of the capsid and form the protrusions on the virion. An hypervariable region in P2 is thought to play an important role in receptor binding and immune reactivity.
The Norovirus VP1 protein self-assembles to form the Norovirus virion, containing 180 copies of the protein. The Native Antigen Company produce VP1 protein in a mammalian cell expression system, which produces intact virus-like particles (VLPs) of very high purity. These VLPs are suitable for studies of VP1 structure, and also as potential targets for serological assays.
PRODUCT DETAILS – NOROVIRUS GII.4 VP1 VIRUS-LIKE PARTICLES
- Recombinant Norovirus GII.4 virus-like particles comprising VP1 protein expressed from HEK293 cells (NCBI Accession Code: ACT76142.1).
- Includes amino acids 1-539 and is buffered in 20mM Tris-HCl, 10mM NaCl, pH7.8.
- Greater than 95% purity by SDS-PAGE.
BACKGROUND
Norovirus (NoV) is a small non-enveloped, positive-sense RNA virus belonging to the Caliciviridae family of viruses. Six norovirus genogroups have been identified to date, which are further subdivided into genotypes. NoVs have a high mutation rate and numerous genotypes have been identified. NoVs responsible for human disease are found within genogroups GII, GI and GIV. The variant GII.4 has been identified as the most common cause of Norovirus outbreaks since 2002. (Karst, S.M.).
Previously known as Norwalk virus, NoV is a major cause of non-bacterial outbreaks of acute gastroenteritis worldwide. Norovirus can infect individuals of all ages and can be a major cause of gastroenteritis in schools, care-homes, hospitals and cruise ships. Symptoms of NoV infection develop rapidly and include vomiting, nausea, abdominal cramps and diarrhoea (Robilotti, E. et al). In most cases, Nov infection is a self-limiting disease that may last 1- 3 days but can cause complications in very young, elderly and immunocompromised individuals. In some severe cases, NoV infection can result in dehydration, hospitalisation and death. (CDC).
NoV is highly contagious. It can persistent in the environment and is resistant to most household disinfectants. Transmission of NoV primarily occurs through the faecal oral route and through contact with infected individuals, contaminated clothing, surfaces, food and water. In the USA, NoV is the major cause of food related illness. (CDC).
REFERENCES
- Karst SM. (2010). Pathogenesis of noroviruses, emerging RNA viruses. Viruses.Mar;2(3):748-81. PMID: 21994656
- Robilotti E, Deresinski S, Pinsky BA. (2015). Norovirus. Clin Microbiol Rev.Jan;28(1):134-64. PMID: 25567225
- Centers for disease control and prevention: Norovirus, Clinical overview
- Centers for disease control and prevention: Norovirus, Burden of norovirus illness and outbreaks
- Takeda press release: Takeda initiates world’s first norovirus vaccine field trial
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抗原是指一种能刺激人或动物机体产生抗体或致敏淋巴细胞,并能与这些产物在体内或体外发生特异性反应的物质。抗原的基本能力是免疫原性和反应原性。免疫原性又称为抗原性,是指能够刺激机体形成特异抗体或致敏淋巴细胞的能力。反应原性是指能与由它刺激所产生的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应。具备免疫原性和反应原性两种能力的物质称为完全抗原,如病原体、异种动物血清等。只具有反应原性而没有免疫原性的物质,称为半抗原,如青霉素、磺胺等。半抗原没有免疫原性,不会引起免疫反应。但在某些特殊情况下,如果半抗原和大分子蛋白质结合以后,就获得了免疫原性而变成完全抗原。
抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针对该抗原的必定是多克隆
由于动物个体差异的存在,同一抗原免疫同一种系不同个体的动物,产生的抗体的效价有很大的差异.与动物的年龄和营养状况密切相关.免疫用的动物最好选择适龄的健康雄性动物,雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则非常不合适,有时甚至不产生抗体.
先饲养观察7天其实就是等于隔离检疫,观察一下兔子的身体状况和是否带有其他传染病,淘汰体质多病的个体,防止在免疫过程中死亡或免疫应答不灵敏而不产生抗体.
看我的回答:
抗原(antigen, Ag)是一类能诱导免疫系统发生免疫应答,并能与免疫应答的产物(抗体或效应细胞)发生特异性结合的物质。抗原具有免疫原性和反应原性两种性质。
免疫原性是指抗原刺激机体后,机体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。
反应原性是指产生的抗体或致敏T淋巴细胞能与抗原进行特异性结合的免疫反应。
既具免疫原性又具反应原性的抗原称免疫原。某种物质之所以能成为一个良好的免疫原,是因为它有特异的化学结构,这就是抗原决定簇。抗原决定簇可以与相应的淋巴细胞表面的受体蛋白结合引起免疫应答。一个抗原决定簇只能激活一种淋巴细胞(对于B细胞)只刺激产生一种类型抗体。一个抗原可以有一个或多个抗原决定簇。抗原功能性决定簇的总数称抗原结合价。抗原决定簇少,抗体与抗原结合就少,往往就见不到反应。天然抗原或复杂的半抗原决定簇往往多达几十个,因此可以与很多抗体分子交互结合。
有些分子本身没有免疫原性,不能引起免疫反应,但是如果把它们和某些载体分子,如蛋白质分子结合起来就有了免疫原性,就能使动物对这一复合分子产生特异的抗体。这种本身无免疫原性,但有反应原性,一旦把它与载体结合就有了免疫原性的物质,就称半抗原或不完全抗原。如寡糖,类脂和一些简单的化学物质等。吗啡就是一种半抗原,把它与蛋白分子结合起来,就可以使动物体产生相应抗体,此抗体可作为检测是否吸毒的试剂。
抗原相对分子量一般都在10X103以上,而在4X103以下者一般无免疫原性。在一定相对分子量范围内,分子量大者免疫原性强,这是因为:
1、相对分子量大,表面抗原决定簇就多,而淋巴细胞要求一定数量抗原决定簇刺激才能活化;
2、大分子化学结构稳定,在水中呈胶体,不易被机体破坏或排除,这样在体内存留时间就长,有利于持续刺激淋巴细胞。核酸本身免疫原性很低,但只要有5个核苷酸与蛋白质分子载体连接,就能刺激机体产生抗体。
抗原可分外源性抗原和内源性抗原两类,前者如细菌、病毒、花粉、各种毒素以及小型动植物;后者主要为机体从未接触过的物质或构象发生改变的自身成分,如变性的IgG重链、晶状体物质、精子、脑组织等。
抗体是人或动物受抗原物质(如细菌或其毒素、病毒等)刺激后,由浆细胞合成和分泌的一种特异性蛋白质。抗体是人体抵抗感染的一种重要武器。19世纪末,德国科学家Behring发明了用含白喉抗毒素的动物血清注射给白喉患儿,使其治愈。此后医学家们用含有不同抗体的动物血清或人血清来治疗或预防多种传染病。由于Behring开创了抗体治疗传染病的方法,对防治传染病作出了卓越贡献,本世纪初荣获诺贝尔医学奖。但传统的人工生产抗体的方法是将抗原物质(如细菌或其毒素等)注射给动物(如马、羊等),使动物产生针对该抗原物质的抗体。人们抽取免疫动物的血液,分离出含抗体的血清。这种体内生产抗体的传统方法有许多缺点。例如所获得的抗体不纯,不能连续生产,动物饲养与管理工作繁重等,故长期以来医学家们一直在探索在试管内(即体外)生产抗体的方法, 1976年英国剑桥大学两位科学家Milstein和Koh1er将小鼠骨髓瘤细胞与免疫小鼠的脾细胞杂交。小鼠骨髓瘤细胞能在体外无限增殖传代并能分泌无抗体活性的球蛋白;免疫小鼠脾细胞能产生针对某种抗原的抗体,但不能在体外无限增殖。将两者融合成一种杂交瘤细胞,后者继承了两个亲代细胞的特点,既可在体外无限增殖,又可产生针对某种抗原的抗休。一个杂交瘤细胞在体外不断增殖所形成的细胞集团,被称之为克隆。在同一克隆中所有的细胞产生相同的抗体,此抗体称之为单克隆抗体(简称McAb)。它是单一特异性的高纯度的抗体,可在体外连续大量生产。McAb在临床医学及基础医学领域发挥了巨大作用,给某些难治疾病的诊断、防治带来了新的希望。如针对某种肿瘤细胞的McAb与毒素、抗癌药物或放射性物质结合成复合物(医学上称为生物导弹),将此复合物注射到病人体内,可定向杀伤McAb所针对的肿瘤细胞,而对其它正常细胞则无作用,这是任何其它抗癌治疗方法办不到的。因此,单克隆抗体技术被誉为现代生物科学的一项革命性突破,是当今四大生物工程技术之一。由于Milstein和kohler的杰出贡献,1984年他俩共同获取了诺贝尔医学奖。