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TheNativeAntigenCompany/Rubella Virus VLP/REC31651-500
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ELISA detection of IgG and IgM antibodies to spike glycoprotein (E1), nucleoprotein (NP) and virus-like particles (VLP) of Rubella virus.

RUBELLA VIRUS VLP

Rubella virus-like particles are produced by recombinant expression of Rubella structural polyprotein (amino acids 1-1063, Uniprot accession number NP_062884.1) in HEK293 cells.

PRODUCT DETAILS – RUBELLA VIRUS VLP

  • Recombinant Rubella virus-like particles comprising Spike glycoprotein E1, Spike glycoprotein E2 and Capsid protein expressed from HEK293 cells (strain F-Therien, NCBI Accession Number: NP_062884.1).
  • Greater than 95% purity by SDS-PAGE and buffered in 40mM TRIS-HCl pH8.0, 100mM NaCl.
  • BACKGROUND

    Rubella virus is an enveloped, positive single-stranded RNA virus and a member of the genus Rubivirus, which belongs to the Togaviridae family. It consists of three structural proteins: a capsid protein and two membrane-spanning glycoproteins, E1 and E2, localized in the virus envelope (Oker-Blom, et al., 1983).

    E1 and E2 exist as a heterodimer and form the viral spike complexes on the virion surface. Formation of an E1-E2 heterodimer is required for transport of E1 out of the endoplasmic reticulum lumen to the Golgi apparatus and plasma membrane (Yang, et al., 1998). E1 is the dominant surface molecule of the virus particle representing the main target for the detection and subsequent elimination of virus by the host’s immune system (Green & Dorsett, 1986; Wolinsky, et al., 1983). Although both E1 and E2 provide lifelong immunity, hemagglutination (HA) and viral neutralization (VN) is believed to be mainly targeted to E1 protein epitopes (Chaye, et al., 1992).

    Immunogenicity studies have shown Rubella VLPs to be significantly more active than soluble E1 protein in inducing antibody responses in mice, especially for producing VN and HA-inhibiting activity. VLPs have also been shown to stimulate cell-mediated immune responses to Rubella virus and Rubella virus structural proteins, which may be important in providing protective immunity against infection. Therefore, VLPs show good potential for safe vaccine development (Qiu, et al., 1994).

    REFERENCES

    • Chaye, H. et al., 1992. Localization of the virus neutralizing and hemagglutinin epitopes of E1 glycoprotein of rubella virus. Virology , Volume 189, p. 483–492.
    • Green, K. Y. & Dorsett, P. H., 1986. Rubella virus antigens: localization of epitopes involved in hemagglutination and neutralization by using monoclonal antibodies. J. Virol., Volume 57, p. 893–898.
    • Oker-Blom, C., Kalkkinen, N., Kääriäinen, L. & Pettersson, R., 1983. Rubella virus contains one capsid protein and three envelope glycoproteins, E1, E2a, and E2b. J. Virol., Volume 964–973, p. 964–973.
    • Qiu, Z., Ou, D., Hobman, T. C. & Gillam, S., 1994. Expression and characterization of virus-like particles containing rubella virus structural proteins. Journal of Virology, 68(6), pp. 4086-4091.
    • Wolinsky, J. S. et al., 1983. An antibody- and synthetic peptide-defined rubella virus E1 glycoprotein neutralization domain. J. Virol., Volume 67, p. 961–968.
    • Yang, D., Hwang, D., Zhiyong, Q. & Gillam, S., 1998. Effects of Mutations in the Rubella Virus E1 Glycoprotein on E1-E2 Interaction and Membrane Fusion Activity. J Virol., 72(11), p. 8747–8755.

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小弟想用ELISA测卵黄抗体活性,我用的抗原是金黄色葡萄球菌,不知细菌包被量如何确定。

看到文献上有用CFU/ml的,还有用(0.31mgcell/ml;10μgprotein/ml)。

不知protein/ml中的蛋白是如何测的,是用Bradford法吗,如果是这样细菌需不需要裂解呀?如果裂解的话测得结果就是总蛋白,而包被时吸附在板子上的是细胞外在蛋白,这好像不是一回事啊。晕!

不知我说没说清楚,请高手帮忙!多谢了!

PS:我用的金葡菌是有荚膜的,这对包被有没有影响!
非题
蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原.
颗粒型抗原,除了有细菌、红细胞、螺旋体等天然颗粒型抗原,还有吸附有可溶性抗原的非免疫相关颗粒.
  颗粒性抗原光镜下可见,比如细菌性抗原、红细胞抗原等;而可溶性抗原在光镜下不可见,如组织浸出液、细菌毒素、蛋白质分子等。
它们不等同于完全抗原和不完全抗原。完全抗原具有免疫原性和抗原性,而不完全抗原只具有抗原性。完全抗原可以是颗粒性抗原,亦可是可溶性抗原,而不完全抗原一般只能是可溶性抗原,不会是颗粒性抗原。
荚膜
荚膜是某些细菌在细胞壁外包围的一层粘液性物质,一般由糖和多肽组成,是细菌的一种特殊结构。
作用:

①抗吞噬作用:荚膜因其亲水性及其空间占位、屏障作用,可有效抵抗寄主吞噬细胞的吞噬作用。
②黏附作用:荚膜多糖可使细菌彼此间粘连,也可黏附于组织细胞或无生命物体表面,是引起感染的重要因素,具有荚膜的S-型肺炎链球菌毒力强,有助于肺炎链球菌侵染人体;废水生物处理中的细菌荚膜有生物吸附作用,将废水中的有机物、无机物及胶体吸附在细菌体表面上。
③抗有害物质的损伤作用:处于细菌细胞最外层,荚膜犹如盔甲可有效保护菌体免受或少受多种杀菌、抑菌物质的损伤,如溶菌酶、补体等。
④抗干燥作用:荚膜多糖为高度水合分子,含水量在95%以上,可帮助细菌抵抗干燥对生存的威胁。
⑤当缺乏营养时,荚膜可被利用作碳源和能源,有的荚膜还可作氮源。
菌莢膜抗原成阴性
常见于伤寒沙门氏菌。

荚膜(capsule)是某些细菌在生长繁殖过程中分泌的一层黏液性物质,包围在细胞壁外,通常这种黏液层厚度小于0.2μm,成分是多糖或多肽,只有在营养丰富时或在动物体内,细菌才产生这种半抗原性质的黏液性物质。它具有保护菌体免受巨噬细胞等的捕捉和吞噬,因而具有抗吞噬抗消化、侵袭力强、与致病性关系密切等特点。像肺炎球菌、炭疽杆菌等都有这类荚膜。有些细菌的荚膜层较薄,小于0.2μm,称为微荚。
像链球菌的M蛋白、伤寒杆菌的Vi抗原、大肠杆菌的K抗原等都属于这类微荚膜。
请问各位站友,细菌内毒素属于完全抗原还是半抗原呢?
请赐教!
特异多糖即O抗原的缺失会有细菌从滑型到粗糙型的改变
侵入体内的细菌或病毒。若未进入细胞内。其抗原可直接被B淋巴细胞识别。此时B细胞被致敏。同时被辅助性T淋巴细胞识别。分泌白细胞介素使已经被致敏的B淋巴细胞分裂分化成效应B细胞和记忆B细胞群。效应B细胞分泌抗体消灭病毒。

若已进入细胞内。则先由巨噬细胞吞噬降解。并形成抗原-MHC复合体传送到表面。被辅助性T淋巴细胞识别和效应T淋巴细胞识别后。效应T淋巴细胞被激活。分解靶细胞。然后再由效应B细胞分泌的抗体进一步消灭病毒。

还有不清楚的么?
小弟准备制备一些灭活的细菌抗原,大概过程就是先培养菌,然后用甲醛灭活,再离心弃上清,加PBS溶解沉淀至2mg-10mg/ml。我的问题是这个2mg-10mg/ml如何测定了?是通过分光光度计测260和280吗?
我想用细菌抗原免疫兔子。我能不能先将细菌灭活,然后与生理盐水混合,采用耳缘静脉注射菌液免疫呢?共免疫四次。各位战友觉得这个方法是否可行,还是要皮下免疫呢?我没有做过细菌免疫的工作,不是很明白,谢谢了。
疟疾病原体是一类抗原还是细菌
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