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2021-09-09
来源：《精编分子生物学实验指南》第五版 查看更多
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2021-09-21
虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选，然而有时这种纯化方式却非必需，或者无法实施进行。在大多数锖况下，运铁蛋白可发生共沉淀或共纯化，能用凝胶滤过层析去除之。 查看更多
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2021-07-28
凝集素是能可逆性结合碳水化合物的蛋白质。因为绝大多数凝集素至少每个分子有两个碳水化合物结合部位，所以它们可以沉淀糖蛋白和凝集细胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的亲和配基，具有单糖的糖蛋白可用温和的蛋白质冼脱条件分离。虽然凝集素亲和层折没有很高的选择性，但是无疑它已成为蛋白质纯化的一种常用方法。它通常作为系列纯化步骤之一。凝集素亲和柱也可用于除去作为污染物的糖蛋白。 查看更多
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2018-08-07
蛋白质和多肽是由 20 种氨基酸按照一定的顺序通过肽键连接成一长链。再通过链内、链间的离子键、疏水作用等多种作用力进行折叠卷曲形成一定构象而产生其特异性的活性作用。蛋白质的一级结构即氨基酸的排列顺序，决定了蛋白质的高级结构及功能。因此。测定蛋白质的一级结构是进行蛋白质结构与功能研究中不可缺少的部分。随着研究方法和手段的更新，蛋白质一级结构的分析向提高灵敏度、缩短周期的方向发展。 查看更多
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2018-12-26
蛋白的复性是一个世界性的难题，没有通用的方法，甚至没有靠得住的规律，只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了，如果有人知道原创作者或网上出处，请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体：包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集，形成无活性的固体颗粒。包涵 查看更多
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2021-08-05
抗体作为生物学上的一个有用工具已经超过一个世纪。 1 9 世 纪 7 0 年 代 ， Emil vonBehring 和 Shibasaburo Kitasato⑴最先阐述了免疫球蛋白，从那时起，抗体在研究和商业应用方面的使用取得了前所未有的进展。抗体最初是作为治疗病毒性疾病的天然抗血清来使用的。现今，高度工程化的治疗性抗体已被用于治疗多种危及生命的疾病。这一章将介绍纯化抗体的几种方法，尤其是单克隆抗体的纯化，纯化后的单克隆抗体具有多种用途。本章还将介绍抗体纯化前后的鉴定学方法。本章中，我们实验室产生的数 查看更多
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2018-12-26
大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。（一）水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍 查看更多
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2021-08-23
纯化受体从概念上可以分成两步: 第一步用合适的去污剂将受体从膜中提取出来 (增溶）; 第二步使用如常规的亲和标签、与该受体特异结合的配体层析柱、分子排阻色谱和其他方法纯化受体。最重要的是，必须注意选择实验条件以保持膜蛋白在整个纯化过程中处于活性状态。这一点怎么强调也不过分，因为很多 GPCR—旦被去污剂从质膜中提取出来就会变得不稳定。 查看更多
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2018-12-26
研究者们在分离到某一基因后，要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达——即：有目的性地合成外源基因产物。在重组DNA技术的发展早期，人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达。随后，认识到获得有效的翻译所需的条件要复杂得多， 查看更多
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2018-12-26
Protein purification; actin Overview ACTINThe most abundant muscle and non-muscle cytoskeletal protein. MW 42 kDa, 374/375 amino acids; various isoforms; s 查看更多
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2021-08-07
抗体作为生物学上的一个有用工具已经超过一个世纪。 1 9 世 纪 7 0 年 代 ， Emil vonBehring 和 Shibasaburo Kitasato⑴最先阐述了免疫球蛋白，从那时起，抗体在研究和商业应用方面的使用取得了前所未有的进展。抗体最初是作为治疗病毒性疾病的天然抗血清来使用的。现今，高度工程化的治疗性抗体已被用于治疗多种危及生命的疾病。这一章将介绍纯化抗体的几种方法，尤其是单克隆抗体的纯化，纯化后的单克隆抗体具有多种用途。本章还将介绍抗体纯化前后的鉴定学方法。本章中，我们实验室产生的数 查看更多
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2018-12-26
Small scale His-Tag fusion protein purification under denaturative conditionsIntroduction High levels of expression of recombinant proteins in a bacterial syst 查看更多
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肿瘤检测pcr试剂盒规格100t什么意思_问答详情_蛋白纯化试剂盒_...123
允儿08932017-10-03
肿瘤检测pcr试剂盒 规格100t 这个规格是按照样本的数量来决定的，样本数量直接决定了你所使用的盒子的规格，这个规格的大小取决于样本数量。
请问Abbkine的蛋白质纯化的填料有具体的信息资料吗？ 123
秋季艳阳一个天2021-07-27
我是第一次做蛋白质纯化实验，希望多多指教！
【求助】求:DNA甲基化修饰和纯化一步法的试剂盒急!!! PCR技术...123
sunyunyun2021-08-13
师哥师姐们好,请问有谁用过chemicon公司的CpGenomemodificationkit试剂盒的货号(S7820),这个试剂盒是甲基化和纯化一步完成的吗?我现在实验需要用到DNA甲基化试剂盒,但是我现在不知道它的的具体用法,知道的师哥师姐们可以给我说一下的它的用法吗?谢谢!
细胞免疫组化(SABC法)123
gopwfsycre2021-08-11
免疫组化检测小鼠组织抗原表达情况时,采用免疫组化用纯化抗体（小鼠）进行抗原抗体反应,纯化小鼠抗体通常有多个表位,除去和抗原反应的表位外,还可以有一个表位结合羊抗小鼠IgG,在羊抗小鼠IgG上面连上生物素,可以通过SABC法进行生物素显色,根据显色情况来判断抗原的表达水平,属于间接检测法.该方法比较灵敏,但是实验过程条件太多,容易出现假阳性……
【求购】镍柱蛋白纯化试剂盒_问答详情_蛋白纯化试剂盒_蛋白纯化_...123
qinhuan04252021-08-15
哪个公司企业的ELISA试剂盒好,性价比高,服务好?如何选择elisa试剂盒...123
2021-07-25
新药研发中HCP那些事(上)123
FDUzhouwb2021-08-09
看了下说明书，上面没有具体说。感觉捕获抗体和酶标抗体需要对HCP有不同的结合位点才能形成稳定的抗体-HCP-抗体复合物。不知道有没有战友熟悉，求解惑，谢谢！
请问如何选择幽门螺杆菌的血清抗体试剂盒_问答详情_蛋白纯化试剂盒...123
hys2021-07-20
国内ELISA试剂盒哪个品牌好?123
★鲁鲁修★H9d2017-10-03
ELISA试剂盒很多牌子都不错，关键看灵敏度、实验效果、技术支持以及实验经费来决定
求助:冰冻切片做免疫荧光的一些问题?非常感谢 免疫学讨论版...123
shamoyecao2021-08-08
请教各位大咖，冰冻切片做免疫荧光染色二抗如果放37度l小时，切片会不会干掉，细节应该怎么做。如果二抗室温（现在室内13度）1小时够不够，我是二抗室温lh染了2次，都没有满意的荧光。还有病理科的老师说冰冻切片之前不能固定，我是直接新鲜组织OCT包埋后冰冻切片的
试剂盒的分类组词网123
阿韶flU66E82017-10-03
主要有： 1.磁珠法核酸提取试剂盒
2.磁珠法提取DNA试剂盒
3.DNA提取试剂盒（离心柱法）
4.磁珠法RNA提取试剂盒
5.RNA提取试剂盒（离心柱法）
6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒
7.反转录试剂盒
8.胶回收试剂盒
9.PCR纯化试剂盒
10.病毒核酸提取试剂盒（磁珠法）
11.土壤基因组DNA提取试剂盒
12.法医样本DNA提取试剂盒（磁珠法）等 1.elisa
常见elisa试剂盒有：
特种蛋白检测elisa试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
肿瘤标志物检测elisa试剂盒：
如肿瘤标志物，组织多肽抗原，肿瘤相关因子，胰腺癌，直肠癌，细胞角蛋白片段，胃肠癌，铁蛋白，糖链抗原，神经特异性稀醇化酶，上皮膜抗原，乳腺癌，人抗小鼠抗体，前列腺，甲胎蛋白，肝癌，甲基苯丙胺，大肠癌，肺癌，大小便隐血检测，癌胚抗原，β-2微球蛋白等等。
食品安全检验elisa试剂盒：
食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒，以及微生物、维生素等的检测产品。
植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒
动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒
传染病检测elisa试剂盒
如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族链球菌等等。
2.免疫共沉淀试剂盒
3.化学发光试剂盒
4.免疫组化试剂盒
5.放射免疫试剂盒
6.免疫荧光试剂盒 1.细胞凋亡试剂盒
2.葡萄糖检测试剂盒
3.支原体检测试剂盒
四、试剂盒使用示例
试剂盒的产生正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程，所以试剂盒中一般配备有相应的使用说明书，用户按照说明书不需或只需少量的优化即可得到满意的结果。
⑴试剂盒使用说明书
说明书一般包括公司标志及名称、试剂盒名称、试剂盒组成、保质期、使用领域、使用方法等项目
说明书格式如右图所示：
①一般在页眉页脚处为公司的名称及标志；
②接下来为试剂盒的名称；
③试剂盒组成中应为试剂盒中的所有内容，为了简洁明了，一般以表格的形式表现；
④操作步骤是试剂盒说明书中最重要的部分，内容应准确、简洁、易懂，不能包含带有歧义的句子，更不能含糊其辞，排版上操作步骤应将复杂的步骤拆解，使人一目了然。可以说操作步骤为试剂盒的灵魂。 试剂盒内容（以离心柱型为例）：
一般包括：裂解液RL
去蛋白液RW1
漂洗液RW
RNase free ddH2O
吸附柱（RNase free）
过滤柱（RNase free）
缓冲液
离心管（RNase free）
收集管（RNase free）
此外，还配有一份试剂盒使用说明书，根据不同的生产商，可能还配有不同的试剂，如：DNA酶、溶菌酶等。
使用时一定要根据自己的实验需要购买专用提取试剂盒， 如果不是专用试剂盒，或许能提出RNA，但不能确保其质量以及完整性，会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。
当前提取效果好的是QIANGEN公司生产的RNA提取试剂盒，但其售价较高，单次实验费用花费太大，对精度要求不高的实验没有必要购买，当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高、订货周期长的问题（如果碰上国内无货的时候，要从国外发货，会等很长一段时间）。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以，价格不高，基本上各地均有现货，如天根（目前国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种）等，其价格比进口试剂盒要便宜许多，且效果还不错，性价比还可以。
当然，就RNA的提取而言，不一定试剂盒的提取效果就非常好，其实采用一些经典的RNA提取方法，效果也很不错，如：TRIZOL、EDTA等，只是试剂盒使用方便，经典的方法操作复杂一些。向左转|向右转
2.磁珠法提取DNA试剂盒
3.DNA提取试剂盒（离心柱法）
4.磁珠法RNA提取试剂盒
5.RNA提取试剂盒（离心柱法）
6.磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒
7.反转录试剂盒
8.胶回收试剂盒
9.PCR纯化试剂盒
10.病毒核酸提取试剂盒（磁珠法）
11.土壤基因组DNA提取试剂盒
12.法医样本DNA提取试剂盒（磁珠法）等 1.elisa
常见elisa试剂盒有：
特种蛋白检测elisa试剂盒
如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等
肿瘤标志物检测elisa试剂盒：
如肿瘤标志物，组织多肽抗原，肿瘤相关因子，胰腺癌，直肠癌，细胞角蛋白片段，胃肠癌，铁蛋白，糖链抗原，神经特异性稀醇化酶，上皮膜抗原，乳腺癌，人抗小鼠抗体，前列腺，甲胎蛋白，肝癌，甲基苯丙胺，大肠癌，肺癌，大小便隐血检测，癌胚抗原，β-2微球蛋白等等。
食品安全检验elisa试剂盒：
食品中的激素、药物、霉菌毒素、过敏原残留、转基因产品的检测试剂盒，以及微生物、维生素等的检测产品。
植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒
动植物疾病诊断类如猪、牛、羊、马等家畜和禽类以及宠物类检测试剂盒
传染病检测elisa试剂盒
如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族链球菌等等。
2.免疫共沉淀试剂盒
3.化学发光试剂盒
4.免疫组化试剂盒
5.放射免疫试剂盒
6.免疫荧光试剂盒 1.细胞凋亡试剂盒
2.葡萄糖检测试剂盒
3.支原体检测试剂盒
四、试剂盒使用示例
试剂盒的产生正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制及优化过程，所以试剂盒中一般配备有相应的使用说明书，用户按照说明书不需或只需少量的优化即可得到满意的结果。
⑴试剂盒使用说明书
说明书一般包括公司标志及名称、试剂盒名称、试剂盒组成、保质期、使用领域、使用方法等项目
说明书格式如右图所示：
①一般在页眉页脚处为公司的名称及标志；
②接下来为试剂盒的名称；
③试剂盒组成中应为试剂盒中的所有内容，为了简洁明了，一般以表格的形式表现；
④操作步骤是试剂盒说明书中最重要的部分，内容应准确、简洁、易懂，不能包含带有歧义的句子，更不能含糊其辞，排版上操作步骤应将复杂的步骤拆解，使人一目了然。可以说操作步骤为试剂盒的灵魂。 试剂盒内容（以离心柱型为例）：
一般包括：裂解液RL
去蛋白液RW1
漂洗液RW
RNase free ddH2O
吸附柱（RNase free）
过滤柱（RNase free）
缓冲液
离心管（RNase free）
收集管（RNase free）
此外，还配有一份试剂盒使用说明书，根据不同的生产商，可能还配有不同的试剂，如：DNA酶、溶菌酶等。
使用时一定要根据自己的实验需要购买专用提取试剂盒， 如果不是专用试剂盒，或许能提出RNA，但不能确保其质量以及完整性，会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。
当前提取效果好的是QIANGEN公司生产的RNA提取试剂盒，但其售价较高，单次实验费用花费太大，对精度要求不高的实验没有必要购买，当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高、订货周期长的问题（如果碰上国内无货的时候，要从国外发货，会等很长一段时间）。普通的提取实验用国产的试剂盒就足以，价格不高，基本上各地均有现货，如天根（目前国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种）等，其价格比进口试剂盒要便宜许多，且效果还不错，性价比还可以。
当然，就RNA的提取而言，不一定试剂盒的提取效果就非常好，其实采用一些经典的RNA提取方法，效果也很不错，如：TRIZOL、EDTA等，只是试剂盒使用方便，经典的方法操作复杂一些。向左转|向右转
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