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同学说传代必须是一皿传多皿,一皿传一皿就不算传代~求高手指点~~
传代后5天,依然没有长满,怕影响活力,想传代和冻存,不知这样是否可以??
准确的分析方法对于生物化学实验是极为重要的,在各种生物化学分析技术中,首先要熟练掌握的就是准确的移液技术。为此要用到各种形式的移液管,其中有一些是学生们在化学实验中未用过而在生化实验中是常用的。
1 滴管
使用方便,可用于半定量移液,其移液量为1mL~5mL,常用2mL,可换不同大小的滴头。滴管有长、短两种,新出的一种带刻度和缓冲泡的滴管,可以比普通滴管更准确地移液,并防止液体吸入滴头。
2 移液管(吸管)
吸管使用前应洗至内壁不挂水珠,1mL 以上的吸管用吸管专用刷刷洗,0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗涤剂浸泡,必要时可以用超声清洗器清洗。由于铬酸洗液致癌,应尽量避免使用。若有大量成批的吸管洗后冲洗,可使用冲洗桶,将吸管尖端向上置于桶内,用自来水多次冲洗后再用蒸馏水或无离子水冲洗。
吸管分为两种,一种是无分度的,称为大肚吸管,精确度较高,其相对误差A 级为0.7%~0.8%,B 级为1.5%~0.16%,液体自标线流至口端(留有残液),A 级等待15s,B 级等待3s。另一种吸管为分度吸管,管身为一粗细均匀的玻璃管,上面均匀刻有表示容积的分度线,其准确度低于胖肚吸管,相对误差A 级为0.8%~0.2%,B 级为1.6%~0.4%,A 级、B 级在吸管身上有A、B 字样,有”快”字则为快流式,有”吹”字则为吹出式,无”吹”字的吸管不可将管尖的残留液吹出。吸、放溶液前要用吸水纸擦拭管尖。
3 微量进样器
微量进样器常用作气相和液相色谱仪的进样器,在生化实验中主要是用作电泳实验的加样器,通
常可分为无存液和有存液两种。
(1)10μL 以下的极微量液体进样。
无存液微量进样器:进样器的不锈钢芯子直接通到针尖端处,不会出现存液。
(2)10μL~100μL 有存液微量进样器:不锈钢的针尖管部分是空管,进样器的柱塞不能到达,因而管内会存有空气或液体,其使用注意事项是:①不可吸取浓碱溶液,以免腐蚀玻璃和不锈钢零件;②因为有存液,所以吸液时要来回多拉几次,将针尖管内的气泡全部排尽;③针尖管内孔极小,使用后尤其是吸取过蛋白质溶液后,必须立即清洗针尖管,防止堵塞。若遇针尖管堵塞,不可用火烧,只能用φ0.1mm 的不锈钢丝耐心串通;④进样器未润湿时不可来回干拉芯子,以免磨损而漏气;⑤若进样器内发黑,有不锈钢氧化物,可用芯子蘸少量肥皂水,来回拉几次即可除之。(更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考中检所对照品查询 www.rmhot.com)
4 自动取液器
这种取液器在生化实验中大量地使用,它们主要用于多次重复的快速定量移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的准确度(即容量误差)为±(0.5%~1.5%),移液的精密度(即重复性误差)更小些,为≤0.5%。
取液器可分为二种:一种是固定容量的,常用的有100μ L 等多种规格。每种取液器都有其专用的聚丙烯塑料吸头,吸头通常是一次性使用,当然也可以超声清洗后重复使用,而且此种吸头还可以进行120℃高压灭菌;另一种是可调容量的取液器,常用的有200μL、 500μL 和1000μL 等几种。
可调式自动取液器的操作方法是用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮,使数字窗口出现所需容量体积的数字,在取液器下端插上一个塑料吸头,并旋紧以保证气密,然后四指并拢握住取液器上部,用拇指按住柱塞杆顶端的按钮,向下按到第一停点,将取液器的吸头插入待取的溶液中,缓慢松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间),将吸头沿器壁滑出容器,用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体,排液时吸头接触倾斜的器壁,先将按钮按到第一停点,停留一秒钟(粘性大的液体要加长停留时间),再按压到第二停点,吹出吸头尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸头,可按下除吸头推杆,将吸头推入废物缸。
自动取液器的使用注意事项是:
①吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
②为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层”液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
③浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
④可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g。
我们每天长时间都在实验室里和移液器(俗称“枪”)打交道,枪已经成为实验室标配,因为它是很多实验过程和分析的基础。但正因为如此,我们都认为它很简单,就像走路和呼吸一样自然,不需要你花任何心思,它就可以做你想做的事情。但事实真的是这样吗?
事实上,枪虽小但往往关系到实验结果的准确性,有小伙伴经常抱怨枪老出问题:
1.用了一段时间就不准漏液了?
2.液体容易倒吸?
3.移液排不干净?……
到底是哪里出问题了呢,你有没有碰到这样的迷之困惑?
当当当,福利到,来自梅特勒-托利多瑞宁移液技术专家自告奋勇来解答大伙儿的困惑,有任何关于移液器使用的问题欢迎来和我们探讨共同进步哟~
最后感谢丁香园支持本活动!
我们会每天抽时间统一回复大家的问题,专家答疑截止12月31日哦!
移液管移液管有两种类型.一种只有一个刻度,只能量取一定体积的液体,如25mL.另一种上的刻度和滴定管类似,每小格也表示0.1mL.移液管使用时通常用吸球吸取液体。移液管是吸入溶液的,不是固定的,流出溶液是靠壁流出的;
心肌肌钙蛋白I,英文为CardiactroponinI,该试剂盒在POCT领域内几乎是每个厂家都必做的项目,也是多数医院科室都开展的收费项目,市场容量很大,全国一年下来保守估计有3千万人份。但有些厂家销售的特别好,有些厂家销售的很一般。这一是由于销售渠道所致、二是因为产品质量差导致。试剂盒质量差一是因为厂家自身调试工艺不太好,二是由于所选择的抗体质量不好所致。现在市面上有心肌肌钙蛋白I抗体的厂家不多,大概也就不超过10家吧,主要为进口品牌,如:HyTest、BBI、Biospacific、Medix,国产品牌为深圳菲鹏,杭州启泰。其中着重要说的是杭州启泰,这是一家成立7年的抗原、抗体研发公司,公司不大,但立足于自主研发、创新,最近新推出的cTnI抗体可以说是目前国内外最好的抗体,这也算是填补了国内该领域的空白。从事了该行业将近10年,发此贴也是真切希望国内的生物试剂类公司,都专注于研发、创新,做一些好的试剂出来。因为很多事情国内做的并不比国外差的,国内的生物同行请加油吧!

