HBMECmiRNAisforresearchuseonly.Itisnotapprovedforhumanoranimaluse,orforapplicationin
invitrodiagnosticprocedures.
Quantity:1μg
HumanBrainMicrovascularEndothelialCellmicroRNA(HBMECmiRNA)ispreparedfromearlypassageHumanBrainMicrovascularEndothelialCellsusingLifeTechnologies’mirVanaTMmiRNAIsolationKit.ThemicroRNAispurifiedbyorganicextractionandenrichedbyimmobilizationofRNAonglass-fiberfilters.ThemicroRNAiselutedandstoredinnuclease-freewater.MicroRNAfrom
SciencellResearchLaboratoriesisaconvenientandcosteffectivealternativetoacquiringexpensivetissues.
Specifications:
CatalogNo. | 1007 |
CountryofManufacture | UnitedStates |
ProductCode | HBMECmiRNA |
Size/Quantity | 1μg |
ProductUse | ThisProductisforresearchuseonly.Itisnotapprovedforhumanoranimaluse,orforapplicationininvitrodiagnosticprocedures. |
Storage | Storeat-80�C |
ShippingInfo | Dryice. |
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不知不觉几年下来自己也快毕业了,感谢丁香园这些年来的帮助。没有什么可回报的东西,就教教新人如何设计引物吧,尽量做到手把手的教,图文并茂。丁香园论坛中关于引物设计的帖子不少,以前很多站友会推荐 Oligo、PrimerPremier、DNA man 等等软件。这些软件设计完最后还是要去 BLAST 比对下,所以我教大家一种易懂实用的在线设计方法。就以人的 PTEN 基因为例,首先你要找
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上海沪震实业有限公司在发布的人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN) 检测试剂盒供应信息,浏览与人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN) 检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN) 检测试剂盒相关的内容。
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加拿大的生物化学家M·史密斯1978年发明了寡聚核苷酸定点诱变技术,因此而获得了1993年诺贝尔化学奖。这一方法被用来在体外对已知的DNA片断内的核苷酸进行转换、增删的突变。这就改变了以往的对跗物质DNA进行诱变时的盲目性和随机性,可以根据实验者的设计而有目的地得到突变体。该技术能够改...
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上海允麦生物科技有限公司在发布的大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA 试剂盒供应信息,浏览与大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA 试剂盒相关的产品或在搜索更多与大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA 试剂盒相关的内容。
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在近期 Anesthesiology 杂志上,来自美国华盛顿大学圣路易斯分校麻醉学系的 Athiraman 教授等报道了 1 例手术期间用核磁共振成像评估脑实质内温度探针的病例,现介绍如下。基本病史患者,26 周岁男性,因右侧额叶患少突星形细胞瘤、累及至蝶窦,行颅内根治术。在术中核磁共振成像(MRI)显示一线性低信号图像,沿右侧蝶窦延伸至颅内(如图所示)。研究人员分析认为,为一
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蛋白产物的检测一、组织蛋白的裂解提取:1.分别取-70℃保存的各组动物的样品(半个脑、0.5g肌肉),放入小离心管中,在冰浴上以PBS充分洗涤2次,除去残留血液。2.用无菌手术剪和镊子将大鼠肌肉剪碎(脑样品不用剪碎),放入另一小离心管中,于0℃以PBS充分洗涤,4℃,3000 rpm离心5分钟。3.吸出上清夜
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(一) 实验流程(1和2为并列步骤) 1.慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,PCR(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(CDNA质粒或者文库)调取目的基因CDS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。 2.慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构,退火后连入慢病毒干扰质粒载体 3
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Attachment of the ubiquitin peptide to proteins targets them for proteolytic degradation by a complex cellular structure, the proteasome. The regulated proteol
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化学及生物学意义上的探针(probe),是指与特定的靶分子发生特异性相互作用,并可被特殊的方法探知的分子。抗体-抗原、生物素-抗生物素蛋白、生长因子-受体的相互作用都可以看作是探针与靶分子的相互作用。...
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第四军医大学西京医院呼吸内科(710032)任新玲 吴昌归 李志奎 李树钧 张 艰 陈卫强 李圣青基础部生物化学与分子生物学教研室付海京免疫学教研室 鲍 炜 杨安钢第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所 钱桂生 HER2 是由 HER2/neu 基因编码的一种酪氨酸蛋白激酶,具有自动磷酸化作用,属表皮生长因子受体(EGFR)家族。乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌(NSCLC)等恶性肿瘤存在
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一、 材料准备:1.细胞爬片:细胞爬片经固定液-4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC,固定15min。经无水乙醇、95%、85%和75%乙醇各2min脱水。2.探针: 多聚寡核苷酸探针-FITC 2ug/ml二、 FISH操作流程 暴露mRNA 核酸片段:细胞爬片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2 滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃消化5 分钟。 ...
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一:结构特点:①含有稀有碱基较多,达核苷酸总量的5%-20%。②不同的tRNA尽管核苷酸组分和排列顺序各异,但其3’端都含有CCA序列,是所有tRNA接受氨基酸的特定位置。③所有的tRNA分子都折叠成紧密的三叶草二级结构和L型立体构象,结构较稳定,半衰期均在24小时以上。
二:主要功能:①运输功能②在逆转录作用中作为合成互补链DNA链的引物。③在细菌细胞壁、叶绿素、脂多糖和氨酰磷脂酰甘油的合成中都与某些tRNA的参与有关。
你好,很高兴回答你的问题。
探针就是DNA弹针。用于检测特定的DNA片段。
基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。
进行分子突变需要大量的探针拷贝,后者一般是通过分子克隆(molecular cloning)获得的。克隆是指用无性繁殖方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品。当制备基因组DNA探针进,应先制备基因组文库,即把基因组DNA打断,或用限制性酶作不完全水解,得到许多大小不等的随机片段,将这些片段体外重组到运载体(噬菌体、质粒等)中去,再将后者转染适当的宿主细胞如大肠肝菌,这时在固体培养基上可以得到许多携带有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通过原位杂交,从中可筛出含有目的基因片段的克隆,然后通过细胞扩增,制备出大量的探针。
为了制备cDNA 探针,首先需分离纯化相应mRNA,这从含有大量mRNA的组织、细胞中比较容易做到,如从造血细胞中制备α或β珠蛋白mRNA。有了mRNA作模板后,在逆转录酶的作用下,就可以合成与之互补的DNA(即cDNA),cDNA与待测基因的编码区有完全相同的碱基顺序,但内含子已在加工过程中切除。
寡核苷酸探针是人工合成的,与已知基因DNA互补的,长度可从十几到几十个核苷酸的片段。如仅知蛋白质的氨基酸顺序量,也可以按氨基酸的密码推导出核苷酸序列,并用化学方法合成。
我想要定量血浆miRNA,目前用的方法就是Qiagen公司的血浆提取、逆转、SYBGreenPCR试剂盒,引物也是qiagen,目前做出来的结果不是很理想,公司不提供引物序列,只有miRbase上的参考序列,想要证明引物序列、扩增产物是否是我们想要的,有人推荐设计Tapman探针,再做PCR,对比SYBGreenPCR结果,从而来看引物特异性。我的问题是:这样对比有意义吗?我问过很多公司做tapman只合成不设计,要自己提供序列,可我只有数据库中的参考序列,如果我自己有序列了不就可以合成特异引物,为啥要用tapman探针来验证呢?求专业人士答疑解惑!谢谢
①tRNA前体在tRNA剪切酶的作用下,切成一定在小的tRNA分子。大肠杆菌RNase P可特异剪切tRNA前体的5’旁顺序,因此,该酶被称为tRNA5’成熟酶。除了RNaseP外,tRNA前体的剪切尚需要一个3’-核酸内切酶,这可将tRNA前体3’端的一段核苷酸序列切下来。此外RNaseD是tRNA3’端成熟酶。近年来的研究表明大肠杆菌RNaseP是一种非常特殊的酶分子,它是由RNA和蛋白质组成,最近发现RNAaseP分子中的RNA部分在某些条件下,可以单独地催化tRNA前体的加工成熟,这个发现和四膜虫tRNA能自我拼接被认为是近十年来生化领域内最令人鼓舞的发现之一。说明RNA分子确具有酶的催化活性。经过剪切后的tRNA分子还要在拼接酶作用下,将成熟tRNA分子所需的片段拼起来。
②成熟的tRNA分子中有许多的稀有碱基,因此tRNA在甲基转移酶催化下,某些嘌呤生成甲基嘌呤如A→mA,G→mA。有些尿嘧啶还原为双氢尿嘧啶。尿嘧啶核苷转变不假尿嘧啶核苷。某些腺苷酸脱氨基为成为次黄嘌呤核苷酸(Ⅰ)
③3’末端加上CCA:在核苷酸转移酶作用下,3’--末端除去个别碱基后,换上tRNA分子统一的CCA-OH末端,完成tRNA分子中的氨基酸臂结构。
求助:
编码线虫的氨基酰tRNA
合成酶是否和编码大鼠的氨基酰tRNA合成酶的基因相同?
不会,siRNA识别靶序列是有高度特异性的,因为降解首先在相对于siRNA来说的中央位置发生,所以这些中央的碱基位点就显得极为重要,一旦发生错配就会严重抑制RNAi的效应。
国庆节到了,给大家整理下园子内关于siRNA转染的资料。供刚开始进行转染的科研者使用。同时附上自己转染的经验。
第一部分
siRNA理论知识
siRNA转染讨论-蚂蚁淘论坛
细胞转染小技巧-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】siRNA观念性问题-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】siRNA基因敲除-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】shRNA和siRNA的区别-蚂蚁淘论坛
回复:RNAishRNA和siRNA的区别是什么,两者分别用于什么时候?-蚂蚁淘论坛
关于这方面的理论知识去看看文献综述是个好办法。
第二部分
siRNA的设计
siRNA设计的原则-蚂蚁淘论坛
siRNA设计原则-蚂蚁淘论坛
回复:【共享】SiRNA序列的设计方法-蚂蚁淘论坛
请问siRNA和shRNA的设计有何区别?-蚂蚁淘论坛
第三部分
siRNA转染效率
FAM-siRNA转染效率检测-蚂蚁淘论坛
荧光显微镜检测细胞转染效率前是否需要换液-蚂蚁淘论坛
回复:siRNA效率-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】为何siRNA转染效果不佳-蚂蚁淘论坛
回复:用lipo3000转染结直肠癌细胞dld-1,质粒DNA浓度偏低-蚂蚁淘论坛
关于siRNA转染效率的就推荐这5个帖子吧。有反馈结果的,都基本成功的帖子。外加第5个为质粒转染。
第四部分
siRNA动物体内转染
RNAi及siRNA转染相关实验技术答疑,有问题尽管提-蚂蚁淘论坛
回复:【求助】活体内的RNAi导入实验设计请教-蚂蚁淘论坛
1,mRNA 水平的检测:siRNA 的作用机理在于其引起靶 mRNA 的降解,因此 mRNA 的降解水平是 siRNA 沉默效率的最直接指标。一般在 siRNA 转染后 24~72h 即可以检测到靶 mRNA 水平的降低。检测方法一般采用 Real-time PCR 定量检测。2,蛋白水平的检测:一般需要借助抗体(针对靶基因蛋白质的抗体或针对融合蛋白的抗体)或报告基因系统检测,检测手段一般有 Western-blot、免疫组化等。一般说来,检测时间受细胞内蛋白质表达量、蛋白质本身的半衰期等因素的影响,一般为 48~96h,甚至更长时间之后多点采样。3,通过siRNA引起的其他生物学变化来检测:某些siRNA作用于靶基因,会引起细胞的调亡和增殖变化,这个时候,可以通过关于调亡和增殖的变化来看RNAi的效果。希望能对您的问题有所帮助。
本人最近一直做探针法,可是阴性对照也出峰,排除污染,还有什么原因呢?怎么解决呢?新手求指教!!!
在恒星星图里完全没有什么圈啊,方向啊那些
没法移动,也没有办法看信号强度啊?
我用获得的线粒体全基因组序列在网上预测tRNA,预测用的软件为tRNAscan-SE1.21(http://lowelab.ucsc.edu/tRNAscan-SE/)。
我是这样进行预测的:在“SearchMode:”中选择“rRNAscanonly:”,在“sorce”中选择“mito/chloroplast”,粘贴序列,运行程序。得到了21个tRNA,而鱼中应该是22个tRNA,我觉得很奇怪,在“SearchMode:”和“rRNAscanonly:”中进行其它的设置,都不能得到22个tRNA.
我看的一篇文献“CompletemitochondrialDNAsequenceoftheJapanese
flyingfishCypselurushiraii”中也是说22个tRNA,但是我把文章提交的序列(Genbank号为AB182653.)拿到网上提交,只有21个tRNA,我觉得很奇怪。
不知道是怎么回事?请高手指点,那个软件好像是比较权威的。
补充,还有说常见的有丝氨酸水解酶家族,有文献提及赖氨酸。请问这些是如何选择的