【求助】用QuikChange试剂盒做单点突变，测序后没有突变
2021-08-03
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laforet
用户
GC含量高，体系里加4%-8%的DMSO延伸时间尽可能缩短，最多16-20个循环。PCR后DpnI消化一小时后震荡混匀，离心后再消化一小时如果实在有困难，连T载体应该会容易很多
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三个土
用户laforetGC含量高，体系里加4%-8%的DMSO延伸时间尽可能缩短，最多16-20个循环。PCR后DpnI消化一小时后震荡混匀，离心后再消化一小时如果实在有困难，连T载体应该会容易很多好的，谢谢前辈啦，我先试试看加DMSO，再把片段切到t载体上试试~~
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yunlongma
用户请问，实验结果怎么样了？？？我也在用这种方法，测序显示都没有突变，求指教？？
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三个土
用户yunlongma请问，实验结果怎么样了？？？我也在用这种方法，测序显示都没有突变，求指教？？我用了小一些的质粒就做出来了····如果还是做不出来那就修改一下反应时间温度循环的条件。这个试剂盒比较贵，所以在摸条件的时候不用按照说明书上的体积，只要比例对就行！
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