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Stemcell/DNA Ladder & Loading Dye//79017
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Stemcell/DNA Ladder & Loading Dye//79017
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Stemcell
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79017
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Overview

1 kb DNA Ladder allows for determining the size of double-stranded DNA from 250 - 10000 base pairs (bp) by gel electrophoresis. The ladder consists of 13 double-stranded, blunt-end DNA fragments, of sizes 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 4000, 5000, 6000, 8000, and 10,000 bp (see Figure 1). The 1000 and 3000 bp fragments have greater intensity relative to the other bands for easy identification. DNA Ladder is not intended for quantitative analysis. The 1 kb DNA ladder comes pre-mixed with DNA Loading Dye, which is also available for individual sale (Catalog #79018), for loadingDNA samples into agarose gel wells. The recommended loading volume of the 1 kb DNA ladder is 6 μL per lane. DNA Loading Dye is a ready-to-use marker dye containing orange G (0.4%), bromophenol blue (0.03%), and xylene cyanol FF (0.03%), in 15% Ficoll® 400, 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), and 50 mM EDTA (pH 8.0). The dye is used for loading DNA samples into agarose gel wells and tracking migration during electrophoresis. In a 0.5 - 1.4% agarose gel in 0.5X TBE, xylene cyanol FF migrates at approximately 4 kb, bromophenol blue at approximately 300 bp, and orange G at approximately 50 bp. This product is free of nuclease activity.
Subtype:
Genome Editing
Species:
Human; Mouse; Rat
Area of Interest:
Disease Modeling
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Sucrose Gradient Protocolfrom Song et al. 1996, Modified by Ginger HoffmanGrow a 2 ml culture, 24 hr. at 30oC in selective media When culture is ready, use it 查看更多>
Yeast Miniprepfrom Robzyk and Kassir, Nucleic Acid Res. (1992) 20:3790Materials:• 10 ml overnight culture yeast in drop out media (must be very dense) 查看更多>
Yeast RNA Miniprepgrow cells to mid-log phase (10-20 ml) (or take samples from time courses, 5-25 ml) spin cells, discard supernatant wash cells once with 1 ml 查看更多>
靶向药物是指干扰肿瘤各个过程的特定分子而实现抑制或阻断肿瘤进展的药物,其发挥功能的基础是正常细胞和肿瘤细胞的差异之处,这使得靶向药物的特异性强而副作用小。靶向药物是精准治疗的「先锋」其诠释了「标准化」治疗为基础的「个体化」治疗原则。而「个体化」治疗的前提条件是因为个体差异而进行的分子靶点检测。个体分子靶点检测包括:(1)个体基因突变 查看更多>
2021-09-09
红荣微再(上海)生物工程技术有限公司在发布的Illumina 基因测序试剂盒,Miniseq Kit,FC-420供应信息,浏览与Illumina 基因测序试剂盒,Miniseq Kit,FC-420相关的产品或在搜索更多与Illumina 基因测序试剂盒,Miniseq Kit,FC-420相关的内容。 查看更多>
Yeast Protein Isolation "Yaffe-Schatz"David AmbergAdapted from Yaffe, M.P. and Schatz, G., PNAS, 1984, 81, 4819-4823.Grow 25mls yeast cells to 5x10E6. Sequenti 查看更多>
北京亘辰科技有限公司在发布的ChIP-Seq 测序试剂盒 供应信息,浏览与ChIP-Seq 测序试剂盒 相关的产品或在搜索更多与ChIP-Seq 测序试剂盒 相关的内容。 查看更多>
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多>
V3.1用于大部分应用 De novo测序 : De Novo 测序也叫从头测序,不需要任何基因序列信息即可对某个物种进行测序。用生物信息学的分析方法对序列进行拼接、组装,从而获得该物种的基因 查看更多>
微液滴数字PCR在靶向测序建库中的应用 查看更多>
上海云序生物科技有限公司在发布的目标序列靶向测序供应信息,浏览与目标序列靶向测序相关的产品或在搜索更多与目标序列靶向测序相关的内容。 查看更多>
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基于靶向药指征的肿瘤基因检测、二代和三代基因测序的应用。
接下来的实验需要用石蜡切片组织提取DNA用于测序判断基因突变,请问各位经验人士是否可行?
先谢了
BigDye Terminator v3.1简称BDT,是ABI公司的测序专用kit,成分包含了taq酶,标记了大荧光染料的ddNTP等,是类似PCR扩增试剂的Mix,进行的是线性扩增得到碱基的排序。
基因测序试点单位资格,仪器规范,试剂(盒)规范,试验流程和管理规范(也就是做检测的单位和机构要有资质)。这三方面都达成了才能保障检测的安全规范。
1、目标序列靶向测序是一种对感兴趣的基因组区域进行富集测序的研究策略。目标区域测序的主要优势在于可针对特定区域进行测序,有效降低了测序成本,提高了测序深度,能够更为经济有效地研究特定区域的遗传变异。
2 单细胞测序是指单个细胞水平上对基因组进行测序。
3、靶向测序步骤为 样品准备、探针/引物设计、目标序列捕获、文库制备、上机测序、数据分析。
4、单细胞的分离--DNA/RNA的提取和扩增(全基因组扩增和全转录组扩增)---测序以及后续的分析和应用。
相同:使用二代测序
不同:样本处理,文库构建,检测的区域,数据分析流程
1.bigdye测序反应试剂盒 主要试剂是bigdye mix,内含pe专利四色荧光标记的ddntp和普通dntp,amplitaq dna polymerase fs,反应缓冲液等。
2.pgem-3zf (+) 双链dna对照模板 0.2g/l,试剂盒配套试剂。
3.m13(-21)引物 tgtaaaacgacggccagt,3.2μmol/l,即3.2pmol/μl,试剂盒配套试剂。
4.dna测序模板 可以是pcr产物、单链dna和质粒dna等。模板浓度应调整在pcr反应时取量1μl为宜。本实验测定的质粒dna,浓度为0.2g/l,即200ng/μl。
5.引物 需根据所要测定的dna片段设计正向或反向引物,配制成3.2μmol/l,即3.2pmol/μl。如重组质粒中含通用引物序列也可用通用引物,如m13(-21)引物,t7引物等。
6.灭菌去离子水或三蒸水。
7.0.2ml或和0.5ml的pcr管 盖体分离,pe公司产品。
8.3mol/l 醋酸钠(ph5.2) 称取40.8g naac·3h2o溶于70ml蒸馏水中,冰醋酸调ph至5.2,定容至100ml,高压灭菌后分装。
9.70%乙醇和无水乙醇。
10.naac/乙醇混合液 取37.5ml无水乙醇和2.5ml 3mol/l naac混匀,室温可保存1年。
11.pop 6测序胶 abi产品。
12.模板抑制试剂(tsr) abi产品。
13.10×电泳缓冲液 abi产品。
14.abi prism 310型全自动dna测序仪。
15.2400型或9600型pcr仪。
16.台式冷冻高速离心机。
17.台式高速离心机或袖珍离心机。向左转|向右转
肺癌患者,想做一下基因检测,好知道用什么靶向治疗药物。另求告知一稳妥可信检测机构。谢谢
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看下neb的二代测序试剂盒的试剂盒说明书 上面一般针对这块都会有详细解答的 是在不行也可以找厂家寻求技术支持!
核酸纯化 一氪就够
用QuikChange试剂盒做单点突变,对照质粒都能正常的出结果,但是目的质粒测序3次都没有突变。

说明书上写的可以扩14000bp以内的质粒,我的质粒长度7800bp,引物是32bp,说明书上要求tm值大于78,CG值大于40,按说明书上的算法我的算出来是tm81,CG值是59。


请问是不是我的质粒太大啦?要不我先把目的片段切下来连到T载体(加目的片段有4500bp)上?和我CG值太高也有关系吗?

做了两个月都没成功,急死我了,拜托大家给点意见谢谢啦!!!