【求助】有人用过pcDNA3.1 TA TOPO克隆试剂盒吗?

首页
品牌展示
产品查询
新闻资讯
帮助中心
联系我们
现货平台

商品列表技术文章相关问答

2021-09-12

问题描述：

我要做载体构建的课题,想用pCDNA3.1TATOPO克隆试剂盒进行连接,不用限制酶切割即能把目的基因连入载体里,我对这个原理不太清楚,有用过的可以详细介绍一下吗?现在哪个公司做这种试剂盒?从哪里可以买得到?先谢谢大家了!

*请输入10-500个字符

提交

已帮助
0人

zhangyefmmu

用户

可以这个试剂盒是INVITROGEN公司的需要ＰＣＲ的酶能产生Ａ末端，然后按说明书进行操作即可，和一般ＴＡ克隆载体使用无太大差别，但是此克隆连接为ＴＯＰＯ连接，不需ligase

已帮助
0人

xiaotian0903

用户

非常感谢你的热心帮助。我还想问你一个问题。用这个TOPO克隆试剂盒联入的PCR产物还用鉴定方向吗？如果需要鉴定方向，该用什么方法？pCDNA3.1DirectionalTOPO克隆你用过吗？这个对PCR产物的要求是什么，是不是应该加酶切位点而不是加A

已帮助
0人

普通学生

用户

实际上就像一个Ｔ载体了，只不过这个东西既可以克隆也可以表达

已帮助
0人

xiaotian0903

用户

pCDNA3.1DirectionalTOPO克隆和pcDNA3.1/V5-HisTOPOTA克隆试剂盒对PCR产物的要求是不是不一样啊?前者是要求在上游引物加上CACC进行PCR扩增,连接成功后不需要鉴定方向;而后者只要在PCR产物加A末端即可,连接后要鉴定方向.我的理解是这样的,不知道是否正确,请指正!

已帮助
0人

普通学生

用户

但是我有一个问题，连入PCDNA3.1的片断一般都是较大的片断，但是TOPO又是TA克隆，而高保真酶一般都不加A的，怎么来解决既可以扩增长片断，又保真，并且还加A？（Takara的LA证明保真性是不行的）

已帮助
0人

zya0180

用户

对于pCDNA3.1TATOPO克隆方法好像讨论得比较少哦，上传一个pcDNA3.1TATOPO克隆试剂盒说明书，看看有帮助么？pcdna3.1topota_man.pdf(291.82k)

已帮助
0人

中美泰和生物

用户

T载体的话，你可以试试美国的Clonesmarter品牌的，真的很好用。