96-well Cell Adhesion Assay
(Collagen IV Coated, Fluorometric Assay)
Catalog Number: ECM-1022 96 assays
Storage: Upon arrival store the components at 4C.
Introduction: Due to its diverse nature and composition, the ECM can serve many functions, such as providing support and anchorage for cells, segregating tissues from one another, and regulating intercellular communication. The ECM regulates a cell"s dynamic behavior. In addition, it sequesters a wide range of cellular growth factors, and acts as a local depot for them. Changes in physiological conditions can trigger protease activities that cause local release of such depots. This allows the rapid and local growth factor-mediated activation of cellular functions, without de novo synthesis.
Formation of the extracellular matrix is essential for processes like growth, wound healing and fibrosis. An understanding of ECM structure and composition also helps in comprehending the complex dynamics of tumor invasion and metastasis in cancer biology as metastasis often involves the destruction of extracellular matrix by enzymes such as serine and Threonine proteases and Matrix metalloproteinase.
Biopioneer 96-well Cell Adhesion Microplate Assays are designed for the determination of the relative attachment of adherent cell lines to extracellular matrix proteins such as clooagen I, collagen IV, Firbronectin and vitronectin.
Principle of the assay
BioPioneer 96-welCell Adhesion Assays are designed for the determination of cell attachment to ECM proteins. After incubation followed by a brief wash step, attached cells are quantified with fluorescent dye. BSA-coated wells serve as a negative control, and poly-L-lysine-coated wells serve as a positive control for general attachment.
Materials Provided
1. Collagen IV Adhesion Plate (Part No. ECM-10112): One 96-well plate containing 72 Bovine Collagen IV coated wells , 8 BSA-coated wells and 8 poly-lysine coated wells(see layout below)
2. Fluorecent dye Solution (Part #: 10003): 50 ul in an amber vial
3. PBS
Materials Not Supplied
1. Cell culture medium
2. Serum free medium, such as DMEM containing 0.5% BSA, 2 mM CaCl2 and 2 mM MgCl2
4. 1XD PBS
5. 96-well microtiter plate
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没证实情况任何没依据推断都假想空想
请各位大侠帮忙分析一下原因！！万分感谢！！！
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康赛宁（注射用A群链球菌）（1999）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体（1999）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒 （1990） 吸附细胞百白破联合疫苗(三等奖)（2007）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(三等奖)（2001） 牛精浆纯化神经周围神经再影响(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1996）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（1995）
HLA单克隆抗体诊断试剂盒研制(三等奖)（1991）
抗T淋巴细胞及其亚群单克隆抗体研究(二等奖)（1990） 狂犬病疫苗评价(二等奖)（2008）
及亚洲区狂犬病毒流行病研究(三等奖)（2005）
抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）Fab噬菌体抗体库构建、筛选及鉴定(三等奖)（2005）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1996）
血源性抗狂犬病免疫球蛋白(三等奖)（1996）
狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基克隆测序表达(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1993）
痘苗病毒载体狂犬病毒基工程疫苗毒种研究(三等奖)（1993）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1992）
快速乙肝表面抗原酶标试剂盒试制(三等奖)（1992） 单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(三等奖)（1992）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖) （1990） 冻干用狂犬病疫苗 (等奖)（2007）
静脉注射用SARS免疫球蛋白(三等奖)（2006）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（二等奖）（2003）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(二等奖)（2001）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（2001）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1997）
牛精浆纯化神经周围神经再影响(二等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(三等奖)（1995）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1995）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(三等奖)（1994）
乙肝三系统单抗杂交瘤细胞株建立及乙肝诊断试剂两半研制(二等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(二等奖)（1991）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(三等奖)（1991）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1990）
冻干含钙凝血酶研究(二等奖)（1990）
湖北省科技推广奖
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广项目(二等奖) （2004）
湖北省卫厅医药卫科技进步奖
胶体金探针试剂(二等奖)(1995）
同伤寒菌苗接种体反应血清效观察(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
抗纤维蛋白质及其降解产物单克隆抗体(二等奖)（1995）
抗淋巴细胞球蛋白杂抗体吸收工艺改进研究(三等奖)（1993）
血吸虫虫卵抗体快速诊断用酶标试剂盒(三等奖)（1993）
单克隆(鼠)PAP试剂研制(等奖)（1993）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(等奖)（1990）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖)（1990）
十三种（套）临床化试剂盒(二等奖)（1990）
武汉优秀十科技创新
新型疫苗研究及产业化发 （2006） SARS病毒灭疫苗临床前研究 （2006）
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广应用 （2006）
百白破乙肝四联疫苗（2006）
冻干用狂犬病疫苗（2006）
狂犬病免疫球蛋白（2006）
乙型肝炎免疫球蛋白（2006）
武汉市科技进步奖
百白破乙肝四联疫苗(等奖)（2007）
冻干用狂犬病疫苗(二等奖)（2006）
精制单份乙型脑炎减毒疫苗 (二等奖)（2005）
麻疹、腮腺炎二联减毒疫苗 (三等奖) （2004）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（等奖）（2003）
1.0ml/剂用狂犬病纯化疫苗获武汉市2002度优秀新产品、新技术技术创新先进表彰（2002）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(等奖)（2000）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(二等奖)（2000）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(三等奖)（1996）
抗咳喘片研制应用(三等奖)（1993）
血清培养液(三等奖)（1992）
武汉市发明奖
安全类免疫缺陷病毒抗体阳性血清替代物(三等奖)（2001）
抗咳喘片研制应用(二等奖)（1992）图" class="ikqb_img_alink">
2.腹水浓稀释于3倍体积Tris缓冲液1~5 ml/min 速度于蛋白A-Sepharose柱用Tris缓冲液洗柱直至所未结合蛋白都洗脱采用A280监测
3.依用2~3倍柱床体积柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液液及甘氨酸·Cl缓冲液连续洗脱结合蛋白洗脱蛋白直接接入装缓冲液管缓冲液体积应所收集蛋白体积1/4
4.采用ELISA检测抗原特异性MAb
5.超滤器浓缩所离单克隆抗体1~5mg/ml所用超滤膜XM50单克隆抗体存于-20℃
1.如果在引物的5’引物引入了T7启动子，3‘引物也引入了polyT,PCR扩增出全长片段，回收纯化之后可以用来直接做体外转录么？为什么看到文献里都是先把这个PCR片段连接到载体里面，扩增之后提取出来线性化之后，再进行体外转录。是不是转录对模板的量有要求？
2.如果使用一些带有T7启动子序列的载体比如pBluescriptSK，在启动子序列和酶切位点之间还有多余的一段序列，这段序列也会被启动子转录，这一小段多余的序列是否会对接下来的转染以及病毒拯救带来影响？
3.有人在做反向遗传么，哪些载体可以用来进行体外转录？插入片段为7.5K。
