pEco-Lenti-U6-shRNA-(Puroomycin)CloningKitisdesignedtocloningofdouble-strandDNAencodingashorthairpinRNA.Oncetranscribed,theshRNAwasprocessedintoshortRNAinvivoforRNAianalysis.TomakeshRNAexpressingvector,twosyntheticoligonucleotideswerefirstannealedtoformthedoublestandDNAduplexwhichwasthenclonedintotheReady-to-use,linearpEco-Lenti-U6-(Puromycin)vectorviaT4enzymeligation.

ThetranscriptionofshRNAwasdrivenbyaconstitutivehuman U6promoter,aRNApolymeraseIIIpromoter.ThisKitprovidesmaterialsforgenerating10 ofyourownshRNAexpressionlentivectorwiththefollowingadvancedfeatures. Pleaseseeproductmanualfordetails.

shRNAvectorcloningscheme:   

Kitcontents:

pEco-Lenti-U6-(Puromycin)linearvector:              10ul(10rxn,1ul/rxn)
10xshRNAoligoannealingsolution:                       50ul
5Xligationbuffer:                                                 50ul
T4ligaseenzyme:                                                 10ul(10rxn,1ul/rxn)
Cloningcontrolinsert:annealedLuc-shRNAduplex:   5ul(5rxn,1ul/rxn)
Sh-Sequencingprimer:                                          10ul(10rxn,1ul/rxn)

Materialrequiredbutnotincluded:
DH5achemicalcompetentcells:                        10vials(10xn,1vial/rxn)

KeyFeatures:

1. Linearizedvectorandreadyforuse,noneedforthetediousbenchworksforpreparationofvectorbackbone;
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   公司简介

   

   蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台， 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...

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   售后申请： 耐心讲解 优质服务 蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。

   
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   2019-09-25

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   2021-09-04

   pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体是由深圳市伟通生物公司代理或销售的Clontech品牌的试剂，产品来源于国外。深圳市伟通生物公司是中国最权威的pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体产品 查看更多>

   毒品检测试剂盒的使用方法:

   2021-08-10

   毒品检测试剂盒，即为毒品快速检测试纸（试剂）盒装规格。适用范围：公安部门、禁毒机构对可疑人群的筛查； 征兵、入学体检；戒毒机构治疗监控，医疗卫生防疫部门的普查、筛查、体检等。... 查看更多>

   超净台使用操作规程

   2019-04-14

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   2021-09-17

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   Costco联合创始人杰弗里·布罗特曼去世，谨以此文缅怀虎嗅网

   2021-08-20

   不一样的无缝克隆，仅需三步即可完成基因克隆！，Lucigen提供全新、高效快速的基因克隆方法，无需DNA纯化以及连接酶、重组酶的作用，只需三步即可完成 查看更多>

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   2018-12-26

   2　讨论 　　以上介绍的几种方法基本代表了现有的启动子克隆方法，它们分别具有不同的特点和适用范围。 　　利用启动子探针载体筛选启动子时，不需要知道具体的基因序列，避免了引物设计，并能获得大量的启动子片段；其缺点是需要构建1个穿梭质粒，建库、转化、筛选，工作量大，费时费力，而 查看更多>

   因为血清阴性结果,可能你漏诊了近两成类风湿关节炎_诊断

   2018-12-26

   1.6　TAlL-PCR 　　很早就有用随机引物的PCR，但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生，所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL-PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR，则解决了这个问题，后来有研究表明，经改良过的TAIL 查看更多>

   动物RNA提取实验 实验方法

   2019-03-06

   默瑞（上海）生物科技有限公司，Leica显微系统，Merk Millipore实验室纯水超纯水仪，Roche实时定量PCR仪，Partec流式细胞仪，RPA，TwistDx 代理商，Echelon代理商，Jackson代理商,KAPA，enzymatics经销商等,莫纳生物集团企业。 查看更多>

   【求助】溶剂峰拖尾怎么办？_气相色谱（GC）仪器社区 ...

   2020-08-27

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   可被单一限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA制备实验

   2019-06-25

   可被单一限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。在某些情况下，制备好的 λ 噬菌体 DNA 经限制酶的简单消化即可用于克隆。但只有... 查看更多>

   CloneSmarter TOPO克隆载体 PcloneEZBlunt TOPO Cloning Kit

   2019-04-03

   中美泰和生物技术（北京）有限公司在发布的市售最好的亚克隆载体-Clone Smarter TOPO载体克隆试剂盒（既适用于平末端，又适用于末端加A片段克隆）供应信息，浏览与市售最好的亚克隆载体-Clone Smarter TOPO载体克隆试剂盒（既适用于平末端，又适用于末端加A片段克隆）相关的产品或在搜索更多与市售最好的亚克隆载体-Clone Smarter TOPO载体克隆试剂盒（既适用于平末端，又适用于末端加A片段克隆）相关的内容。 查看更多>
   常见问题

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   商品咨询

   ...的 pBST II 快速克隆试剂盒 的详细说明!谢谢!!!123

   lala4422021-09-01

   pBS-T Ⅱ 克隆试剂盒pBS-T Ⅱ连接试剂盒基础增加肠杆菌受态细胞本试剂盒配TOP10 受态细胞转化效率达108 cf μ/ μg
   
   保存条件: 受态细胞要严格-70℃冰存SOC培养基置于2-8℃保存其余试剂于-20℃保存避免反复冻融

   【求助】强力霉素单克隆抗体、酶联试剂盒的研制 免疫学讨论版...123

   movecloud2021-07-26

   本人原来是做仪器分析的，因老板的课题需要要我做强力霉素酶联免疫试剂盒，本人看了一点相关资料但还是不很清楚。请各位大侠尽量详细的指导一下。谢谢！

   ...的反转录buffer用完了,可以用其他反转录试剂盒里面的buffer吗...123

   之玮4dX嶑2021-09-03

   用克隆片段试剂叫缝克隆试剂盒楼提同科物操作简单快速效率高

   【求助】有人用过pcDNA3.1 TA TOPO克隆试剂盒吗? 核酸基因...123

   xiaotian09032021-09-12

   我要做载体构建的课题,想用pCDNA3.1TATOPO克隆试剂盒进行连接,不用限制酶切割即能把目的基因连入载体里,我对这个原理不太清楚,有用过的可以详细介绍一下吗?现在哪个公司做这种试剂盒?从哪里可以买得到?先谢谢大家了!

   最简便的制作abo血型试剂的方法123

   2021-08-15

   ABO血型A型、B型、O型、AB型 ABO血型鉴定即指ABH血型抗原检测红细胞含A抗原叫A型含B抗原叫B型含AB抗原叫AB型；含A、B抗原含H抗原称O型

   【共享】无需连接酶,同源重组实现无缝克隆快速克隆新方法 核酸...123

   aidlab2021-08-26

   您也可以自己制作无缝克隆试剂盒---SeamlessCloning（无缝克隆）简介　
   SeamlessCloning(无缝克隆)技术提供了一种新的、高效快速的基因克隆方法，只要插入的DNA片段末端与载体末端具有15-25个重叠碱基序列就可以在载体的任意位点完成克隆重组。
   产品特点：
   1.30分钟可以将一个或者多个长、短PCR扩增片段（平端、A端均可）插入载体。
   2.不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制，可以在任意位点进行克隆。
   3.无缝克隆，插入点不会引入不需要的碱基序列。
   4.高效、准确，阳性率＞95%。
   无缝克隆技术严格意义不是新技术，类似于乔布斯天才的集成了现成的电子元器件造出Iphone，开创了智能手机新时代一样。美国的吉布斯在2009年首次用一个新颖的思路，将3种现有的商品化的酶组合起来，达到了无缝克隆的效果，开创了无缝克隆新时代。因此，您也可以按照吉布斯的思路亲自组装无缝克隆试剂盒，领略天才的思路。当然你也可以通过购买北京艾德莱（aidlab）的无缝克隆试剂盒CV1201SeamlessAssemblyandCloningkit，体会无缝克隆的妙处。
   
   原理说明：紫红色和绿色2个片段为需要连接的双链DNA片段，它们末端有相同的15-25个重叠序列（黑色），首先T5exonuclease核酸外切酶切去5’端的一些碱基，形成3’端突出的单链，3’端单链互补退火；然后Phusion高保真聚合酶补上两条单链之间的缺口（gaps）；最后TaqDNAligase将相邻的单链裂口（nicks）连接补齐。
   以上用到的三种酶NEB公司全部有商品化销售，因此，您可以DIY自己的无缝克隆试剂盒。但是艾德莱生物也提醒您，如果您不能自己表达纯化生产这些酶降低成本，那么购买这些商品化酶DIY也会比较昂贵，不是发烧友，还是购买艾德莱生物（aidlab）帮您精心准备的CV1201SeamlessAssemblyandCloningkit。http://www.aidlab.cn/products1.asp?anclassid=91

   试剂盒单克隆抗体 试剂盒单克隆抗体批发价格、市场报价、厂家...123

   edymother2021-08-02

   我近期想开展此方面课题，急需抗体，请老师们指教，多谢！

   【求助】关于RNA干扰技术的问题 核酸基因技术123

   whitley2021-08-09

   各位大侠，俺正在准备用雪旺细胞做RNA干扰，但俺是个菜鸟，对此技术以及质粒克隆技术一窍不通，俺看了些资料，有些问题不太明白，请各位大侠不吝赐教：
   1、RNA干扰基因蛋白的表达的过程是瞬间的还是一步步的，需要一段时间才能使目的基因沉默。
   2、关于siRNA的合成，有好多种，但文献报道的一般是化学合成的和通过构建质粒表达载体完成的，但据俺了解，体外转录和RNA酶III酶切从时间上和价格上都比这两种方法好，为何这么多研究者青睐这两种方法呢
   3、俺打算用此方法研究某个基因的功能，想先进行体外实验，然后再进行在体实验，请教各位，用哪种方法比较好？
   4、如果用质粒的话，究竟用哪种质粒好呢？听说质粒比较昂贵，看到好多文献所用质粒都是惠赠的，怎么才能通过惠赠的方式获得质粒载体呢
   或许俺提的这些问题过于低级，恳切希望各位高手予以解答，不才万分感激！

   一种重组慢病毒载体,2019nCoV假病毒及其制备和应用123

   wanghm2008102021-07-29

   材料太大，上传受限，有需要的发消息给我。
   两对引物，两个PCR+线性化的·载体片段从引物设计到载体构建完成轻松一周搞定。

   【求助】知道某启动子序列用什么方法将其克隆出来? 实验方法 ...123

   zsm19842021-08-17

   rt 克隆启动子用哪种试剂盒好？
   
   GenomeWalkerTM Universal Kit价格多少，哪里有卖的？

   丁香客/whsky:病毒蚀斑克隆出现问题求助 采用6孔板接毒后,铺上低...123

   whsky2013-09-30

   
   采用6孔板接毒后，铺上低溶解度琼脂糖，第二天就出来了这些病变，正常细胞没有出现这种现象。
   按说空斑应该出现多个，但我的六孔板中一个空最多也就出现了2个空斑，也不像文献报道的那样规则，而且很大！
   由于没有做梯度稀释，会不会是接毒量过大造成的啊？请大侠指点，万分感谢！

   什么是RACE技术?采用RACE技术如何克隆得到基因的cDNA全长...123

   浪人TA421002021-09-02

   末端扩增技术包括5端扩增3端扩增般需要用含已知序列接通巢式PCR目产物克隆测序目基片段组装全通5端难度较3端