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ZYMO RESEARCH/Quick-DNA 96 Plus Kit/4 x 96 Preps/D4070
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4000-520-616
Highlights
- Extract high-quality DNA easily and reliably from any biological fluids, cultured/monolayer cells, or solid tissues.
- Zymo-Spin Technology ensures DNA is ready for all sensitive downstream applications such as qPCR, DNA-sequencing, arrays, and methylation analysis.
Description
| Elution Volume | ≤ 15 µl |
|---|---|
| Equipment | Water bath or heat block (55°C), microcentrifuge, and vortex. |
| Purity | High quality DNA is ready for all sensitive downstream applications such as PCR, endonuclease digestion, Southern blotting, genotyping, Next-Gen sequencing, bisulfite conversion, etc. (A260/A230≥ 2.0). |
| Size Range | Capable of recovering genomic and mitochondrial DNA sized fragments > 50 kb. If present, parasitic, microbial, and viral DNA will also be recovered. |
| Workflow | Utilize a Proteinase K Digestion and Zymo-Spin Column for effective recovery of DNA. |
| Yield | The DNA binding capacity of the well is 5 µg. Typically, mammalian tissues yield: 1-3 µg DNA per mg skeletal, heart, lung, and brain tissues and 3-5 µg DNA per mg liver and kidney. Human whole blood will yield 3-7 µg DNA per 100 µl blood sampled. |
Q1: Can I use Quick-DNA Plus to clean-up previously isolated DNA?
No, the kit is designed for direct use with biological samples. For clean-up of previously isolated DNA, please use the Genomic DNA Clean & Concentrator or the DNA Clean & Concentrator kits.
Q2: What are the expected yields for each sample type?
Keep in mind that there is sample to sample variability.
| Sample Type | Input Amount | Expected Yield |
|---|---|---|
| Eukaryotic Cells | 1x106 Cells | 5-6 µg |
| Skeletal, Heart, Lung, Brain Tissue | 1 mg | 1-3 µg |
| Liver and Kidney Tissue | 1 mg | 3-5 µg |
| Human Whole Blood | 100 µl | 5-7 µg |
Q3: I’m seeing some yield inconsistencies with my blood samples, what’s happening?
White blood cells, which are the major source of genomic DNA in blood, easily and quickly settles. Mix the blood sample well prior to aliquoting for purification.
Q4: Can Proteinase K digestion be performed overnight in DNA/RNA Shield?
Yes, samples can be digested overnight. Make sure to follow the appendix (page 8 appendix B) for processing liquids samples in DNA/RNA Shield and incubate at room temperature.
Q5: What is the difference between Quick-DNA and Quick-DNA Plus kits?
The Quick-DNA is optimized for cells, soft tissues, and homogenized/digested samples using a single lysis/binding buffer. The Quick-DNA Plus kits contain an optimized Proteinase K for processing a wider variety of sample inputs, such as cells, blood, tissues, etc. The upgraded Quick-DNA Plus recovers more DNA with higher purity compared to the Quick-DNA Kits.
Q6: Can the Quick-DNA Plus kit be used with bacterial samples?
E.coli cells are easy-to-lyse and can be processed directly with the Biological Fluids & Cells protocol. For an all-inclusive kit with any type of microbes (including tough-to-lyse), use any of Zymo Research’s Environmental Kits (e.g. Quick-DNA Fungal/Bacterial, Quick-DNA Fecal/Soil, ZymoBIOMICS DNA, etc.).
Q7: What is the difference between the digestion buffers? Can one buffer be used for all sample types?
The BioFluid & Cell Buffer (Red) is designed to allow for rapid Proteinase K digestion with easy-to-lyse samples (e.g. mammalian cells and biological fluids).The Solid Tissue buffer (Blue) can be used for any sample type and requires a longer PK digestion time compared to using the BioFluid & Cell Buffer (Red).
Q8: Can Quick-DNA process crude lysates?
Yes, add 4 volumes of Genomic Lysis Buffer to 1 volume of crude lysate, homogenized, or digested sample (see Cell Suspensions and Proteinase K Digested Samples) and proceed with the remainder of the protocol.
Q9: What is the purpose of adding beta-mercaptoethanol? Can this step be substituted or omitted?
Beta-mercaptoethanol is a reducing agent that helps break down proteins and improves DNA recovery and purity. Addition of beta-mercaptoethanol is recommended to enhance sample lysis, but can be substituted with dithiothreitol (DTT, final concentration of 10 mM) or omitted.
| Cat # | Name | Size | Price | |
|---|---|---|---|---|
| P1002-2 | 96-Well Block w/ Cover Foil | 2 Blocks/foils | $28.00 | |
| C2010 | Zymo-Spin I-96-XL Plates | 2 Plates | $257.00 | |
| C2007-4 | 96-Well Plate Cover Foil | 4 Foils | $10.00 | |
| C2007-2 | 96-Well Plate Cover Foil | 2 Foils | $10.00 | |
| C2003 | Elution Plate | 2 Plates | $19.00 | |
| C2002 | Collection Plate | 2 Plates | $22.00 | |
| D4068-3-85 | Genomic Binding Buffer | 85 ml | $95.00 | |
| D4068-2-10 | Solid Tissue Buffer (Blue) | 10 ml | $24.00 | |
| D4068-3-45 | Genomic Binding Buffer | 45 ml | $49.00 | |
| D4068-2-22 | Solid Tissue Buffer (Blue) | 22 ml | $38.00 | |
| D4068-1-12 | BioFluid & Cell Buffer (Red) | 12 ml | $24.00 | |
| D4068-1-25 | BioFluid & Cell Buffer (Red) | 25 ml | $38.00 | |
| D3004-5-50 | DNA Pre-Wash Buffer | 50 ml | $26.00 | |
| D3004-4-10 | DNA Elution Buffer | 10 ml | $14.00 | |
| D3004-2-50 | g-DNA Wash Buffer | 50 ml | $18.00 | |
| D3004-2-100 | g-DNA Wash Buffer | 100 ml | $30.00 |
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 。典型的真核生物转录因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域： DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列， 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游， 转录激... 查看更多
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2021-08-05
酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 。典型的真核生物转录因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域： DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列， 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游， 转录激... 查看更多
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2021-08-28
Genotyping Transgenic Rodents by PCR This is how we test mice and rats for the presence of the transgene by PCR. It is provided for those investigators who are 查看更多
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酵母双杂交系统载体是由深圳市伟通生物公司代理或销售的Stratagene品牌的试剂，产品来源于国外。深圳市伟通生物公司是中国最权威的酵母双杂交系统载体试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售酵母双杂交系统载体试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业酵母双杂交系统载体仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的酵母双杂交系统载体产品 查看更多
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2021-07-30
1.技术原理及背景介绍随着分子生物学研究尤其是人类基因组计划的迅速发展，为适应对众多基因或蛋白进行功能研究的发展趋势，已出现了很多新技术。其中酵母双杂交技术以其简便，灵敏，高效以及能反映不同蛋白质之间在活细胞内的相互作用等特点在基因功能的研究中得到了广泛的应用。 酵母双杂交系统的建立基于对真核生物调控转录起始过程的认识。酵母转录因子GAL4含两个结构域：DNA结合功能域和转录激活结构域，前者可识别DNA上的特异序列，并使转录激活结构... 查看更多
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2019-08-23
上海欧易生物医学科技有限公司在发布的酵母双杂交文库筛选-欧易生物供应信息，浏览与酵母双杂交文库筛选-欧易生物相关的产品或在搜索更多与酵母双杂交文库筛选-欧易生物相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
一 基因组酶切和电泳在200 μl 微量离心管中加入：25 μl DNA样品(约10μg)，3μl 限制性内切酶（MBI，10 U/ μl）5 μl 相应的10×buffer，补水到50μl。然后加一滴矿物油覆盖, 稍微离心后放于37℃水浴8-12小时。酶切完后，取5μl 酶切DNA样品于0.8%的琼脂糖凝胶上检测酶 查看更多
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2021-07-27
深圳市伟通生物科技有限公司在发布的酵母双杂交载体系统pGBKT7载体 pGADT7载体 pCL1载体 pGBKT7-53载体 pGADT7-T载体 pGBKT7-Lam载体 pACT2 AD载体 AH109菌株 pSos载体 pMyr载体 pSos MAFB载体供应信息，浏览与酵母双杂交载体系统pGBKT7载体 pGADT7载体 pCL1载体 pGBKT7-53载体 pGADT7-T载体 pGBKT7-Lam载体 pACT2 AD载体 AH109菌株 pSos载体 pMyr载体 pSos MAFB载体相关 查看更多
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2021-09-18
BacterioMatch 双杂交系统：在大肠杆菌中进行蛋白质相互作用分析,简便快速。CytoTrap 双杂交系统：酵母细胞质中检测蛋白相互作用,允许翻译后修饰和筛查转录激活因子/抑制因子HybriZAP 2.1酵母细胞核双杂交系统 ：采用l载体制备插入片段比率高，代表性好的cDNA/基因组文库，易于转化成质粒文库用 查看更多
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2021-08-31
蛋白组学研究是即基因组学研究后的生命科学发展的一个大方向之一。蛋白质的结构和功能最终直接影响着生命活动的变化，基因转录水平 查看更多
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2021-07-31
酵母双杂交系统是将待研究的两种蛋白质分别克隆（融合）到酵母表达质粒的转录激活因子（如GAL4等）的DNA结合结构域（DNA-BD）和转录激活域（AD）上，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。... 查看更多
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2019-12-16
广州爱丽斯生物科技有限公司在发布的细菌双杂交系统试剂盒（腺苷酸环化酶）供应信息，浏览与细菌双杂交系统试剂盒（腺苷酸环化酶）相关的产品或在搜索更多与细菌双杂交系统试剂盒（腺苷酸环化酶）相关的内容。 查看更多
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第18章_母双杂交系统.ppt123
冰凝莆扇HU2017-10-02
酵母双杂交营养缺陷培养基菌落提质粒
发展起各种双杂交系统Fields等建立系统基础些新系统主要报道基、诱饵表达载体及猎物表达载体等做些改进其重要改进引入额外报道基广泛采用HIS3基经改造带HIS3报道基酵母细胞HIS3启表达才能缺乏组氨酸选择性培养基HIS3报道基转录表达由诱饵猎物相互作用所启数双杂交系统往往同使用两甚至三报道基其 LacZ些改造基启区相同转录激结合位点相同转录激（述Gal4蛋白）激通种双重或重选择既提高检测灵敏度减少假阳性现象其针诱饵或猎物表达载体等所作改进详述
双杂交鉴定程要经两转化工作量相特别寻找新作用蛋白质候尤其且酵母细胞转化效率比细菌要低约4数量级转化步骤双杂交技术瓶颈Bendixen等通酵母接合型引用避免两转化操作同提高双杂交效率酵母性殖程涉及两种配合类型：a接合型α接合型两种单倍体间接合（mating）能形二倍体a接合型细胞间或α接合型细胞间能接合形二倍体根据酵母性殖特点文库质粒转化α接合型酵母细胞诱饵表达载体转化a接合型细胞别铺筛选平板使细胞菌苔（lawn）再两种菌苔复印同三重筛选平板原则诱饵靶蛋白发相互作用二倍体细胞才能平板单倍体细胞或虽二倍体细胞BD融合蛋白AD融合蛋白相互作用都淘汰克隆进步通β-半乳糖苷酶力进行鉴定项改进仅简化实验操作且提高双杂交筛选效率
发展起各种双杂交系统Fields等建立系统基础些新系统主要报道基、诱饵表达载体及猎物表达载体等做些改进其重要改进引入额外报道基广泛采用HIS3基经改造带HIS3报道基酵母细胞HIS3启表达才能缺乏组氨酸选择性培养基HIS3报道基转录表达由诱饵猎物相互作用所启数双杂交系统往往同使用两甚至三报道基其 LacZ些改造基启区相同转录激结合位点相同转录激（述Gal4蛋白）激通种双重或重选择既提高检测灵敏度减少假阳性现象其针诱饵或猎物表达载体等所作改进详述
双杂交鉴定程要经两转化工作量相特别寻找新作用蛋白质候尤其且酵母细胞转化效率比细菌要低约4数量级转化步骤双杂交技术瓶颈Bendixen等通酵母接合型引用避免两转化操作同提高双杂交效率酵母性殖程涉及两种配合类型：a接合型α接合型两种单倍体间接合（mating）能形二倍体a接合型细胞间或α接合型细胞间能接合形二倍体根据酵母性殖特点文库质粒转化α接合型酵母细胞诱饵表达载体转化a接合型细胞别铺筛选平板使细胞菌苔（lawn）再两种菌苔复印同三重筛选平板原则诱饵靶蛋白发相互作用二倍体细胞才能平板单倍体细胞或虽二倍体细胞BD融合蛋白AD融合蛋白相互作用都淘汰克隆进步通β-半乳糖苷酶力进行鉴定项改进仅简化实验操作且提高双杂交筛选效率
酵母双杂交,营养缺陷培养基长出菌落,但提质粒,没有_问答详情_...123
元大师2162017-10-02
酵母双杂交营养缺陷培养基菌落提质粒
发展起各种双杂交系统Fields等建立系统基础些新系统主要报道基、诱饵表达载体及猎物表达载体等做些改进其重要改进引入额外报道基广泛采用HIS3基经改造带HIS3报道基酵母细胞HIS3启表达才能缺乏组氨酸选择性培养基HIS3报道基转录表达由诱饵猎物相互作用所启数双杂交系统往往同使用两甚至三报道基其 LacZ些改造基启区相同转录激结合位点相同转录激（述Gal4蛋白）激通种双重或重选择既提高检测灵敏度减少假阳性现象其针诱饵或猎物表达载体等所作改进详述
双杂交鉴定程要经两转化工作量相特别寻找新作用蛋白质候尤其且酵母细胞转化效率比细菌要低约4数量级转化步骤双杂交技术瓶颈Bendixen等通酵母接合型引用避免两转化操作同提高双杂交效率酵母性殖程涉及两种配合类型：a接合型α接合型两种单倍体间接合（mating）能形二倍体a接合型细胞间或α接合型细胞间能接合形二倍体根据酵母性殖特点文库质粒转化α接合型酵母细胞诱饵表达载体转化a接合型细胞别铺筛选平板使细胞菌苔（lawn）再两种菌苔复印同三重筛选平板原则诱饵靶蛋白发相互作用二倍体细胞才能平板单倍体细胞或虽二倍体细胞BD融合蛋白AD融合蛋白相互作用都淘汰克隆进步通β-半乳糖苷酶力进行鉴定项改进仅简化实验操作且提高双杂交筛选效率
发展起各种双杂交系统Fields等建立系统基础些新系统主要报道基、诱饵表达载体及猎物表达载体等做些改进其重要改进引入额外报道基广泛采用HIS3基经改造带HIS3报道基酵母细胞HIS3启表达才能缺乏组氨酸选择性培养基HIS3报道基转录表达由诱饵猎物相互作用所启数双杂交系统往往同使用两甚至三报道基其 LacZ些改造基启区相同转录激结合位点相同转录激（述Gal4蛋白）激通种双重或重选择既提高检测灵敏度减少假阳性现象其针诱饵或猎物表达载体等所作改进详述
双杂交鉴定程要经两转化工作量相特别寻找新作用蛋白质候尤其且酵母细胞转化效率比细菌要低约4数量级转化步骤双杂交技术瓶颈Bendixen等通酵母接合型引用避免两转化操作同提高双杂交效率酵母性殖程涉及两种配合类型：a接合型α接合型两种单倍体间接合（mating）能形二倍体a接合型细胞间或α接合型细胞间能接合形二倍体根据酵母性殖特点文库质粒转化α接合型酵母细胞诱饵表达载体转化a接合型细胞别铺筛选平板使细胞菌苔（lawn）再两种菌苔复印同三重筛选平板原则诱饵靶蛋白发相互作用二倍体细胞才能平板单倍体细胞或虽二倍体细胞BD融合蛋白AD融合蛋白相互作用都淘汰克隆进步通β-半乳糖苷酶力进行鉴定项改进仅简化实验操作且提高双杂交筛选效率
酵母双杂交实验知多少?123
求是寻源2021-07-26
哪位老师使用过cytotrypstratagene双杂交酵母系统啊，我在使用这一系统时，其中的cdc25H酵母菌摇菌时总是突变．哪位老师帮我解答一下，万分感谢！！
酵母双杂交系统技术介绍 123
111222333a2021-07-25
有谁能介绍一下酵母双杂交系统吗？
谢了
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2、请在帖子前面注明帖子性质，如【求助】、【原创】、【分享】、【讨论】、【申请上传】、【下载】、【转帖】、【转载】、【信息】、【求购】、【公告】、【建议】等，以方便战友应助及版面管理！
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【】可以这样输入，智能ABC，输入“v1”，后翻3页，就可以看见了，或用紫光拼音中文输入法，输入方括号就是粗体的中括号，实在不行请复制本公告中【】
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【图文】酵母双杂交系统技术介绍123
bitebo2021-08-07
希望对从事相关科研工作的朋友有所帮助!
THEGFPTWO--HHYBRIDYBRIDSYSTEM.pdf(126.79k)
THEGFPTWO--HHYBRIDYBRIDSYSTEM.pdf(126.79k)
...Biotech”为您提供“全能型酵母双杂交系统和蛋白表达系统123
djyuanm2021-08-15
大家做膜蛋白双杂交用那家公司的系统？很急
用酵母双杂交或是细菌双杂交？
用酵母双杂交或是细菌双杂交？
【求助】求助clontech的酵母双杂交系统中文说明书_问答详情_双...123
蓝天璃2021-08-16
简述酵母双杂交系统的优缺点。_123
Kyoya18XQ72021-08-09
酵母双杂交系统析蛋白-蛋白间相互作用效快速 面应用 仍存些局限性⑴双杂交系统析蛋白间相互作用定位于细胞核内 许蛋白间相互作用依赖于翻译加工糖基化、二硫键形等 些反应核内进行另外些蛋白确折叠功能赖于其非酵母蛋白辅助 限制某些细胞外蛋白细胞膜受体蛋白等研究⑵酵母双杂交系统重要问题假阳性由于某些蛋白本身具激转录功能或酵母表达发挥转录激作用 使DNA结合结构域杂交蛋白特异激结构域情况激转录另外某些蛋白表面含种蛋白质低亲力区域 能与其蛋白形稳定复合物 引起报告基表达 产假阳性结
许研究者双杂交系统进行改进发展例采用假阳性显示析双筛选系统减少假阳性发；发展哺乳物双杂交系统更研究蛋白间相互作用其双筛选系统用二种同报告基（用lacZHIS3）优势vii：⑴ 用同启表达位于酵母二染色体报告基 明显减少假阳性⑵ 通营养型筛选增强筛选能力 尤其适用于较库容量选蛋白较少情况筛选
哺乳物双杂交系统Ⅷ种基水平重建转录功能基础体内析系统种兴趣蛋白与Gal4--DNA结合结构域构融合蛋白另种蛋白与单纯疱疹病毒VP16蛋白激结构域融合蛋白表达表达些融合蛋白载体与报道载体（CAT）共同转染哺乳物细胞系报道质粒含Gal4结合位点游cat基假两融合蛋白相互作用则cat报道基表达水平明显增高用系统证实P53蛋白与T抗原相互作用 酵母双杂交系统相同结且较酵母双杂交系统更快速转染48h内结并且哺乳物细胞能更模仿体内蛋白-蛋白相互作用哺乳物双杂交系统作酵母双杂交系统辅助手段图" class="ikqb_img_alink">
许研究者双杂交系统进行改进发展例采用假阳性显示析双筛选系统减少假阳性发；发展哺乳物双杂交系统更研究蛋白间相互作用其双筛选系统用二种同报告基（用lacZHIS3）优势vii：⑴ 用同启表达位于酵母二染色体报告基 明显减少假阳性⑵ 通营养型筛选增强筛选能力 尤其适用于较库容量选蛋白较少情况筛选
哺乳物双杂交系统Ⅷ种基水平重建转录功能基础体内析系统种兴趣蛋白与Gal4--DNA结合结构域构融合蛋白另种蛋白与单纯疱疹病毒VP16蛋白激结构域融合蛋白表达表达些融合蛋白载体与报道载体（CAT）共同转染哺乳物细胞系报道质粒含Gal4结合位点游cat基假两融合蛋白相互作用则cat报道基表达水平明显增高用系统证实P53蛋白与T抗原相互作用 酵母双杂交系统相同结且较酵母双杂交系统更快速转染48h内结并且哺乳物细胞能更模仿体内蛋白-蛋白相互作用哺乳物双杂交系统作酵母双杂交系统辅助手段图" class="ikqb_img_alink">
GAL4酵母双杂交系统学术百科知网空间123
mutton2021-08-18
谢谢!
GSTpulldown技术在蛋白质相互作用中的应用123
叶子5362017-10-02
、酵母双杂交系统：酵母双杂交系统前广泛用于蛋白质相互作用组研究种重要其原理靶蛋白诱饵蛋白特异结合诱饵蛋白结合于报道基启启报道基酵母细胞内表达检测报道基表达产物则说明两者间相互作用反则两者间没相互作用种技术微量化、阵列化则用于规模蛋白质间相互作用研究实际工作根据需要发展单杂交系统、三杂交系统反向杂交系统等Angermayr等设计SOS蛋白介导双杂交系统研究膜蛋白功能丰富酵母双杂交系统功能外酵母双杂交系统作用已扩展至蛋白质鉴定
二、噬菌体展示技术：编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
三、等离共振技术：表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
四、荧光能量转移技术：荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
五、抗体与蛋白质阵列技术：蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
六、免疫共沉淀技术：免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物：目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPAPansobinSPAPansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷：两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
七、pull-down技术：蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系
二、噬菌体展示技术：编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
三、等离共振技术：表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
四、荧光能量转移技术：荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
五、抗体与蛋白质阵列技术：蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
六、免疫共沉淀技术：免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物：目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPAPansobinSPAPansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷：两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
七、pull-down技术：蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系
怎样用生化手段证明一个蛋白是受体行业问答123
白诺大好人9302017-10-02
、酵母双杂交系统：酵母双杂交系统前广泛用于蛋白质相互作用组研究种重要其原理靶蛋白诱饵蛋白特异结合诱饵蛋白结合于报道基启启报道基酵母细胞内表达检测报道基表达产物则说明两者间相互作用反则两者间没相互作用种技术微量化、阵列化则用于规模蛋白质间相互作用研究实际工作根据需要发展单杂交系统、三杂交系统反向杂交系统等Angermayr等设计SOS蛋白介导双杂交系统研究膜蛋白功能丰富酵母双杂交系统功能外酵母双杂交系统作用已扩展至蛋白质鉴定
二、噬菌体展示技术：编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
三、等离共振技术：表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
四、荧光能量转移技术：荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
五、抗体与蛋白质阵列技术：蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
六、免疫共沉淀技术：免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物：目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|PansobinSPA|Pansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷：两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
七、pull-down技术：蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系
二、噬菌体展示技术：编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
三、等离共振技术：表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
四、荧光能量转移技术：荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
五、抗体与蛋白质阵列技术：蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
六、免疫共沉淀技术：免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物：目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|PansobinSPA|Pansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷：两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
七、pull-down技术：蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系
想知道酵母双杂交到底咋回事啊,看了半天书,晕,希望能用简单明了...123
hwb_bwh2021-08-13
酵母双杂交系统到底是啥回事？有啥用?
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