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Gentarget/h ADCK1 inducible lentiviral particles/LVP116/1 Ea
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Gentarget
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Pre-madeinducIBLelentiviralparticlesforexpressinghumantarget:ADCK1(alternativename:aarFdomaincontainingkinase1),100%matchedtoCDSregioninNCBIID:NM_020421.

FullsequenceverifiedtargetisnativelyexpressedunderatetracyclineinduciblesuCMVpromoter.Ablasticidin-RFPfusionMarkerunderRSVpromoter,allowstosortorselecttransducedcellsforlongtermexpressionviaRFPsignalorviablasticidinantibiotic(Dualmarkers).RFPsignalprovidesaconvenient,realtimemonitoringtheparticlesperformance.Eachparticleswasvalidatedinlotbylotbasisandtargetexpressionisguaranteed.Particleswerepackagedinserum-freesolutioncontainingnoanyhumanoranimalorigincomponents.Seeproductmanualfordetails(.pdf).

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大规模酵母双杂交筛选 来源: 查看手机网址扫一扫!扫一扫! ... 查看更多>
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酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。大量的研究文献表明,酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作,也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的互作。因此,它在许多的研究领域中有着广泛的应用。 查看更多>
随着对多种重要生物的大规模基因组测序工作的完成,基因工程领域又迎来了一个新的时代---功能基因组时代。它的任务就是对基因组中包含的全部基因的功能加以认识。生物体系的运作与蛋白质之间的互作密不可分,例如:DNA合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程均涉及到蛋白质复合体的作用。能够发现和验证在生物体中相互作用的蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质是认识它们生物学功能的第一步。酵母双杂交技术作 ... 查看更多>
武汉金开瑞生物工程有限公司在发布的酵母单/双杂交供应信息,浏览与酵母单/双杂交相关的产品或在搜索更多与酵母单/双杂交相关的内容。 查看更多>
质粒pLexA的筛选标志为HIS3,在双杂交系统中用于表达DNA-BD(202个氨基酸残基组成的LexA蛋白)与目标蛋白(钓饵,Bait)的融合蛋白,该融合体的表达受酵母强启动子ADH1的调控,选择与报告基因的操纵子LexA×8结合。质粒pB42AD的筛选标志为TRP1,在其供外源基因插入的多克隆位点(EcoR I与Xho I)上游,含有SV40核定位(SV40 nuclear localization)、HA(血凝素)及AD(来自于E 查看更多>
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蛋白组学研究是即基因组学研究后的生命科学发展的一个大方向之一。蛋白质的结构和功能最终直接影响着生命活动的变化,基因转录水平 查看更多>
酵母整合型质粒是不能再染色体外能够进行自主复制的遗传单位,必须整合到酵母染色体上才能进行复制。... 查看更多>
DNA from Tail Biopsies1. Remove 0.5 cm of tail into polypropylene microfuge tube (do not mince).(The tubes must have tight-fitting caps, so that there are no l 查看更多>
酵母双杂交实验常见问题分析及处理方法在某些情况下,国产ELISA试剂盒在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板,在30℃下温浴,直至平板上的克隆相互粘在一起。用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆,并收集到一管中,这样就可以使用这个细胞重悬液进行正常的杂交反应。如 查看更多>
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transcriptional activation
词典
转录激

双语例句
1
Transcriptional activation and repression regulation in target gene by thyroid hormone receptors
甲状腺激素受体调节靶基转录激抑制作用

2
Objective: To assay the transcriptional activation effect of prohibitin in yeast two hybrid system.
目:检测抗增殖蛋白酵母双杂交系统否具转录自激作用
大肠杆菌双杂交系统 123
wangshui2021-07-21
大肠杆菌双杂交系统,作为一种新型的研究蛋白质相互作用的方法,近年来得到了快速的发展。大肠杆菌双杂交系统是继酵母双杂交系统和哺乳动物细胞双杂交系统之后,产生的另一种直接于细胞内检测蛋白与蛋白相互作用的遗传学新方法。近几年来,该系统得到了飞速的发展,逐渐走向成熟并运用到了许多领域。文章详细介绍了该系统的特点、原理及发展现状等。

http://www.biotech.org.cn/news/news/file/20060417084144.pdf
我现在正在进行酵母双杂交实验.在做自激活检测时,发现SC-ura-trp-his的平板具有自激活效应,但是选择用SC-ura-trp-ade的平板进行酵母双杂筛选时,由于平板过于严苛,而没能筛选到转化子;现在想用添加3-AT作为抑制剂的SC-ura-trp-his平板进行筛选,现在想请实验高手们给予指导,3-AT的浓度为多少比较适宜???谢谢大家!:)
怎样查一个蛋白的受体123
红颜17272017-10-02
、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统前广泛用于蛋白质相互作用组研究种重要其原理靶蛋白诱饵蛋白特异结合诱饵蛋白结合于报道基启启报道基酵母细胞内表达检测报道基表达产物则说明两者间相互作用反则两者间没相互作用种技术微量化、阵列化则用于规模蛋白质间相互作用研究实际工作根据需要发展单杂交系统、三杂交系统反向杂交系统等Angermayr等设计SOS蛋白介导双杂交系统研究膜蛋白功能丰富酵母双杂交系统功能外酵母双杂交系统作用已扩展至蛋白质鉴定
二、噬菌体展示技术:编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
三、等离共振技术:表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
四、荧光能量转移技术:荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
五、抗体与蛋白质阵列技术:蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
六、免疫共沉淀技术:免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物:目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|PansobinSPA|Pansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷:两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
七、pull-down技术:蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系
本人学生狗,要做CDNA文库构建,买了clontech的酵母双杂交系统但是没有中文说明书,**大神给一个中文的说明书

630489MatchmakerGoldYeastTwo-HybridSystemUs.pdf(1780.44k)
酵母双杂交x gal培养基加入aba
  发展起各种双杂交系统Fields等建立系统基础些新系统主要报道基、诱饵表达载体及猎物表达载体等做些改进其重要改进引入额外报道基广泛采用HIS3基经改造带HIS3报道基酵母细胞HIS3启表达才能缺乏组氨酸选择性培养基HIS3报道基转录表达由诱饵猎物相互作用所启数双杂交系统往往同使用两甚至三报道基其 LacZ些改造基启区相同转录激结合位点相同转录激(述Gal4蛋白)激通种双重或重选择既提高检测灵敏度减少假阳性现象其针诱饵或猎物表达载体等所作改进详述
  双杂交鉴定程要经两转化工作量相特别寻找新作用蛋白质候尤其且酵母细胞转化效率比细菌要低约4数量级转化步骤双杂交技术瓶颈Bendixen等通酵母接合型引用避免两转化操作同提高双杂交效率酵母性殖程涉及两种配合类型:a接合型α接合型两种单倍体间接合(mating)能形二倍体a接合型细胞间或α接合型细胞间能接合形二倍体根据酵母性殖特点文库质粒转化α接合型酵母细胞诱饵表达载体转化a接合型细胞别铺筛选平板使细胞菌苔(lawn)再两种菌苔复印同三重筛选平板原则诱饵靶蛋白发相互作用二倍体细胞才能平板单倍体细胞或虽二倍体细胞BD融合蛋白AD融合蛋白相互作用都淘汰克隆进步通β-半乳糖苷酶力进行鉴定项改进仅简化实验操作且提高双杂交筛选效率
大家做膜蛋白双杂交用那家公司的系统?很急
用酵母双杂交或是细菌双杂交?
在传统的酵母双杂交系统中,蛋白质需要入核发生相互作用,才能激活报道基因表达;因此对于发生在细胞质中或者细胞膜上的蛋白质相互作用是检测不到的。最近几年开发出了一种细胞质的酵母双杂交系统,与传统的基于转录因子GAL4或者LexA的方法不同,细胞质双杂交是在Ras途径的基础上建立的。如StratageneCytoTrapTM双杂交系统。可以参考链接http://www.ebiotrade.com/emgzf/genenews2005/gene26.htm

最近本人在做一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的酵母双杂交,想吊出它的互作基因,前段时间用Invitrogen的PROQUESTTWO-HYBRIDSYSTEM筛过一次库,没有得到任何阳性克隆,我估计是连入载体的基因太长有3KB多,1000多个氨基酸,可能就算表达出来了也不能行使正常功能。随后取了蛋白的激酶区1.8KB,想重新筛一次库(还未开始重筛)。后来老板的建议是要我试试酵母细胞质双杂交系统,因为在生物体内,我所研究的蛋白是在细胞质中表达的,可能在酵母细胞核中也不能正常工作(猜测)。
这两天我查了查,发现细胞质的双杂交完全不同,要是做的话还有重新购买另外的试剂盒,重新构建文库
还有一点就是,前人发表的文章,同样是做我这种蛋白激酶的,都是用传统的酵母双杂交系统筛选到互作蛋白的,如果情况是这样的话我是否还有必要尝试细胞质的双杂交呢?
还是等我做了激酶区的筛库之后再说?
请各位帮忙看看,谢谢。
希望对从事相关科研工作的朋友有所帮助!

THEGFPTWO--HHYBRIDYBRIDSYSTEM.pdf(126.79k)
1.待测基与Gal4或LexA或其合适蛋白DNA结合域融合构建诱饵质粒;
2.诱饵质粒转化缺乏报告基启酵母细胞株选择转化酵母;
3.再文库质粒转化酵母;
4.通报告基功能筛选相互作用蛋白图" class="ikqb_img_alink">
、酵母双杂交系统:酵母双杂交系统前广泛用于蛋白质相互作用组研究种重要其原理靶蛋白诱饵蛋白特异结合诱饵蛋白结合于报道基启启报道基酵母细胞内表达检测报道基表达产物则说明两者间相互作用反则两者间没相互作用种技术微量化、阵列化则用于规模蛋白质间相互作用研究实际工作根据需要发展单杂交系统、三杂交系统反向杂交系统等Angermayr等设计SOS蛋白介导双杂交系统研究膜蛋白功能丰富酵母双杂交系统功能外酵母双杂交系统作用已扩展至蛋白质鉴定
  二、噬菌体展示技术:编码噬菌体外壳蛋白基连接单克隆抗体DNA序列噬菌体表面表达相应单抗再噬菌体柱柱若含目蛋白与相应抗体特异性结合称噬菌体展示技术技术主要用于研究蛋白质间相互作用仅高通量及简便特点具直接基、高选择性筛选复杂混合物、筛选程通适改变条件直接评价相互结合特异性等优点目前用优化噬菌体展示技术已经展示鼠两种特殊细胞系cdna文库并离皮信号传导途径信号
  三、等离共振技术:表面等离共振技术(Surface Plasmon ResonanceSPR)已蛋白质相互作用研究新手段原理利用种纳米级薄膜吸附诱饵蛋白待测蛋白与诱饵蛋白结合薄膜共振性质发改变通检测便知两种蛋白结合情况SPR技术优点需标记物或染料反应程实监控测定快速且安全用于检测蛋白核酸及其物间相互作用
  四、荧光能量转移技术:荧光共振能量转移(FRET )广泛用于研究间距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合定量获取关物体内蛋白质、脂类、DNA RNA 空信息随着绿色荧光蛋白(GFP)发展FRET 荧光显微镜能实测量体细胞内态性质提种定量测量FRET效率及供体与受体间距离简单仅需使用组滤光片测量比值利用供体受体发射谱消除光谱间串扰该简单快速实定量测量FRET 效率供体与受体间距离尤其适用于基于GFP 供体受体
  五、抗体与蛋白质阵列技术:蛋白芯片技术现给蛋白质组研究带新思路蛋白质组研究主要内容研究同理状态蛋白水平量变微型化集化高通量化抗体芯片非研究工具芯片发展快芯片且技术已经益熟些抗体芯片已经向临床应用发展比肿瘤标志物抗体芯片等已经应用再眼各领域
  六、免疫共沉淀技术:免疫共沉淀主要用研究蛋白质与蛋白质相互作用种技术其基本原理细胞裂解液加入抗兴趣蛋白抗体孵育再加入与抗体特异结合结合于Pansobin珠金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)若细胞与兴趣蛋白结合目蛋白形种复合物:目蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA|PansobinSPA|Pansobin比较复合物离离经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳复合物四组经Western blotting用抗体检测目蛋白否预测蛋白种目蛋白细胞内与兴趣蛋白结合符合体内实际情况蛋白信度高种两缺陷:两种蛋白质结合能直接结合能第三者间起桥梁作用;二必须实验前预测目蛋白选择检测抗体所若预测确实验结本身具冒险性
  七、pull-down技术:蛋白质相互作用类型牢固型相互作用暂型相互作用两种牢固型相互作用亚基蛋白复合体见通免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western研究Pull-down技术用固相化、已标记饵蛋白或标签蛋白(物素-、PolyHis-或GST-)细胞裂解液钓与相互作用蛋白通Pull-down技术确定已知蛋白与钓蛋白或已纯化相关蛋白间相互作用关系体外传路或翻译体系检测蛋白相互作用关系