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Addgene/pGP-AAV-syn-FLEX-jGCaMP7c variant 1513-WPRE/1unit/105322-AAV1
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| Item | Catalog # | Description | Quantity | Price (USD) | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Plasmid | 105322 | Standard format: Plasmid sent in bacteria as agar stab | 1 | $75 | Add to Cart | |
| AAV1 | 105322-AAV1 | 100 µL at titer ≥ 7×10¹² vg/mLand Plasmid.More Information | Add to Cart | |||
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Backbone
- Vector backboneAAV-Syn-FLEX(Search Vector Database)
- Backbone manufacturerScott Sternson
- Backbone sizew/o insert(bp)4894
- Total vector size (bp)6247
- Vector typeMammalian Expression, AAV, Cre/Lox
Growth in Bacteria
- Bacterial Resistance(s)Ampicillin
- Growth Temperature30°C
- Growth Strain(s)NEB Stable
- Copy numberLow Copy
Gene/Insert
- Gene/Insert namejGCaMP7c variant 1513
- Alt nameGCaMP3-L59Q E60P T302L R303P M378G K379S D380Y T381R R392G T412N
- Alt nameGCaMP3 variant 1513
- Alt nameJanelia GCaMP7
- SpeciesR. norvegicus (rat), G. gallus (chicken); A. victoria (jellyfish)
- Insert Size (bp)1353
- PromoterSynapsin
- Tag/ Fusion Protein
- T7 epitope, Xpress tag, 6xHis
Cloning Information
- Cloning methodRestriction Enzyme
- 5′ cloning siteBsmBI(destroyed during cloning)
- 3′ cloning siteBsmBI(destroyed during cloning)
- 5′ sequencing primerACCACGCGAGGCGCGAGATAG (Common Sequencing Primers)
Resource Information
- Terms and Licenses
- UBMTA
- Ancillary Agreement for Plasmids Containing FP Materials
- genOway Notice of RIghts
- Industry Terms
- Not Available to Industry
Information for AAV1 (Catalog # 105322-AAV1)(Back to top)
Purpose
Ready-to-use AAV1 particles produced from pGP-AAV-syn-FLEX-jGCaMP7c variant 1513-WPRE (#105322). In addition to the viral particles, you will also receive purified pGP-AAV-syn-FLEX-jGCaMP7c variant 1513-WPRE plasmid DNA.
Synapsin-driven, Cre-dependent jGCaMP7c expression. jGCaMP7c exhibits high contrast between peak fluorescence and resting fluorescence.It is useful for activity imaging of large populations of densely-labeled neurons because background fluorescence from inactive neurons is reduced. These AAV preparations are suitable purity for injection into animals.Delivery
- Volume100 µL
- Titer≥ 7×10¹² vg/mL
- Pricing$350 USD for preparation of 100 µL virus + $30 USD for plasmid.
- StorageStore at -80℃. Thaw just before use and keep on ice.
- ShipmentViral particles are shipped frozen on dry ice. Plasmid DNA (≥ 200ng) will also be included in the shipment.
Viral Production & Use
- Packaging Plasmidsencode adenoviral helper sequences and AAV rep gene, AAV1 cap gene
- BufferPBS + 0.001% Pluronic F-68 + 200 mM NaCl
- SerotypeAAV1
- PurificationIodixanol gradient ultracentrifugation
Biosafety
Requestor is responsible for compliance withtheir institution"s biosafety regulations.Lentivirus is generally considered BSL-2. AAV isgenerally considered BSL-1, but may requireBSL-2 handling depending on the insert.Biosafety Guide
Resource Information
- Terms and Licenses
- Ancillary Agreement for Penn Vectors
- Terms of Use for Viral Vectors
- Industry Terms
- Not Available to Industry
Viral Quality Control
Quality Control:
- Addgene ensures high quality viral vectors by optimizing and standardizing production protocols and performing rigorous quality control (QC) (see a list of our QC assays). Thespecific QC assays performed varies for each viral lot. To learn which specific QC assays were performed on your lot, please contact us.
- Titer: the exact titer of your sample will be reported on the tube. The titer you see listed on this page is the guaranteed minimum titer. See how titers are measured.
Visit our viral production page for moreinformation.
Addgene Comments
Using FLEX vectors in vivo: LoxP sites in FLEX plasmids are known to recombine during DNA amplification and viral vector production, which may result in a minority of Cre-activated (i.e., "flipped") viral vectors. Addgene has measured this occurs in 0.01-0.03% of viral vectors in our typical production protocol. This can lead to a small number of cells exhibiting Cre-independent transgene expression in vivo. To address this, we recommend titrating to find the optimal AAV dosage required for Cre-dependent transgene expression and function in vivo. This may include reducing the viral vector dosage in order to reduce the likelihood of Cre-independent expression.
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
蚂蚁淘承诺
正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购： 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
鼎昊源V9648高通量组织研磨仪 包邮免费试用啦! 试用申请时间： 2018年10月08日—10月... 查看更多
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2021-08-21
上海艾研生物科技有限公司专业供应销售艾本德Thermomixer F2.0混匀仪系列产品，公司具有良好的市场信誉，专业的销售和技术服务团队,凭着经营艾本德Thermomixer F2.0混匀仪系列多年经验，熟悉并了解艾本德Thermomixer F2.0混匀仪系列市场行情，迎得了国内外厂商的认可，欢迎来电来涵洽谈交流！ 查看更多
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2021-07-16
产品介绍RH-18+ 3D旋转混合仪 RH-18系列3D旋转混合仪是一款设计独特的仪器，可通过水平、垂直或任意角度的旋转对各种样品管内的样品进行混合。通过对旋转面板的调整，可以使产品水平或垂直或介于两者之间的角度旋转，广泛应用于分子杂交、血 查看更多
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2021-09-18
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2021-09-20
HD-2500多管漩涡混合仪是由上海朗赋实业有限公司代理或销售的BIORISE品牌的仪器，产品来源于上海。上海朗赋实业有限公司是中国最权威的HD-2500多管漩涡混合仪销售服务商之一，在上海等地方销售HD-2500多管漩涡混合仪已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业HD-2500多管漩涡混合仪仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的HD-2500多管漩涡混合仪产品 查看更多
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2021-09-04
产品介绍拍打式均质器 ●拍打式均质器又称无菌均质器，可以从固体样品中直接提取细菌。只需将原始样品（大的需要剪成约10×10mm 块状）和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中，经过叶片的拍打锤击产生压力、引起振荡、加速 查看更多
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上海净信实业发展有限公司（上海净信实验设备科技部）是一家专业从事生命科学仪器和试剂研发、生产销售及服务的高新技术企业，公司位于上海紫竹科学园区.。 查看更多
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2017-04-06
医流商城提供净信超声波细胞粉碎机JY96-IIN功能全，外观美，性能可靠报价、参数、图片、特点、咨询等有效信息,100%正品保证,是您网上购买净信超声波细胞粉碎机JY96-IIN功能全，外观美，性能可靠的放心平台 查看更多
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2021-08-12
DF-II集热式磁力搅拌器 多功能型DF-II集热式恒温磁力加热搅拌器（可以干烧、可以油浴、可以水浴恒温搅拌）集热式磁力搅拌器结构合理，选材优良，经过技术人员的不断改进，从根本上解决了关于球形烧瓶进行真空反应，加压反应的长时间搅拌，加热恒温的问题，可以水、油、干烧多用，分指针式和数显式两种。本机采用了集热式加热法，被加热溶液完全处于均匀强烈的热辐射中，加热速度快，节省能源。配置优质磁钢与聚四氟搅拌子，更经久耐用，深受广大用户的好评。一、... 查看更多
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2016-11-17
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常见问题
蚂蚁淘所售产品均为正品吗？
蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
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商品咨询
高压均质机与胶体磨的区别123
群群我爱你0媧2021-08-02
没有本质性的区别，只是厂家起的名字不一样。样品前处理的过程中用来分解样品的。
人民医院医疗设备招标公告123
未成年QI062017-11-01
由信号发生器来产生一个特定频率的信号，这个特定频率就是换能器的频率，一般应用在超声波设备中的超声波频率为20KHz、25KHz、28KHz、33KHz、40KHz、60KHz。
换能器组件
换能器组件主要由换能器和变幅杆组成。
隔音箱
可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音，保持实验室安静。
超声波细胞破碎仪在我国的行业推广已进入成熟阶段，而应用仍不够普及!该仪器(设备)应用范围非常广泛，这是其它仪器设备所不能比拟的。也正因如此，该仪器(设备)的市场潜力很大，所以生产厂家也日趋增多，这也同时造成了超声清洗行业及市场的相对混乱，可以用八个字来形容“鱼龙混杂，良莠不齐”!把超声波细胞破碎仪进行分类。
换能器组件
换能器组件主要由换能器和变幅杆组成。
隔音箱
可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音，保持实验室安静。
超声波细胞破碎仪在我国的行业推广已进入成熟阶段，而应用仍不够普及!该仪器(设备)应用范围非常广泛，这是其它仪器设备所不能比拟的。也正因如此，该仪器(设备)的市场潜力很大，所以生产厂家也日趋增多，这也同时造成了超声清洗行业及市场的相对混乱，可以用八个字来形容“鱼龙混杂，良莠不齐”!把超声波细胞破碎仪进行分类。
旋转蒸发仪|旋转蒸发器|蒸馏水器|上海亚荣123
恐高的风筝2017-03-01
想浓缩反应产物，溶剂两种以上，可不可以用旋蒸？把温度调到接近沸点最高的溶剂的温度，沸点低的会不会沸腾？
【求助/交流】旋转蒸发仪 生物科学论坛学术科研互动平台123
胡珍2012-07-19
我用旋转蒸发仪水提复方中药制剂，但是我没法定量啊，查文献说是浓缩至每ml相当于0.1g的药材，这是个什么概念呢？请各位战友友情赐教，非常感谢！
人白介素5(IL5)检测试剂盒(ELISA方法)说明书分析方法...123
caoling6666662021-08-19
交联实验验证细胞中两个蛋白之间的相互作用，交联剂应用之后，电泳之前样本要怎样处理？是否需要超声破碎仪处理细胞？超声处理会不会破坏蛋白二聚体？
磁力搅拌器的结构和工作原理123
枫岛HO10172017-10-03
(1)磁力搅拌器的基本工作原理
用一个微型电动机驱动一块磁钢转动，利用磁钢转动所产生的旋转磁场带动搅拌器托盘上玻璃容器内的搅拌转子转动，从而达到搅拌溶液的目的。
(2)磁力搅拌器的结构
磁力搅拌器是由电动机、磁钢、搅拌转子、搅拌器托盘、调运装置等部分组成的。金属托盘用丁放置化学电池，此外没有用于夹持测量电极和参比电极的电极架。托盘下安装一块永久磁钢，连接在电动机的转动轴L，电动机的旋转带动永久磁钢旋转，利用其磁力吸引搅拌转于旋转，从而起到搅拌作用。如果磁力搅拌器具有加热功能，则还具有电阻加热丝和云母绝缘层。搅拌转于也称磁于p通常是用玻璃管或塑料管密封的小铁棒(避免与溶液起反应)，搅拌转子随磁钢转动而转动。面板装配有调速旋钮、控温加热开关、指不灯等，以实现接通电源、控制磁钢转动和加热的目的。
参考资料:Hi.baidu/=。www.jingda17.net。DI
用一个微型电动机驱动一块磁钢转动，利用磁钢转动所产生的旋转磁场带动搅拌器托盘上玻璃容器内的搅拌转子转动，从而达到搅拌溶液的目的。
(2)磁力搅拌器的结构
磁力搅拌器是由电动机、磁钢、搅拌转子、搅拌器托盘、调运装置等部分组成的。金属托盘用丁放置化学电池，此外没有用于夹持测量电极和参比电极的电极架。托盘下安装一块永久磁钢，连接在电动机的转动轴L，电动机的旋转带动永久磁钢旋转，利用其磁力吸引搅拌转于旋转，从而起到搅拌作用。如果磁力搅拌器具有加热功能，则还具有电阻加热丝和云母绝缘层。搅拌转于也称磁于p通常是用玻璃管或塑料管密封的小铁棒(避免与溶液起反应)，搅拌转子随磁钢转动而转动。面板装配有调速旋钮、控温加热开关、指不灯等，以实现接通电源、控制磁钢转动和加热的目的。
参考资料:Hi.baidu/=。www.jingda17.net。DI
【资源】(分享学习)超声波破碎细胞的原理及超声细胞破碎仪的用途 ...123
lrb20012021-08-23
超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用，能引起生物体的功能和结构发生变化，即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热（42-43℃），因为正常组织的临界致死温度为45.7℃，而肿瘤组织比正常组织敏感性高，故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍，DNA、RNA、蛋白质合成受到影响，从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡，使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外，空化泡破裂时产生瞬时高温（约5000℃）、高压（可达500×104Pa），可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。
超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质(如水)而变成一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小***一样的能量，从而起到破碎细胞等物质的作用(俗称“空化效应”)。
超声波细胞粉碎机是利用一种超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途的仪器；它能用于各种动植物细胞、病毒细胞、细菌及组织的破碎，也可用于各类无机物质的破碎重组，同时可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡清洗及加速化学反应等。超声波细胞粉碎机有广泛的用途，如:
1、超声波提取生物纳米（超声波化学合成法）
超声波化学反应中，起关键作用的是声波的空化效应，在超声波的辐照过程中，在液体里将发生空化气泡的形成，长大和崩灭，当空化气泡崩灭时产生一个覆盖着的强压力脉冲，产生许多独特的性质，例如产生高达5000K的高温，大于200Mpa的压力，这就是超声波化学合成的能量来源，利用这些能量能在一些特殊粉末表面合成出纳米粒子。
2、超声波制药（1）注射用医药物质的分散——将磷脂类与胆固醇混合用适当方法与药物混合在水溶液中，经超声分散，可以得到更小粒子供静脉注射。
（2）草药提取——利用超声分散破坏植物组织，加速溶剂穿透组织作用，提高中草药有效成分提取率。如金鸡纳树皮中全部生物碱用一般方法侵出需5小时以上，采用超声分散只要半小时即可完成。
（3）制备混悬剂——在超声空化和强烈搅拌下，将一种固体药物分散在含有表面活性剂的水溶液中，可以形成1um左右口服或静脉注射混悬剂。例“静注喜树碱混悬剂”“肝脏造影剂”、“硫酸钡混悬剂”。
（4）制备疫苗——将细胞或病菌借助于超声分散将其杀死以后，再用适当方法制成疫苗。
3、超声波对化妆品的分散
为了更进一步提取药物精华和粒子微细化，并节约生产成本，达到分散、乳化效果，使化妆品更深入渗透到肌肤里层，让肌肤很好的吸收，发挥药物的效力和作用，采用超声波乳化可达到非常理想的效果。采用超声分散，则不需要使用乳化剂，就能使蜡及石蜡乳化、化妆水等油的微粒子分散。石腊在水中分散的粒子直径可达1um以下。
4、超声波对酒的醇化—催陈技术
一瓶美酒以它的酒味醇厚，绵软柔和、芳香浓郁为人青睐，人们常用陈年老酒来形容酒的珍贵，一瓶上世纪的陈酒，标价几万元，其价格的含义在于时间的存放上。酒的主要控制因素是化学变化即酸的形成，并进一步酯化，酯参与乙醇和水的缔合。刚出厂的酒含有戍醇，有辛辣味，这种气味要经过很长时间才能化解，这个缓慢变化称酒的醇化。用功率1.6KW，频率17.5-22KHZ的超声波处理5-10min，可使酒的老熟时间缩短1/3到1/2。
因此超声波细胞粉碎机可以并且已经被广泛用于生物化学、微生物学药理学、物理学、动物学、农学、医学、制药等领域的教学、科研、生产。
超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质(如水)而变成一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小***一样的能量，从而起到破碎细胞等物质的作用(俗称“空化效应”)。
超声波细胞粉碎机是利用一种超声波在液体中产生空化效应的多功能、多用途的仪器；它能用于各种动植物细胞、病毒细胞、细菌及组织的破碎，也可用于各类无机物质的破碎重组，同时可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡清洗及加速化学反应等。超声波细胞粉碎机有广泛的用途，如:
1、超声波提取生物纳米（超声波化学合成法）
超声波化学反应中，起关键作用的是声波的空化效应，在超声波的辐照过程中，在液体里将发生空化气泡的形成，长大和崩灭，当空化气泡崩灭时产生一个覆盖着的强压力脉冲，产生许多独特的性质，例如产生高达5000K的高温，大于200Mpa的压力，这就是超声波化学合成的能量来源，利用这些能量能在一些特殊粉末表面合成出纳米粒子。
2、超声波制药（1）注射用医药物质的分散——将磷脂类与胆固醇混合用适当方法与药物混合在水溶液中，经超声分散，可以得到更小粒子供静脉注射。
（2）草药提取——利用超声分散破坏植物组织，加速溶剂穿透组织作用，提高中草药有效成分提取率。如金鸡纳树皮中全部生物碱用一般方法侵出需5小时以上，采用超声分散只要半小时即可完成。
（3）制备混悬剂——在超声空化和强烈搅拌下，将一种固体药物分散在含有表面活性剂的水溶液中，可以形成1um左右口服或静脉注射混悬剂。例“静注喜树碱混悬剂”“肝脏造影剂”、“硫酸钡混悬剂”。
（4）制备疫苗——将细胞或病菌借助于超声分散将其杀死以后，再用适当方法制成疫苗。
3、超声波对化妆品的分散
为了更进一步提取药物精华和粒子微细化，并节约生产成本，达到分散、乳化效果，使化妆品更深入渗透到肌肤里层，让肌肤很好的吸收，发挥药物的效力和作用，采用超声波乳化可达到非常理想的效果。采用超声分散，则不需要使用乳化剂，就能使蜡及石蜡乳化、化妆水等油的微粒子分散。石腊在水中分散的粒子直径可达1um以下。
4、超声波对酒的醇化—催陈技术
一瓶美酒以它的酒味醇厚，绵软柔和、芳香浓郁为人青睐，人们常用陈年老酒来形容酒的珍贵，一瓶上世纪的陈酒，标价几万元，其价格的含义在于时间的存放上。酒的主要控制因素是化学变化即酸的形成，并进一步酯化，酯参与乙醇和水的缔合。刚出厂的酒含有戍醇，有辛辣味，这种气味要经过很长时间才能化解，这个缓慢变化称酒的醇化。用功率1.6KW，频率17.5-22KHZ的超声波处理5-10min，可使酒的老熟时间缩短1/3到1/2。
因此超声波细胞粉碎机可以并且已经被广泛用于生物化学、微生物学药理学、物理学、动物学、农学、医学、制药等领域的教学、科研、生产。
Guess Doodles 安卓下载 | 好玩安卓网123
xinancaoldh2021-07-31
我不下心把旋转蒸发仪的收集器的瓶口打碎了（只是一个小口）！我用粘玻璃的胶粘上了，可是现在有点漏气，液体总是蒸发不下来，郁闷！！
请问有什么方法可以不漏气呢？
谢谢大家！！
请问有什么方法可以不漏气呢？
谢谢大家！！
涡旋振荡器排行榜 123
zxqalisa2017-10-21
基本上一样，区别在于售前售后 的服务如何！
推荐一个给你吧《比朗商城》
百度搜索一下！ 服务不错的！
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【求助】从血块中提取DNA前研磨器要用次氯酸钠浸泡吗?_问答...123
wss12345_02021-07-21
从血块中提取DNA前研磨器要用次氯酸钠浸泡吗？要用多大的浓度，有效氯要多少合适，要泡多久？？？？次氯酸钠启什么作用？？
【求助】1%tritonx100的细胞裂解液能不能释放出细胞核内的蛋白? ...123
耳语的缠绵佟2017-10-21
本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。使用本品裂解得到的蛋白样品可以用于常规的
Western、IP 等。主要成分为50mM Tris (pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40， 0.1% SDS。
使用本品裂解得到的蛋白样品，可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有
较高浓度的去垢剂，不能用Bradford 法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
保存条件：4℃
制备细胞裂解产物：
1、800g 4℃离心5 分钟，收集细胞，估计细胞离心后的体积(PCV,106 cells ≈ 20ul PCV,
107 cells ≈ 100 ul PCV)
2、每50~100ul PCV 加入5 倍体积的蛋白裂解液（250~500ul）,冰浴中放置10 分钟，且每隔5
分钟在漩涡混合仪震荡30 秒；
3、12000g 4℃离心10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物；
4、假如所得蛋白产物较为粘稠，可95℃加热5 分钟，然后迅速冰浴5 分钟，12000g 4℃离心
10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物。
制备组织裂解产物：
1、取50-100mg 组织在冰上剪成碎片，用预冷的PBS 洗涤2 次，离心弃去PBS；
2、加入0.5-1ml 预冷的蛋白裂解液；
3、4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40 次，直到95%的细胞被破碎，然后在冰浴中放置10 分钟，且每
隔5 分钟在漩涡混合仪震荡30 秒；
4、12000g 4℃离心10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物；
5、假如所得蛋白产物较为粘稠，可95℃加热5 分钟，然后迅速冰浴5 分钟，12000g 4℃离心
10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物。
6、20%的甘油保存于-70℃或-20℃。
Western、IP 等。主要成分为50mM Tris (pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40， 0.1% SDS。
使用本品裂解得到的蛋白样品，可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有
较高浓度的去垢剂，不能用Bradford 法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
保存条件：4℃
制备细胞裂解产物：
1、800g 4℃离心5 分钟，收集细胞，估计细胞离心后的体积(PCV,106 cells ≈ 20ul PCV,
107 cells ≈ 100 ul PCV)
2、每50~100ul PCV 加入5 倍体积的蛋白裂解液（250~500ul）,冰浴中放置10 分钟，且每隔5
分钟在漩涡混合仪震荡30 秒；
3、12000g 4℃离心10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物；
4、假如所得蛋白产物较为粘稠，可95℃加热5 分钟，然后迅速冰浴5 分钟，12000g 4℃离心
10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物。
制备组织裂解产物：
1、取50-100mg 组织在冰上剪成碎片，用预冷的PBS 洗涤2 次，离心弃去PBS；
2、加入0.5-1ml 预冷的蛋白裂解液；
3、4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40 次，直到95%的细胞被破碎，然后在冰浴中放置10 分钟，且每
隔5 分钟在漩涡混合仪震荡30 秒；
4、12000g 4℃离心10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物；
5、假如所得蛋白产物较为粘稠，可95℃加热5 分钟，然后迅速冰浴5 分钟，12000g 4℃离心
10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物。
6、20%的甘油保存于-70℃或-20℃。
【求助】大量肝组织的RNA提取需要什么研磨器? 核酸基因技术讨论...123
我是弘2021-07-24
如题。最近实验室需要提取大量肝组织的总RNA，工作量很大，查了下中国生物器材网（http://www.bio-equip.com/showequip.asp?hdivision=2304），看到有一种磁珠碾磨组织提取，不知道好不好？以前用的是传统的研钵，清洗很麻烦，大样本就不适合用了。
理想中的方法最好安全无污染，少清洗，提取RNA量多。不知道各位有什么好的建议？
请各位赐教哦！
理想中的方法最好安全无污染，少清洗，提取RNA量多。不知道各位有什么好的建议？
请各位赐教哦！
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