流式细胞仪做细胞表型鉴定步骤，急！！！

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流式细胞仪做细胞表型鉴定步骤，急！！！

2021-08-01

问题描述：

哪位大神有用流式细胞仪做细胞表型鉴定的步骤，及注意事项。。。。从来没做过细胞表型鉴定实验，求各位大神指导！！！非常感谢

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七更七子石

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你这问的太笼统了，你是要做什么细胞，surface 还是别的，分群还是功能？

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adidiaosieff

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首先，你得要知道自己做哪个亚群的鉴定。一般流式表型鉴定步骤：1、样品制备（一般来说BD流抗要求1*10^6cells/100ul。还有希望您样本制备的时候，别有太多杂质，以免堵塞流式管道）；2、洗涤样本（主要是洗去你培养过程中的一些培养基及细胞碎片啊什么的，有人选择用DPBS，我一般是习惯使用配套的洗涤试剂）；3、抗体孵育（如果是摸索实验，建议您按照说明书上的细胞以及抗体量进行孵育就行了）；4、样本洗涤（清洗一些没有与细胞结合的流抗）；5、上机检测。大体步骤就这样吧

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洛荨XJ

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七更七子石你这问的太笼统了，你是要做什么细胞，surface还是别的，分群还是功能？DC细胞的～

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洛荨XJ

用户

展开引用ADIdiaosieff首先，你得要知道自己做哪个亚群的鉴定。一般流式表型鉴定步骤：1、样品制备（一般来说BD流抗要求1*10^6cells/100ul。还有希望您样本制备的时候，别有太多杂质，以免堵塞流式管道）；2、洗涤样本（主要是洗去你培养过程中的一些培养基及细胞碎片啊什么的，有人选择用DPBS，我一般是习惯使用配套的洗涤试剂）；3、抗体孵育（如果是摸索实验，建议您按照说明书上的细胞以及抗体量进行孵育就行了）；4、样本洗涤（清洗一些没有与细胞结合的流抗）；5、上机检测。大体步骤就这样吧......非常感谢～

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