流式细胞仪做凋亡检测
2021-08-05
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小迷糊宁宁
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成一条线 可能是补偿没有调好
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Justin001
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先用阴性对照调节电压,电压调节准确后才能把阴性核阳性很好的区分开。电压调好后就不要再动。电压调好后再进行后续补偿的调节核样品管的检测。用单染管调补偿。电压调好的标准就是(空白对照或同型对照)阴性群完全出现并处于较低水平(阳性率小于2%)
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火一样
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补偿当时调了以后,变化不大。之前做了RAW细胞,分群也不明显,而且PI、AnnexinV双阳性的比例较大。你们有谁做过细菌侵染后关于细胞的凋亡实验吗?显微镜观察感觉细胞数还比较多,检测时数目却很少
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dxy_ee0wkcn9
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上网搜一下使用说明
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火一样
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使用说明一般试剂盒里面都是有的,5楼一般可以再浏览那些网站呢
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just蓝雪儿
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战友你好,我也是最近开始做流式,遇到了和你一样的问题,我的是FITC/PI双染,通道选的是FL1和FL2,结果也是细胞成一条线,都没有分群,不知你的问题解决了吗?
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火一样
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我当时一条线的问题是我选择的PE,后来选择PE(Tx-red)就好了,不过我不知道两者之间有什么区别呢,可能参数选择不对吧
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dxy_qv31iwk2
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细胞凋亡检测推荐汉恒高效AnnexinV/PI凋亡检测试剂盒哦,灵敏度高,操作方便http://www.hanbio.net/cn/products/item/417
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just蓝雪儿
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关于细胞成一条线的原因我也已经解决了。作为一个没人带的实验小白可能这些都是必经的曲折吧。细胞在散点图上为直线,我这边的原因是我没有调节补偿,补偿调节后,结果很正常。回复有点延迟,见谅!
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