Background
To simplify the use of minimal medium for fed-batch fermentations, Scarab Genomics offers medium for both the batch phase and feeding phase of fed-batch fermentations. The Korz Feed Stock supplies glucose, magnesium, iron, and trace elements for the feeding stage of Modified Korz Medium fed-batch fermentations. Scarab’s Clean Genome® strains were specifically designed for the production of biotherapeutic protein and DNA. The “cleanest” medium to use for biotherapeutic production is a chemically defined, minimal medium. Accordingly, Modified Korz Minimal Medium has been extensively tested with the Scarab Clean Genome® Strains to verify its ability to support cell growth and the production of recombinant protein. Korz minimal medium is designed for high density fed-batch fermentation of E. coli (Korz et al. 1995, Sharma et al. 2007). The medium consists of phosphate buffer, magnesium, ferric citrate, trace elements, and uses glucose as the carbon source. The same base medium used for optimizing expression in shake flasks can also be used for fed-batch fermentation, thereby providing continuity between the two processes.
Figures
Specifications
Kit Components Korz Feed Stock, 1000 ml Quality Control The media is confirmed for growth of Clean Genome® Strains using liquid culture and confirmed aseptic by no growth in liquid media and agar plates. Storage Conditions For long term storage, store the Korz Feed Stock at 4-12°C and protected from light. For short term storage the Feed Stock may be stored on the bench top at room temp for several days.
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Support
Product Manuals Korz Feed Stock, Sterile Papers
- Korz DJ, Rinas U, Hellmuth K, Sanders EA, Deckwer WD. J Biotechnol. 1995 Feb 21;39(1):59-65. Simple fed-batch technique for high cell density cultivation of Escherichia coli.
- Sharma S, Campbell JW, Frisch D, Blattner FR, Harcum SW. Biotechnol Bioeng. 2007 Dec 1;98(5):1056-70. Expression of Two Recombinant Chloramphenicol Acetyltransferase Variants in Highly Reduced Genome Escherichia coli Strains.
- Akesson M, Karlsson EN, Hagander P, Axelsson JP, Tocaj A. Biotechnol Bioeng. 1999 Sep 5;64(5):590-8. On-line detection of acetate formation in Escherichia coli cultures using dissolved oxygen responses to feed transients.
- DeLisa MP, Li J, Rao G, Weigand WA, Bentley WE. Biotechnol Bioeng. 1999 Oct 5;65(1):54-64. Monitoring GFP-operon fusion protein expression during high cell density cultivation of Escherichia coli using an on-line optical sensor.
- Pósfai G, et al., (2006) Emergent properties of reduced-genome Escherichia coli. Science 312:1044-6.
Patents & Disclaimers
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实验室使用的复合电极主要有全封闭型和非封闭型两种,全封闭型比较少,主要是以国外企业生产为主。复合电极使用前首先检查玻璃球泡是否有裂痕、破碎,如果没有,用pH缓冲溶液进行两点标定时,定位与斜率按钮均可调节到对应的pH值时,一般认为可以使用,否则可按使用说明书进行电极活化处理。活化方法是在4%氟化氢溶液中浸3~5 s左右,取出用蒸馏水进行冲洗,然后在0.1mol/L的盐酸溶液中浸泡数小时后,用蒸馏水冲洗干净,再进行标定,即用pH值为6.86(25℃)的缓冲溶液进行定位,调节好后任意选择另一种pH缓冲溶液进行斜率调节,如无法调节到,则需更换电极。非封闭型复合电极,里面要加外参比溶液即3 mol/L氯化钾溶液,所以必须检查电极里的氯化钾溶液是否在1/3以上,如果不到,需添加3 mol/L氯化钾溶液。如果氯化钾溶液超出小孔位置,则把多余的氯化钾溶液甩掉,使溶液位于小孔下面,并检查溶液中是否有气泡,如有气泡要轻弹电极,把气泡完全赶出。
在使用过程中应把电极上面的橡皮剥下,使小孔露在外面,否则在进行分析时,会产生负压,导致氯化钾溶液不能顺利通过玻璃球泡与被测溶液进行离子交换,会使测量数据不准确。测量完成后应把橡皮复原,封住小孔。电极经蒸馏水清洗后,应浸泡在3 mol/L氯化钾溶液中,以保持电极球泡的湿润,如果电极使用前发现保护液已流失,则应在3 mol/L氯化钾溶液中浸泡数小时,以使电极达到最好的测量状态。在实际使用时,发现有的分析人员把复合电极当作玻璃电极来处理,放在蒸馏水中长时间浸泡,这是不正确的,这会使复合电极内的氯化钾溶液浓度大大降低,导致在测量时电极反应不灵敏,最终导致测量数据不准确,因此不应把复合电极长时间浸泡在蒸馏水中。 1、玻璃电极插座应保持干燥、清洁,严禁接触酸雾、盐雾等有害气体,严禁沾上水溶液,保证仪器的高输入阻抗。
2、 不进行测量时,应将输入短路,以免损坏仪器。
3、 新电极或久置不用的电极在使用前,必须在蒸馏水中浸泡数小时。使电极不对称电位降低达到稳定,降低电极内阻。
4、 测量时,电极球泡应全部浸入被测溶液中。
5、 使用时,应使内参比电极浸在内参比溶液中,不要让内参比溶液倒向电极帽一端,使内参比悬空。
6、 使用时,应拔去参比电极电解液加液口的橡皮塞,以使参比电解液(盐桥)借重力作用维持一定流速渗透并与被测溶液相通。否则,会造成读数漂移。
7、 氯化钾溶液中应该没有气泡,以免使测量回路断开。
8、 应该经常添加氯化钾盐桥溶液,保持液面高于银/氯化银丝。 pH测量一定要标定校准吗?
pH测量通常有比色法(pH试纸或比色皿)和电极法二种。比色法当然不要标定,而电极法就一定要标定,因为电极法pH测量就是将未知溶液与已知pHs值的标准溶液在测量电池中作用比较测定,这是电极法pH测量的“操作定义”所决定的。
pH计因电计设计的不同而类型很多,其操作步骤各有不同,因而pH计的操作应严格按照其使用说明书正确进行。在具体操作中,校准是pH计使用操作中的一重要步骤。表1的数据是精度为0.01级、经过计量检定合格的pH计在未校准时与校准后的测量值,从中可以看出校准的重要性。
尽管pH计种类很多,但其校准方法均采用两点校准法,即选择两种标准缓冲液:一种是pH7标准缓冲液,第二种是pH9标准缓冲液或pH4标准缓冲液。先用pH7标准缓冲液对电计进行定位,再根据待测溶液的酸碱性选择第二种标准缓冲液。如果待测溶液呈酸性,则选用pH4标准缓冲液;如果待测溶液呈碱性,则选用pH9标准缓冲液。若是手动调节的pH计,应在两种标准缓冲液之间反复操作几次,直至不需再调节其零点和定位(斜率)旋钮,pH计即可准确显示两种标准缓冲液pH值。则校准过程结束。此后,在测量过程中零点和定位旋钮就不应再动。若是智能式pH计,则不需反复调节,因为其内部已贮存几种标准缓冲液的pH值可供选择、而且可以自动识别并自动校准。但要注意标准缓冲液选择及其配制的准确性。智能式0.01级pH计一般内存有三至五种标准缓冲液pH值,如科立龙公司的KL-016型pH计等。
其次,在校准前应特别注意待测溶液的温度。以便正确选择标准缓冲液,并调节电计面板上的温度补偿旋钮,使其与待测溶液的温度一致。不同的温度下,标准缓冲溶液的pH值是不一样的。
校准工作结束后,对使用频繁的pH计一般在48小时内仪器不需再次定标。如遇到下列情况之一,仪器则需要重新标定:
⑴溶液温度与定标温度有较大的差异时.
⑵电极在空气中暴露过久,如半小时以上时.
⑶定位或斜率调节器被误动;
⑷测量过酸(pH<2)或过碱(pH>12)的溶液后;
⑸换过电极后;
⑹当所测溶液的pH值不在两点定标时所选溶液的中间,且距7pH又较远时。
1、 测量时应按说明书规定的时间周期对仪器进行校准。
2、 校准时应注意:
标准缓冲溶液温度尽量与被测溶液温度接近。
定位标准缓冲溶液应尽量接近被测溶液的pH值。或两点标定时,应尽量使被测溶液的pH值在两个标准缓冲溶液的区间内。
校准后,应将浸入标准缓冲溶液的电极用水特别冲洗,因为缓冲溶液的缓冲作用,带入被测溶液后,造成测量误差。
3、 记录被测溶液的pH值时应同时记录被测溶液的温度值,因为离开温度值,pH值几乎毫无意义。尽管大多数pH计都具有温度补偿功能,但仅仅是补偿电极的响应而已,也就是说只是半补偿,而没有同时对被测溶液进行温度补偿,即,全补偿。 如何避免被测溶液与盐桥成分反应?
如果被测溶液含有可溶性银盐、一价汞盐或铊盐时,盐桥内不能利用氯化钾溶液,而应该用饱和硝酸钾或硝酸铵溶液方能获得满意的测量结果。对非水溶液则应用碘化钠的甲醇溶液和硫氰化钾的乙醇溶液为中间溶液。
总之,不能使盐桥溶液中的成分与被测溶液发生沉淀、氧化还原反应等现象,不然会干扰电动势测定。
如双液接参比电极在测Cl浓度中的应用。
关于pH计的常见信号显示仪表 ProtEX RT6820......模拟信号输入型/积算型显示仪表输入信号 4~20mA, Loop-Power回路供电电压降幅 2.8V, (带背光时5.8V)支持线性的、平方根的或可编程的数学运算Loop-Power回路供电 或 DC供电背光可选 ProtEX RT6830.....脉冲信号输入型/积算型显示仪表电池供电, DC供电, 或输出回路供电电池供电, DC供电, 或输出回路供电 背光可选 ProtEX_Lite PD663 防爆型回路供电过程显示仪表输入信号 4~20mA电压降幅 1.7V, (带背光时4.9V)3-1/2+LCDS数字,0.6”高回路供电背光可选快捷的四键编程问题
pH计的用途
pH计广泛用于净水、自来水、生活用水及各种液体的酸碱度测试。pH值在7.0为中性,7.0以下为酸性,7.0以上为碱性。向左转|向右转
对pH值准确度要求高的小伙伴们要记得定期校正pH计哦,新一代ÄKTA纯化系统可以在线校正啦:
便携式pH计主要用于现场和野外测方式,要求较高的精度和完善的功能。
实验室pH计是一种台式高精度分析仪表,要求精度高、功能全,包括打印输出、数据处理等等。
工业pH计是用于工业流程的连续测量,不仅要有测量显示功能,还要有报警和控制功能,以及安 装、清洗、抗干扰等等问题的考虑。
2.据ph计仪器精度分类:可分为0.2级、0.1级、0.05级、0.01级,数字越小,精度越高。
3.根据元器件类型分类:可分为晶体管式、集成电路式和单片机微电脑式,现在更多的是应用微电脑芯片,大大减少了仪器体积和单机成本;但芯片的开发成本很贵。
4根据读数指示分类:可分为指针式和数字显示式二种。指针式pH计现在已很少使用,但指针式仪表能够显示数据的连续变化过程,因此在滴定分析中还有使用。
5.看PH计有没有附带功能,比方说带标配RS232接口,还有一个很重的是温度补偿是自动
还是手动,自动温度补偿的PH计要比手动温度补偿的PH计要方便些,二者之间的价格你就明白了吧。
第一种是,4,7,10三种校准后,再用7测试,看这次校准是否成功。
第二种是,4,校准完就立即用4测试,看看是否校准成功,7和10也一样,我想请问下,哪种方法是正确的,合理的,为什么?急!!!