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PP2A2, Protein Phosphatase 2A2

Source: Bovine kidney

Purity: > 90% by SDS-PAGE, subunit apparent Mr’s ~ 36- and 65- kDa

Supplied: In 50 μl 50 mM Tris-HCl pH 7.0 buffer containing 14 mM β-mercaptoethanol, 1 mM benzamidine, 0.1 mM phenylmethanesulfonyl fluoride, 1 mM EDTA and 50% glycerol.

Activity: ~ 2000 units/mg with myelin basic protein (MBP) as substrate. One unit is the amount of PP2A2 that releases 1 nmol of inorganic phosphate from 32P-labeled MBP per min. Maintain preparations in aliquots at -70° C. Avoid repeated thawing.

Synonyms: Protein Phosphatase 2A2; PP2A2

SDS-PAGE of Purified Bovine Kidney PP2A2; Protein Phosphatase 2A2 Background: Protein phosphatase 2A (PP2A) is a divalent cation-independent multifunctional protein serine threonine phosphatase. PP2A regulates numerous cellular processes including the cell cycle, growth and differentiation. Physiological targets of PP2A include cell surface receptors and ion channels, and protein kinases involved in mitogenic signaling and the cell cycle. PP2A also acts on numerous transcription factors as well as key regulatory enzymes in metabolism. PP2A is a growth and tumor suppressor. It is inhibited potently by tumor promoters such as okadaic acid. It is also inhibited potently by two cancer-associated cellular proteins, I1PP2A and I2PP2A/SET. In addition, the SV40 small t antigen replaces the B subunit of PP2A during viral transformation. This subverts the physiological function of a subset of PP2A complexes in a substrate selective manner.

Figure: Purified preparation of bovine kidney PP2A2 was subjected to SDS-PAGE. The gel was stained with Coomassie Blue. The 65-kda A (top) and 36-kDa C (bottom) subunits are seen.

Protein Phosphatase 2A2 (PP2A2) is a dimeric form of PP2A. It contains A (65 kDa) and C (36 kDa) subunits but lacks the B subunit present in PP2A1. GloboZymes purified PP2A2 preparations are used to study enzyme kinetics and regulation. They are used to dephosphorylate target substrates and to evaluate the effects of test substances on the activity of the phosphatase. The preparations can also be used for determining the role of the missing B subunit of the enzyme.

References: Biochem J 287: 1019; Proc Natl Acad Sci USA 90: 2500

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换滤光片,340、280、260、230
石英的96孔板,每个孔的体积为200ul,空白直接200ulDEPC水,实验组196ulPEPC水+4ulRNA
如果换了滤光片了,测试步骤与MTT测试步骤差不多,主要就是设置吸光度,点击四次吸光度,设置为340、280、260、230。
1、进板后确定板类型和板孔
2、设置吸光度,点击四次吸光度,分别设置为340、280、260、230。
3、开始

酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
请问用BCA法蛋白定量的步骤(用酶标仪
荧光酶标仪(Fluorence microplate reader)是用来进行荧光检测的酶标仪。通过激发光栅分光后的特定波长的光照射到被荧光物质标定的样品上,会发出波长更长的发射光,通过发射光栅后到达检测器,荧光的强度与样品的浓度呈一定的比例。荧光检测灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样,但是容易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响干扰检测。
其用途主要是蛋白和核酸定量,酶活测定,荧光免疫分析,代谢物/被分析物定量,胞内钙离子浓度的变化,荧光蛋白的报道基因分析 (GFP),细胞存活/毒性/增殖/粘合分析,受体-配基结合,蛋白-DNA相互作用,寡核苷酸多态性,酶活性分析,药物筛选等方面。
荧光酶标仪最常见的品牌是的是美国宝特(BioTek)。BioTek 有多种荧光检测仪器,从低成本、高精度的 FLx800?? 到模块化的 Synergy?? 2 和 Synergy?? 4,可满足各种荧光检测需求。
FLx800 系列有五种不同型号的荧光酶标仪。分别是FLX800T,FLX800TB,FLX800TBP,FLX800TBI,FLX800TBID。其差别在于探针的位置顶部/底部,以及是否配有孵育,震荡,注射器,PCR读板等。
………………
详细资料请参考:on
http://www.bio1000.com/news/1/351982.html
(l)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的 聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体. (2)由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光来都 是垂直通过待测溶

各位前辈,MTT法加样后第一天阳性组镜下看细胞全死了,样品组和阴性组镜下状态还可以,加DMSO后样品孔和阴性孔颜色粉红,阳性孔红紫到发黑,酶标仪检测,样品组和阴性组大概0.2-0.4,阳性组却有1.2-1.4,请问,这是怎么回事?细胞接板密度为4*104,100μL。向各位求助了,万分感谢!

【酶标仪是国家规定的强制计量检定仪器】根据《中华人民共和国计量法》第九条之规定,县级以上人民政府计量行政部门对社会公用计量标准器具,部门和企业,事业单位使用的最高计量标准器具,以及用于贸易结算,安全防护,医疗卫生,环境检测方面列入强制检定目录的工作计量器具进行强制检定。
首先,酶标仪是用于医疗卫生方面的,其次,酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。比色计是被列入强制检定目录的,因此需要强制检定。

【酶标仪】即酶联免疫检测仪,是酶联免疫吸附试验的专用仪器,又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。

想请教一下各位大神,为什么我做的Caco-2细胞的药物干预,用酶标仪检测CCK8,5/6孔总是异常,按理说,药物干预后,数据应该是递增或递减的,然而234孔递减,5/6孔却上升了,7、8孔又是递减。请问有人有遇到过这种情况吗??在此先谢谢各位亲了~

酶标仪的工作原理及基本结构123
灰灰菜︶ㄣ2021-07-26
请不要复制一大堆有的没的,我要单独的结构,不要网上搜的那个原理和结构混在一起的,我区分不开,如果可以,你可以从搜到的那里提取出结构发出来,满意还有加分!
多功能酶标仪 123
劧█重量█v92017-11-07
酶标仪是一台变相的光电比色计或分光光度计,其工作原理与主要结构跟光电比色计几乎完全相同.酶标仪主要由光源系统、单色器系统、样品室、探
测器和微处理器控制系统等组成.
光源灯发出的光线经过滤光片或单色器后,成为一束单色光.该单色光束经过酶标板中的待测标本,被标本吸收掉一部分后,到达光电检测器.光电检测器将投照到
上面的光信号的强弱转变成电信号的大小.此电信号经前置放大、对数放大、模数转换等处理后,送人微处理器进行数据处理和计算,最后通过显示器和打印机输出
测试结果.
求助,请问各位老师,我用日本同仁的cck-8来做细胞毒性实验,96孔板是康宁的白色板,酶标仪伯乐的imark,490nm下测吸光度。可是读出的所有数据都是****,包括空的孔。这是为什么呢?是这种96孔板不能直接放入酶标仪中检测吗,还是仪器的问题,还请知道的老师指点一下,急,谢谢谢谢
请问这两张图是不是表示没有rna啊…**解释

请问BAC蛋白浓度测定波长是562,我们这边酶标仪的滤光片波长最接近的是595,这样也可以测吗