Aflatoxin HPLC Immunoaffinity Column
The Aflatoxin HPLC Immunoaffinity Column is For Research Use Only
Size: 3ml, 10 columns
Product Developed and Manufactured in Germany by BioTeZ Berlin-Buch GmbH
Principle
This instruction of Aflatoxin total determination in food and feed focuses on the enrichment step of extract using immunoaffinity column (Immunoaffinity Chromotography (IAC)) in combination with quantification with HPLC (High Performance Liquid Chromotography). Accepted laboratory extraction methods should be followed throughout the procedure. If the criteria of organic solvent tolerance, elution process of analyte, and working range of column are followed you will see full performance with the IAC column. If problematic matrices are applied, many pretreatment methods of aflatoxin (AFG2, AFG1, AFB2 and AFB1) determination in food and feed will show low sensitivity because of interfering substances. This method of content determination of aflatoxins combines the high selectivity of an immunoaffinity column (IAC) with its potential to concentrate eluate with the additional step of purification by HPLC column. Please notice that this instruction focuses on the handling with the IAC column. For the commodity extraction step please note that a literature method is provided. The given apparatus (e.g. HPLC system) might serve as example among other possibilities.
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Immunoaffinity Columns: Product Highlights
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可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是上海美析仪器采用最新的单片机技术，开发出能够进行定量测量(标准曲线测量，可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描，分析物质的特征波长，判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试，分析物质的相关特性);还有可以进行DNA/蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等等，广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。V-1500PC型可见分光光度计，波长范围:320nm-1100nm，能满足不同物质的测试。
①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器 。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5～10厘米。
④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。
⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
3.1透过率、吸收度测量
a.暗电流调零：开启电源后，若试样室盖未打开，将显示提示符P.1（请做第一步骤操作），打开试样室盖直到接触检测开关，提示符P.1消失，显示暗电流值。如果它的绝对值小于5.0，则两秒内自动归零，否则可调节面板上之0%T旋钮。
b.调整参比讯号（100T/OA）：微机所显示的提示符为P.2（请做第二步操作）。将T—A—C旋钮开关置T/A，参比溶液放进1号试样槽并移入光路，关闭试样室盖，显示参比讯号强度，调整狭缝和光楔（试样槽拉手左面之100%T旋钮），使显示数在90.0—119.9%T或相应A值范围以内，2秒以内将自动调整为100%T/OA。
c.比色皿误差校正：为校正比色皿的系统误差，要求在同一次测量过程中，比色皿与槽位编号一一照应。将使用的比色皿盛参比溶液放进试样槽，移入光路，所显示的T（或A值）就反映了该与1号槽中比色皿之间的配对误差。按一下ADJ（Adjust）校正键，则误差数据存入微机并自动校正为100%T/OA。这项操作在每次开机后只需作一次，若所用的比色皿配对性很好，可免去这一步骤。开机时，校正系数初始值为1，即相当于不校正。
d.用同比色皿盛被测溶液放进同一试样槽，则显示校正后的透过率或吸光率。
3.2浓度测量
a.标准对照法
b.按3.1节（1）—（3）操作。
c.将标准浓度的样品放如光路。
d.旋钮开关至C，分别按三个浓度置数键，使显示数与已知浓度值一致，浓度值仅取其三为有效数字，小数点位置自定义。
e.将被测式样移入光路，则显示样品的浓度（比色皿误差已校正）。
3.2标准曲线法（标准曲线为直线）
a.按3.1节（1）—（3）操作。
b.旋钮至A， 调整光楔使A值变化至标准曲线高端某一点的坐标A0。
c.旋钮至C，按浓度置数键显示数与对应于A0的浓度值C0一致。
d.重新调整对比讯号后按（1）之（4）操作。
3.3测试完毕，依次关闭主机电源开关，电气箱开关，拔下电源插头，盖上护罩。
3.4认真填写使用操作记录。
红外光谱仪是利用物质对不同波长的红外辐射的吸收特性，进行分子结构和化学组成分析的仪器。红外光谱仪通常由光源，单色器，探测器和计算机处理信息系统组成。根据分光装置的不同，分为色散型和干涉型。对色散型双光路光学零位平衡红外分光光度计而言，当样品吸收了一定频率的红外辐射后，分子的振动能级发生跃迁，透过的光束中相应频率的光被减弱，造成参比光路与样品光路相应辐射的强度差，从而得到所测样品的红外光谱。红外光谱仪特点 1、 只需三个分束器即可覆盖从紫外到远红外的区段；
2、 专利干涉仪，连续动态调整，稳定性极高；
3、 可实现LC/FTIR、TGA/FTIR、GC/FTIR等技术联用；
4、 智能附件即插即用，自动识别，仪器参数自动调整；
5、 光学台一体化设计，主部件对针定位，无需调整。
红外分光光度计 由光源发出的光，被分为能量均等对称的两束，一束为样品光通过样品，另一束为参考光作为基准。这两束光通过样品室进入光度计后，被扇形镜以一定的频率所调制，形成交变。基本工作原理 用一定频率的红外线聚焦照射被分析的试样，如果分子中某个基团的振动频率与照射红外线相同就会产生共振，这个基团就吸收一定频率的红外线，把分子吸收的红外线的情况用仪器记录下来，便能得到全面反映试样成份特征的光谱，从而推测化合物的类型和结构。IR光谱主要是定性技术，但是随着比例记录电子装置的出现，也能迅速而准确地进行定量分析。
特点
一般的红外光谱是指2.5-50微米（对应波数4000--200厘米-1）之间的中红外光谱，这是研究研究有机化合物最常用的光谱区域。红外光谱法的特点是：快速、样品量少（几微克-几毫克），特征性强（各种物质有其特定的红外光谱图）、能分析各种状态（气、液、固）的试样以及不破坏样品。红外光谱仪是化学、物理、地质、生物、医学、纺织、环保及材料科学等的重要研究工具和测试手段，而远红光谱更是研究金属配位化合物的重要手段。
（1）【诺顶仪器】为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光路切断，以延长光电管的使用寿命。
（2）取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光学表面。
（3）比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
长（频率、或波数）,分别测定后,手工绘制光谱图.显然这种仪器对于需要经常根据光谱图定性分析的用户而言是很不方便的,但价格相对于光谱仪要便宜得多,
对只需定量分析的用户就够用了.
1、光谱仪，以光电倍增管等光探测器测量谱线不同波长位置强度的装置。其构造由一个入射狭缝，一个色散系统，一个成像系统和一个或多个出射狭缝组成。以色散元件将辐射源的电磁辐射分离出所需要的波长或波长区域，并在选定的波长上（或扫描某一波段）进行强度测定。分为单色仪和多色仪两种。
2、分光光度计是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780
nm的可见光区和波长范围为200～380
nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的380～780nm波长的光
谱光通过三棱镜折射后，可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱；该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
1，被测液浓度过高造成透过样品的光信号检测不到，这种情况下可以通过稀释样品来完成；
2，测定时，样品室内的样品架在移动时没移动到位造成挡光；
3，仪器内部的光源不亮或光源没有进入单色器中。可以对照以上情况检查分析！
本人新入植物化学，实验上遇到了一些问题，还望各位大神帮帮忙。
之前通过薄层色谱确定了最佳的展开剂以及展开剂的最佳比例，下一步将过硅胶柱。但是想通过将分光光度计与柱层析联用，将接收液直接进行紫外吸收，以此确定接收的液体为同一物质。但是现在遇到的问题是，在实验过程中是只需要用一种波长去测定还是要不停地调整？（现在只知道物质的极性，不知道组分中有哪些物质）
另外，是通过这种方法分离好一些还是过了柱子后再进行一次薄层色谱好一些呢？
各位大神帮帮忙，感激不尽！！！
