
Immunoglobulin expressed by the mouse plasmacytoma hybridoma RPC 5 is an IgG2a kappa isotype of unknown specificity. It is used as a negative control when working with human cells (1).
References:
1. K Kondo, Y Tanaka, et al (2007) Hum Immunol 68(7): 563-71. PMID: 17584577
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今天,导师问到我一个问题,
HPLC检测器与UV分光光度计的主要区别。
我说HPLC检测器的分光部件在样品流动池的后面,UV分光光度计的分光部件在样品的前面。
导师问我,那么分光部件的前置和后置各有什么优点和缺点呢?
我百思不得其解。
特地前来请教
1、光源不同:可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。
2、光学器件的不同:由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件。同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。
3、接收器的不同:由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。
长(频率、或波数),分别测定后,手工绘制光谱图.显然这种仪器对于需要经常根据光谱图定性分析的用户而言是很不方便的,但价格相对于光谱仪要便宜得多,
对只需定量分析的用户就够用了.
1、光谱仪,以光电倍增管等光探测器测量谱线不同波长位置强度的装置。其构造由一个入射狭缝,一个色散系统,一个成像系统和一个或多个出射狭缝组成。以色散元件将辐射源的电磁辐射分离出所需要的波长或波长区域,并在选定的波长上(或扫描某一波段)进行强度测定。分为单色仪和多色仪两种。
2、分光光度计是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780
nm的可见光区和波长范围为200~380
nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光
谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
可见光的波长范围是400nm~760nm,红620nm--760nm 橙592nm--620nm 黄578nm-- 592nm 绿500nm-- 578nm 青464nm--500nm 蓝446nm --464nm 紫400nm--446nm。
不能用玻璃比色皿是因为紫外线的玻璃的透射能力很低(玻璃吸收紫外光能力强),所以一般采用透射能力强的石英比色皿。
希望对你有所帮助!
不懂情追问!
望采纳!
1,被测液浓度过高造成透过样品的光信号检测不到,这种情况下可以通过稀释样品来完成;
2,测定时,样品室内的样品架在移动时没移动到位造成挡光;
3,仪器内部的光源不亮或光源没有进入单色器中。可以对照以上情况检查分析!
【1】光源:721型分光光计是钨灯;722型分光光度计是碘钨灯
【2】单色器:721型分光光计是棱镜;722型分光光度计是光栅
【3】检测器:721型分光光计是光电管;722型分光光度计是光电倍增管
【4】显示器:721型分光光计是表头指针读数;722型分光光度计是光电直读数据
标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。在分光光度法分析中,被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系,水样测定的结果可以从标准曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏,将会影响测定结果的准确度。1标准曲线的表达式标准曲线应是一条通过原点的直线,如果坐标上各浓度点基本在一条直线上可不进行回归处理,但在实验中不可避免地存在测定误差,往往会有一、二点偏离直线,此时可用最小二乘法进行回归分析,然后绘制曲线,通常称为回归直线,而代表回归直线方程叫回归方程,表达式为:y=bx+a(式中:b为直线斜率,a为y轴上的截距,x为被测溶液的浓度,y为吸光度,是多次测定结果的平均值)。在实际工作中,制作标准曲线的目的,是要借助它来查出水样中被测物质的浓度,而不是由x值通过回归方程去求得最可靠的y值,为了便于将观察到仪器响应信号值代入回归方程中直接计算试样的浓度或含量,勿需去绘制标准曲线再从曲线上查出被测物的浓度,改用下式计算;x=by+a(式中:a为x轴线上的截距,其它解释同前)。2标准曲线的参数标准曲线有3个参数,即相关系数r,斜率b
绘制标准曲线的意义
以某一特定波长条件下由分光光度计分别测出一系列不同溶度标准溶液然的吸光度值,以吸光光度值为纵坐标,相应的溶液浓度为横坐标,在坐标纸上可作出一条吸光度与浓度成正比通过原点的直线,称作标准曲线。~~~绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。。展开
紫外分光光度计测出来吸光度需要除以待测液的体积吗

