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BioAssay Systems/PiBlue™ Phosphate Assay Kit/500 tests/POPB-500
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PiBlue™ Phosphate Assay Kit
- Product Overview
- Product FAQ
- Product Citations
- Assay Service
ProtocolSDS
Application
- For sensitive and high-throughput phosphate determination.
Key Features
- Reagent very stable. Due to our innovative formulation, no precipitation of reagent occurs. Therefore no filtration of reagent is needed prior to assays, as is often required with other commercial kits.
- High sensitivity and wide detection range: detection of as little of 20 pmoles of phosphate and useful range between 0.4 μM and 50 μM phosphate.
- Fast and convenient: single reagent "mix-and-measure" assay allows quantitation of free phosphate within 30 minutes.
- Compatible with routine laboratory and HTS formats: assays can be performed in tubes, cuvettes or microplates, on spectrophotometers and plate readers.
- Robust and amenable to HTS: Z factors of 0.7 to 0.9 are observed in 96-well plates. Can be readily automated on HTS liquid handling systems
Method
- OD620nm (malachite green)
Samples
- Enzyme reactions with free phosphate releases
Species
- All
Size
- 500 tests
Detection Limit
- 0.4 μM
Shelf Life
- 12 months
More Details
- The PiBlue™ Phosphate Assay Kit is based on a proprietary formulation of the malachite green dye. The PiBlue™ reagent forms a blue colored complex with free orthophosphate. The rapid color formation from the reaction can be conveniently measured on a spectrophotometer (600 - 660 nm) or on a plate reader. The non-radioactive colorimetric assay kits have been optimized to offer superior sensitivity and prolonged shelf life. The assay is simple and fast, involving a single addition step for phosphate determination. Assays can be performed in tubes, cuvettes or multi-well plates. The assays can be conveniently executed in 96-well plates for high-throughput screening of enzyme inhibitors.
What is the difference between your 3 phosphate assays: DIPI-500, POMG-25H, POPB-500?
All three products are based on the malachite green dye. While the PiBlue (POPB-500) and QuantiChrom (DIPI-500) Phosphate Assay Reagents are identical, they differ in the standards. The PiBlue is designed for customers who want prepare a full calibration curve for their assays, and the latter has one set of a blank control and 30 µM phosphate standard. The reagent is more diluted than the reagent used in the Malachite Green Phosphate Assay Kit (POMG-25H). As a result, one adds 100 µL reagent (POPB-500 or DIPI-500) to 50 µL sample, whereas for the Malachite Green based assay, one adds 20 µL Reagent to 80 µL sample. In practice, the DIPI-500 is the most convenient kit to use, because there is no need to prepare a calibration curve there is no need for extra mixing. Because adding a larger volume (100 μL) to a small volume (50 μL) effects efficient mixing in well, no extra mixing is needed. The POPB-500 requires preparation of calibration curve. With the POMG-25H Kit, one needs to mix the reagent with the sample, because adding 20 µL to 80 µL does not mix efficiently by itself. Also a preparation of a standard curve is necessary.For more detailed product information and questions, please feel free to Contact Us. Or for more general information regarding our assays, please refer to our General Questions.Hwang, J. D., Ortiz-Maldonado, M., & Paramonov, S. (2016). Delivery of Formulated Industrial Enzymes with Acoustic Technology. Journal of laboratory automation, 21(1), 153-165. Assay: Phosphate in Buttiauxella sp Phytase. Demidenko AA et al (2011). Effects of viscogens on RNA transcription inside reovirus particles. J Biol Chem. 286(34):29521-30. Assay: Phosphate in rat lipid.Liu Q et al (2011). Competition between foliar Neotyphodium lolii endophytes and mycorrhizal Glomus spp. fungi in Lolium perenne depends on resource supply and host carbohydrate content. Functional Ecology 25:910-920. Assay: Phosphate in mouse intracellular phosphate.Lopez-Vales R, et al (2010). Fenretinide promotes functional recovery and tissue protection after spinal cord contusion injury in mice. J Neurosci. 30(9):3220-6. Assay: Phosphate in mouse lipid. Oborna I et al (2010). Increased lipid peroxidation and abnormal fatty acid profiles in seminal and blood plasma of normozoospermic males from infertile couples. Hum Reprod. 25(2):308-16. Assay: Phosphate in fish marine teleost follicles, eggs. Oborna I et al. (2010). Increased lipid peroxidation and abnormal fatty acid profiles in seminal and blood plasma of normozoospermic males from infertile couples. Hum Reprod. 25(2):308-16. Assay: Phosphate in human blood, semen. Polewski MD, et al (2010). Inorganic pyrophosphatase induces type I collagen in osteoblasts. Bone 46(1):81-90. Assay: Phosphate in mouse/human cellular extract. Cramp RL et al (2009). Ups and downs of intestinal function with prolonged fasting during aestivation in the burrowing frog, Cyclorana alboguttata. J Exp Biol. 212(22):3656-63. Assay: Phosphate in mouse lipid.Cramp RL, et al (2009). Ups and downs of intestinal function with prolonged fasting during aestivation in the burrowing frog, Cyclorana alboguttata. J Exp Biol. 212(22):3656-63. Assay: Phosphate in frog Na+/K+-ATPase extract. Huxtable AG, et al (2009). Tripartite purinergic modulation of central respiratory networks during perinatal development: the influence of ATP, ectonucleotidases, and ATP metabolites. JNeurosci. 29(47):14713-25. Assay: Phosphate in rat ATPase extract. Kang HY et al (2008). Altered TNSALP expression and phosphate regulation contribute to reduced mineralization in mice lacking androgen receptor. Mol Cell Biol.28(24):7354-67. Assay: Phosphate in rat ATPase extract.Kang HY, et al (2008). Altered TNSALP expression and phosphate regulation contribute to reduced mineralization in mice lacking androgen receptor. Mol Cell Biol.28(24):7354-67. Assay: Phosphate in mouse cytosolic fraction. Chen X et al (2007). The isolation and structure of membrane lipid rafts from rat brain. Biochimie 89(2):192-6. Assay: Phosphate in mouse/human cellular extract.Chen X, et al (2007). The isolation and structure of membrane lipid rafts from rat brain. Biochimie 89(2):192-6. Assay: Phosphate in rat lipid. Hough TA et al (2007). Novel mouse model of autosomal semidominant adult ypophosphatasia has a splice site mutation in the tissue nonspecific alkaline phosphatase gene Akp2. J Bone Miner Res. 22(9):1397-407. Assay: Phosphate in frog Na+/K+-ATPase extract.Hough TA, et al (2007). Novel mouse model of autosomal semidominant adult hypophosphatasia has a splice site mutation in the tissue nonspecific alkaline phosphatase gene Akp2. J Bone Miner Res. 22(9):1397-407. Assay: Phosphate in mouse intracellular phosphate. Lau K.H. et al. (2006). An osteoclastic protein-tyrosine phosphatase is a potential positive regulator of the c-Src protein-tyrosine kinase activity: a mediator of osteoclast activity. J Cell Biochem. 97(5):940-55. Assay: Phosphate in rabbit phosphatases.To find more recent publications, pleaseclick here.
If you or your labs do not have the equipment or scientists necessary to run this assay, BioAssay Systems can perform the service for you.Simply send us your samples:- Fast turnaround - Quality data - Low costPlease email or call 1-510-782-9988 x 2 to request assay service.
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台,
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-07-25
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分光光度分析中经常出现波动的问题,吸光度无法稳定在一个恒定的数值上。这种情况常见 查看更多
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2021-08-14
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2017-02-26
医疗生物化学检测UV722紫外可见分光光度计是由湖南创特科技发展有限公司代理或销售的科捷品牌的仪器,产品来源于南京。湖南创特科技发展有限公司是中国最权威的医疗生物化学检测UV722紫外可见分光光度计销售服务商之一,在长沙等地方销售医疗生物化学检测UV722紫外可见分光光度计已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业医疗生物化学检测UV722紫外可见分光光度计仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的医疗生物化学检测UV722紫外可见分光光度计产品 查看更多
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2021-07-21
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2018-01-26
华北制药股份有限公司华北制药生物技术药物产业化基地建设项目设备采购招标公告1.招标条件本招标项目华北制药股份有限公司华北制药生物技术药物产业化基地建设项目,招标人为华北制药股份有限公司,招标项目资金来自企业自筹,出资比例为100%。该项目已具备招标条件,现对紫外分光光度计和超微量分光光度计各一台采购进行公开招标。2.项目概况与招标范围紫外分光光度计和超微量分光光度计各一台(详见招标文件第八章有关内容)3.投标人资格要求3.1本次招标要求 查看更多
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2018-03-30
依据江西省政府采购工作领导小组办公室下达计划函要求,江西银信工程造价咨询有限公司受南昌大学委托,对其所需货物和相关服务进行公开招标,欢迎符合资格条件的供应商前来参加。一、采购方式:公开招标二、招标项目简要说明及主要技术参数:序号采购项目编号货物名称数量单位预算金额(元)简要技术参数1赣购2018B000032265超微量分光光度计(进口)1台13万1.★采用最先进的微量样品斜率检测技术;2.★悬臂式测量模式,可感应浓度自动调节光程;2赣 查看更多
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2021-07-23
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2018-04-11
采购公告采购标题:紫外分光光度计询价单号:XJ0027892A询单类型:公开询单询单状态:报价中联系电话:****报名截止时间:2018-04-1117:00合同执行周期:报价截止时间:2018-04-1617:00报名截止天数:0询单要求一、标的物描述:(一)、标的名称:紫外分光光度计(二)、竞价简介:(三)、技术质量要求:(四)、验收要求:1)收货单位根据卖方提供的交货清单进行验收,除另有约定外,数量验收以买方计量结果为准。2)质量 查看更多
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2018-02-06
受福建省海洋环境与渔业资源监测中心委托,福建鑫瑞达招标有限公司对[3500]XRD[GK]2017022、福建省海洋环境与渔业资源监测中心原子吸收分光光度计采购组织进行公开招标,现欢迎国内合格的投标人前来投标。1、招标编号:[3500]XRD[GK]20170222、项目名称:福建省海洋环境与渔业资源监测中心原子吸收分光光度计采购3、招标内容及要求:金额单位:人民币元合同包品目号采购标的允许进口数量品目号预算合同包预算投标保证金11-1 查看更多
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常见问题
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【求助】用分光光度计,到底是用蒸馏水调零还是用空白调?_紫外...123
moxue1232021-08-09
请问,紫外分光光度计调空白时,是应该放一个空白还是两个样品池同时放空白?
紫外分光光度计的光谱带宽 123
2021-08-17
为什么,紫外分光光度计的光谱带宽一般是2nm或更小,而液相色谱仪紫外检测器的光谱带宽却多为4-8nm?
分光光度计上K*ABS是什么意思 123
asacoll2021-08-14
k*abs是单位
...型荧光分光光度计要测定共振光散射光谱怎么测?_分子荧光光谱仪器社区...123
xulinn2021-07-24
急急急,求各位老师支招。现在打算测一下蛋白溶液的共振光散射,用的是RF-5301PC型荧光分光光度计,看文献都说以λex=λem进行同步扫描,我是直接选择synchronously模式,然后其中EX是设置一个固定值,EM是一个范围设置,我是令EX=220nm,EM=220-800nm,狭缝3nm,高速扫描。这样扫描出来的光谱就是共振光散射光谱么?那跟同步荧光光谱的测定有何不一样?求大神们解答。先谢谢啦~
紫外可见分光光度计的曲线绘制 123
2021-08-16
分光光度法中制作标准曲线及影响因素
标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。在分光光度法分析中,被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系,水样测定的结果可以从标准曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏,将会影响测定结果的准确度。1标准曲线的表达式标准曲线应是一条通过原点的直线,如果坐标上各浓度点基本在一条直线上可不进行回归处理,但在实验中不可避免地存在测定误差,往往会有一、二点偏离直线,此时可用最小二乘法进行回归分析,然后绘制曲线,通常称为回归直线,而代表回归直线方程叫回归方程,表达式为:y=bx+a(式中:b为直线斜率,a为y轴上的截距,x为被测溶液的浓度,y为吸光度,是多次测定结果的平均值)。在实际工作中,制作标准曲线的目的,是要借助它来查出水样中被测物质的浓度,而不是由x值通过回归方程去求得最可靠的y值,为了便于将观察到仪器响应信号值代入回归方程中直接计算试样的浓度或含量,勿需去绘制标准曲线再从曲线上查出被测物的浓度,改用下式计算;x=by+a(式中:a为x轴线上的截距,其它解释同前)。2标准曲线的参数标准曲线有3个参数,即相关系数r,斜率b
绘制标准曲线的意义
以某一特定波长条件下由分光光度计分别测出一系列不同溶度标准溶液然的吸光度值,以吸光光度值为纵坐标,相应的溶液浓度为横坐标,在坐标纸上可作出一条吸光度与浓度成正比通过原点的直线,称作标准曲线。~~~绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。。展开
标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。在分光光度法分析中,被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系,水样测定的结果可以从标准曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏,将会影响测定结果的准确度。1标准曲线的表达式标准曲线应是一条通过原点的直线,如果坐标上各浓度点基本在一条直线上可不进行回归处理,但在实验中不可避免地存在测定误差,往往会有一、二点偏离直线,此时可用最小二乘法进行回归分析,然后绘制曲线,通常称为回归直线,而代表回归直线方程叫回归方程,表达式为:y=bx+a(式中:b为直线斜率,a为y轴上的截距,x为被测溶液的浓度,y为吸光度,是多次测定结果的平均值)。在实际工作中,制作标准曲线的目的,是要借助它来查出水样中被测物质的浓度,而不是由x值通过回归方程去求得最可靠的y值,为了便于将观察到仪器响应信号值代入回归方程中直接计算试样的浓度或含量,勿需去绘制标准曲线再从曲线上查出被测物的浓度,改用下式计算;x=by+a(式中:a为x轴线上的截距,其它解释同前)。2标准曲线的参数标准曲线有3个参数,即相关系数r,斜率b
绘制标准曲线的意义
以某一特定波长条件下由分光光度计分别测出一系列不同溶度标准溶液然的吸光度值,以吸光光度值为纵坐标,相应的溶液浓度为横坐标,在坐标纸上可作出一条吸光度与浓度成正比通过原点的直线,称作标准曲线。~~~绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。。展开
【求助】721无法调零是怎么回事?_紫外可见分光光度计(UV)仪器...123
LULI璐33822018-01-16
721分光光度计显示EL说明在测定被测液的吸光度时,其所测数值已经超出了仪器所能显示的最大值,也就是溢出了!大概有以下原因造成:
1,被测液浓度过高造成透过样品的光信号检测不到,这种情况下可以通过稀释样品来完成;
2,测定时,样品室内的样品架在移动时没移动到位造成挡光;
3,仪器内部的光源不亮或光源没有进入单色器中。可以对照以上情况检查分析!
1,被测液浓度过高造成透过样品的光信号检测不到,这种情况下可以通过稀释样品来完成;
2,测定时,样品室内的样品架在移动时没移动到位造成挡光;
3,仪器内部的光源不亮或光源没有进入单色器中。可以对照以上情况检查分析!
如何用分光光度计区分玻璃比色杯及石英比色杯 123
2021-08-12
正确的答案是:石英比色皿可以全波段测量。即:即可在紫外区用还可以在可见区用。玻璃比色皿只能用在可见区,一定不能用在紫外区,因为玻璃对紫外有吸收。呵呵,别使用错了哦。
nanodrop和紫外分光光度计的区别123
长野由佳2021-08-07
一、产品应用
ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。
该产品可用于以下几个方面:
* 紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;
* 核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;
* 探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;
* 细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值;
* 蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值;
* 蛋白标记检测:可检测被BCA、Bradford或Lowry标定的蛋白样品,自动画出标准曲线并计算出待测蛋白质浓度。
二、 产品简介
NanoDrop 2000超微量分光光度计是NanoDrop的最新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受专利保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。
NanoDrop 2000使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,检测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。
待测样品的均质性是NanoDrop 2000的最高要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为最佳,若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂,则改以55?C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保 2ul 具有代表性。
检测时选择不同检测模式,可以得到最快速的结果:
● Nucleic Acid ?C 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。
● UV-Vis ?C 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。
● A280蛋白质定量法 ?C 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。
● BCA、Bradford及Lowry ?C 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。
* 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在最佳时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线最多可有七个标准品,每个标准品最多可做五重复。
* 测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸(编号: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。
浓度范围:
样品种类
最低浓度
最高浓度
(超过时请稀释样品)
再现性 (五重复以上)
核酸
2 ng/ul
15000 ng/ul (dsDNA)
12000 ng/ul (RNA)
浓度范围在 2-100 ng/ul 时,SD为 ± 2 ng/ul
浓度范围大于 100 ng/ul 时,CV为 ± 2%
纯BSA
0.10 mg/ml
100 mg/ml
浓度范围在 0.05-10 mg/ml 时,SD为 ± 0.10 mg/ml
浓度大于 10 mg/ml 时,CV为 ± 2%
蛋白质,以BCA方式定量
0.2 mg/ml
8.0 mg/ml
CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)
蛋白质,以modified Lowry方式定量
0.2 mg/ml
4.0 mg/ml
CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)
蛋白质,以Bradford方式定量
100 ug/ml
8000 ug/ml
浓度范围在 100-500 ug/ml 时,SD为 ± 25 ug/ml
浓度大于 500 ug/ml 时,CV为 ± 5%
蛋白质,以Mini Bradford方式定量
15 ug/ml
100 ug/ml
浓度范围在 15-50 ug/ml 时,SD为 ± 4 ug/ml
浓度大于 50 ug/ml 时,CV为 ± 5%
三、技术参数:
1、波长范围: 190-840nm;
2、波长精度: 1nm;
3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm);
4、其它: 1mm光程长度(可自动调整到0.05mm);
5、检测下限:2ng/μl(dsDNA);
6、检测上限:15000ng/μl(dsDNA);
7、吸光率精确度:0.002 absorbance (1mm光程);
8、吸光率准确性:2%(at 0.76 at 257 nm);
9、吸光率范围:0.02-300 (相当于10mm光程);
10、核酸检测周期:< 5s;
11、体积:14cm×20cm。
四、使用方法举例:
dsDNA:在主画面点选Nucleic Acid,计算机与仪器自动完成联机。依照DNA所溶于之液体准备该溶液(务必确认DNA溶于二次水、TE buffer或哪一组kit的elution buffer)取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Blank。在右上方拉选Sample Type 选 DNA-50,在Sample ID位置输入样品名称,将样品混匀,取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Measure。
五、结果整理:
NanoDrop2000 软件在侦测一开始会询问档案欲存至何处,若未指定,则档案会存在上一个使用者的档案内。
六、注意事项:
1. 侦测后立即使用拭镜纸(Kimwipe类)擦拭台面。先取一张将上下台面的液体吸走,再将此laboratory wipe吸过样品的面反折到内部,折迭四次后以单方向多次擦拭台面(DNA 擦 5次,Protein 擦 20次)。
2. 同一滴液体只能做一次侦测,欲重复定量同一样品,请擦掉前一滴,重新取出一滴进行侦测。
3. 基本上核酸样品可使用1~2ul做测量,随各液体体积特性之不同会有不同体积需求,原则上不超过 2ul。并请使用2ul pipette避免体积不足导致液柱无法完整形成。唯蛋白质样品因呈色剂与蛋白质本身特性,务必使用2ul进行侦测。
4. 当软件跳出错误讯息时,请详细阅读并依指示进行障碍排除。最常发生的情形是在侦测过程液柱并未正确形成,软件会出现以下讯息。可先用肉眼观察液柱是否未完整连接上下台面,或样品内有泡泡,将上臂拉起后,擦掉该滴样品,再重新进行侦测,必要时可将样品体积加大至2ul。
5. 不可使用含有Hydrofluoric Acid (HF)之腐蚀样品,其它无腐蚀性之液体皆可使用。
品牌:
ND-2000是目前国内外实验室中使用最为广泛的一款微量分光光度计,其优越的性能、准确的结果赢得了广大用户的好评。
该产品可用于以下几个方面:
* 紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;
* 核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;
* 探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,可用于去除未能标记探针的样品;
* 细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值;
* 蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值;
* 蛋白标记检测:可检测被BCA、Bradford或Lowry标定的蛋白样品,自动画出标准曲线并计算出待测蛋白质浓度。
二、 产品简介
NanoDrop 2000超微量分光光度计是NanoDrop的最新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受专利保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。
NanoDrop 2000使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,检测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。
待测样品的均质性是NanoDrop 2000的最高要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为最佳,若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂,则改以55?C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保 2ul 具有代表性。
检测时选择不同检测模式,可以得到最快速的结果:
● Nucleic Acid ?C 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。
● UV-Vis ?C 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。
● A280蛋白质定量法 ?C 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。
● BCA、Bradford及Lowry ?C 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。
* 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在最佳时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线最多可有七个标准品,每个标准品最多可做五重复。
* 测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸(编号: 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。
浓度范围:
样品种类
最低浓度
最高浓度
(超过时请稀释样品)
再现性 (五重复以上)
核酸
2 ng/ul
15000 ng/ul (dsDNA)
12000 ng/ul (RNA)
浓度范围在 2-100 ng/ul 时,SD为 ± 2 ng/ul
浓度范围大于 100 ng/ul 时,CV为 ± 2%
纯BSA
0.10 mg/ml
100 mg/ml
浓度范围在 0.05-10 mg/ml 时,SD为 ± 0.10 mg/ml
浓度大于 10 mg/ml 时,CV为 ± 2%
蛋白质,以BCA方式定量
0.2 mg/ml
8.0 mg/ml
CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)
蛋白质,以modified Lowry方式定量
0.2 mg/ml
4.0 mg/ml
CV:± 2% (在可侦测的浓度范围内皆然)
蛋白质,以Bradford方式定量
100 ug/ml
8000 ug/ml
浓度范围在 100-500 ug/ml 时,SD为 ± 25 ug/ml
浓度大于 500 ug/ml 时,CV为 ± 5%
蛋白质,以Mini Bradford方式定量
15 ug/ml
100 ug/ml
浓度范围在 15-50 ug/ml 时,SD为 ± 4 ug/ml
浓度大于 50 ug/ml 时,CV为 ± 5%
三、技术参数:
1、波长范围: 190-840nm;
2、波长精度: 1nm;
3、分辨率: <1.8 nm (FWHM at Hg 253.7 nm);
4、其它: 1mm光程长度(可自动调整到0.05mm);
5、检测下限:2ng/μl(dsDNA);
6、检测上限:15000ng/μl(dsDNA);
7、吸光率精确度:0.002 absorbance (1mm光程);
8、吸光率准确性:2%(at 0.76 at 257 nm);
9、吸光率范围:0.02-300 (相当于10mm光程);
10、核酸检测周期:< 5s;
11、体积:14cm×20cm。
四、使用方法举例:
dsDNA:在主画面点选Nucleic Acid,计算机与仪器自动完成联机。依照DNA所溶于之液体准备该溶液(务必确认DNA溶于二次水、TE buffer或哪一组kit的elution buffer)取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Blank。在右上方拉选Sample Type 选 DNA-50,在Sample ID位置输入样品名称,将样品混匀,取出1.5 ul 点在侦测台上,放下上臂后再按Measure。
五、结果整理:
NanoDrop2000 软件在侦测一开始会询问档案欲存至何处,若未指定,则档案会存在上一个使用者的档案内。
六、注意事项:
1. 侦测后立即使用拭镜纸(Kimwipe类)擦拭台面。先取一张将上下台面的液体吸走,再将此laboratory wipe吸过样品的面反折到内部,折迭四次后以单方向多次擦拭台面(DNA 擦 5次,Protein 擦 20次)。
2. 同一滴液体只能做一次侦测,欲重复定量同一样品,请擦掉前一滴,重新取出一滴进行侦测。
3. 基本上核酸样品可使用1~2ul做测量,随各液体体积特性之不同会有不同体积需求,原则上不超过 2ul。并请使用2ul pipette避免体积不足导致液柱无法完整形成。唯蛋白质样品因呈色剂与蛋白质本身特性,务必使用2ul进行侦测。
4. 当软件跳出错误讯息时,请详细阅读并依指示进行障碍排除。最常发生的情形是在侦测过程液柱并未正确形成,软件会出现以下讯息。可先用肉眼观察液柱是否未完整连接上下台面,或样品内有泡泡,将上臂拉起后,擦掉该滴样品,再重新进行侦测,必要时可将样品体积加大至2ul。
5. 不可使用含有Hydrofluoric Acid (HF)之腐蚀样品,其它无腐蚀性之液体皆可使用。
品牌:
单光束分光光度计和双光束分光光度计的区别 123
问问陆2021-07-21
1、双光束分光光度计 以两束光一束通过样品、另一束通过参考溶液的方式来分析样品的分光光度计。这种方式可以克服光源不稳定性、某些杂质干扰因素等影响,还可以检测样品随时间的变化等;
2、单光束分光光度计是由一束经过单色器的光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行光强度测量。这种分光光度计的特点是:结构简单 价格便宜 主要适于做定量分析;
缺点是:测量结果受电源的波动影响较大,容易给定量结果带来较大误差,此外,这种仪器操作麻烦,不适于做定性分析
2、单光束分光光度计是由一束经过单色器的光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行光强度测量。这种分光光度计的特点是:结构简单 价格便宜 主要适于做定量分析;
缺点是:测量结果受电源的波动影响较大,容易给定量结果带来较大误差,此外,这种仪器操作麻烦,不适于做定性分析
HPLC检测器123
woodschairman2021-07-29
今天,导师问到我一个问题,
HPLC检测器与UV分光光度计的主要区别。
我说HPLC检测器的分光部件在样品流动池的后面,UV分光光度计的分光部件在样品的前面。
导师问我,那么分光部件的前置和后置各有什么优点和缺点呢?
我百思不得其解。
特地前来请教
可见分光光度计多少钱一台 可见分光光度计多少钱一台批发价格...123
keytechsz2021-08-06
一台可见分光光度计约2800——3400元
如果可见分光光度计能满足你的需求,就千万别买那种带紫外功能分光光度计
我单位一台581、一台721、一台751(751带紫外功能)
你瞧,用的频率是:“721”>“581”远>“751” (近5年了,那751我们只在外协时用过两次————外协时,只有自己受累,没有任何好处的)
而“751”每年的维护费用相当于四台“721”
如果可见分光光度计能满足你的需求,就千万别买那种带紫外功能分光光度计
我单位一台581、一台721、一台751(751带紫外功能)
你瞧,用的频率是:“721”>“581”远>“751” (近5年了,那751我们只在外协时用过两次————外协时,只有自己受累,没有任何好处的)
而“751”每年的维护费用相当于四台“721”
分光光度计测DNA浓度123
sunjay2021-08-11

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