Anti-eIF4E
GloboZymes Anti-eIF4E is a rabbit polyclonal antiserum produced against purified preparations of recombinant human kidney eIF4E. It reacts with eIF4E from diverse tissue sources. The antiserum is useful for Western blotting. For example, it is used at 1:500 dilution with 50 μg of bovine liver extracts. The antiserum is also effective for immunoprecipitation.
Synonyms: Polyclonal Antiserum to Eukaryotic Protein Synthesis Initiation Factor 4E; Anti-eIF-4E Polyclonal Antiserum
Background: The mRNA Cap-binding protein eIF4E is involved in an early rate limiting step in the initiation of protein synthesis. In response to growth factors and other extracellular stimuli, eIF4E is phosphorylated at Ser209. This phosphorylation increases the affinity of eIF4E to capped-mRNAs. The Mitogen-Activated Protein Kinase Interacting Kinases (Mnk’s) and an insulin-stimulated cytosolic Protamine Kinase (cPK) phosphorylate eIF4E at Ser209 in cells. In vitro, cPK also phosphorylates eIF4E at Thr210. eIF4E occurs in cells in an inactive form as a complex with inhibitory binding proteins (4EBP). It also occurs in an active form as part of the eIF4F complex which also contains eIF4A and eIF4G. In response to insulin and other extracellular stimuli, eIF4E is recruited to the eIF4F complex following its dissociation from 4EBP. Over-expression of eIF4E leads to cell transformation and tumorigenesis.
Figure: Western blot of a purified preparation of recombinant human kidney eIF4E with rabbit Anti-eIF4E Polyclonal Antiserum.
References: J Biol Chem 270, 14824-14828; J Biol Chem 270, 14597-14603; Biochime 76, 822-830; J Biol Chem 271, 11831-11837; J Biol Chem 270, 21684-21688
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①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器 。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5～10厘米。
④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。
⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
今天，导师问到我一个问题，
HPLC检测器与UV分光光度计的主要区别。
我说HPLC检测器的分光部件在样品流动池的后面，UV分光光度计的分光部件在样品的前面。
导师问我，那么分光部件的前置和后置各有什么优点和缺点呢？
我百思不得其解。
特地前来请教
可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是上海美析仪器采用最新的单片机技术，开发出能够进行定量测量(标准曲线测量，可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描，分析物质的特征波长，判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试，分析物质的相关特性);还有可以进行DNA/蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等等，广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。V-1500PC型可见分光光度计，波长范围:320nm-1100nm，能满足不同物质的测试。
1，被测液浓度过高造成透过样品的光信号检测不到，这种情况下可以通过稀释样品来完成；
2，测定时，样品室内的样品架在移动时没移动到位造成挡光；
3，仪器内部的光源不亮或光源没有进入单色器中。可以对照以上情况检查分析！
标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线,是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。在分光光度法分析中,被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系,水样测定的结果可以从标准曲线上查出。因此标准曲线制作的好坏,将会影响测定结果的准确度。1标准曲线的表达式标准曲线应是一条通过原点的直线,如果坐标上各浓度点基本在一条直线上可不进行回归处理,但在实验中不可避免地存在测定误差,往往会有一、二点偏离直线,此时可用最小二乘法进行回归分析,然后绘制曲线,通常称为回归直线,而代表回归直线方程叫回归方程,表达式为:y=bx+a(式中:b为直线斜率,a为y轴上的截距,x为被测溶液的浓度,y为吸光度,是多次测定结果的平均值)。在实际工作中,制作标准曲线的目的,是要借助它来查出水样中被测物质的浓度,而不是由x值通过回归方程去求得最可靠的y值,为了便于将观察到仪器响应信号值代入回归方程中直接计算试样的浓度或含量,勿需去绘制标准曲线再从曲线上查出被测物的浓度,改用下式计算;x=by+a(式中:a为x轴线上的截距,其它解释同前)。2标准曲线的参数标准曲线有3个参数,即相关系数r,斜率b
绘制标准曲线的意义
以某一特定波长条件下由分光光度计分别测出一系列不同溶度标准溶液然的吸光度值，以吸光光度值为纵坐标，相应的溶液浓度为横坐标，在坐标纸上可作出一条吸光度与浓度成正比通过原点的直线，称作标准曲线。~~~绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。。展开
2、单光束分光光度计是由一束经过单色器的光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行光强度测量。这种分光光度计的特点是：结构简单 价格便宜 主要适于做定量分析；
缺点是：测量结果受电源的波动影响较大，容易给定量结果带来较大误差，此外，这种仪器操作麻烦，不适于做定性分析
1、光源不同：可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源,同时还多了这两个光源灯的切换部件.这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端.也正是因为光源的不一样,紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了.
2、光学器件的不同：由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用石英光学部件.同时由于这个原因,在比色皿的选择上也就有不同了,可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿,而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了.
3、接收器的不同：由于紫外可见分光光度计多了紫外波,所以在接收器的选择上也就不一样了.多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了.
