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Biotin Conjugated Wisteria floribunda Lectin (Japanese Wisteria) -WFA-1mg

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HepG2细胞说明书分析方法 123
doudoukitty2021-07-30
实验室养的HepG-2细胞自从端午节消化(不正常,胰酶消化30多分钟)后,发现HepG-2细胞背景很脏,排除显微镜的因素,可在镜下看到大量如图物质,细胞虽然状态不好,但依然在生长,这是污染么?图一是高倍镜下的物质图二是低倍镜,还是培养瓶底部的还是血清的问题啊?


显微镜有很多种 常见的显微镜,如:LJ-TS01 体视显微镜,LJ-SZM 实体显微镜,三目显微镜LJ-ST03,LJ-CL01拍照测量显微镜 ,LJ-CLP03金相显微镜 ,LJ-HD01 高清显微镜, LJ-HS01 HDMI显微镜,LJ-DSX01电视显微镜,LJ-SPX01视频显微镜, LJ-DZF电子放大显微镜,LJ-DZX01 数码显微镜等。显微镜,要根据自己的需求,寻找性价比高的显微镜,才能实现好用又不贵。
(一)、物镜

物镜是决定显微镜性能的最重要部件,安装在物镜转换器上,接近被观察的物体,故叫做物镜或接物镜。

1、物镜的分类

物镜根据使用条件的不同可分为干燥物镜和浸液物镜;其中浸液物镜又可分为水浸物镜和油浸物镜(常用放大倍数为90—100倍)。

根据放大倍数的不同可分为 低倍物镜(10倍以下)、中倍物镜(20倍左右)高倍物镜(40—65倍)。

根据像差矫正情况,分为消色差物镜(常用,能矫正光谱中两种色光的色差的物镜)和复色差物镜(能矫正光谱中三种色光的色差的物镜,价格贵,使用少)。

2、物镜的主要参数:

物镜主要参数包括:放大倍数、数值孔径和工作距离。

①、放大倍数是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的比值。它指的是长度的比值而不是面积的比值。例:放大倍数为100×,指的是长度是1μm的标本,放大后像的长度是100μm,要是以面积计算,则放大了10,000倍。

显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。

②、数值孔径也叫镜口率,简写NA 或A,是物镜和聚光器的主要参数,与显微镜的分辨力成正比。干燥物镜的数值孔径为0.05-0.95,油浸物镜(香柏油)的数值孔径为1.25。

③、工作距离是指当所观察的标本最清楚时物镜的前端透镜下面到标本的盖玻片上面的距离。物镜的工作距离与物镜的焦距有关,物镜的焦距越长,放大倍数越低,其工作距离越长。例:10倍物镜上标有10/0.25和160/0.17,其中10为物镜的放大倍数;0.25为数值孔径;160为镜筒长度(单位mm);0.17为盖玻片的标准厚度(单位 mm)。10倍物镜有效工作距离为6.5mm,40倍物镜有效工作距离为0.48mm 。

3、物镜的作用是将标本作第一次放大,它是决定显微镜性能的最重要的部件——分辨力的高低。

分辨力也叫分辨率或分辨本领。分辨力的大小是用分辨距离(所能分辨开的两个物点间的最小距离)的数值来表示的。在明视距离(25cm)之处,正常人眼所能看清相距0.073mm的两个物点,这个0.073mm的数值,即为正常人眼的分辨距离。显微镜的分辨距离越小,即表示它的分辨力越高,也就是表示它的性能越好。

显微镜的分辨力的大小由物镜的分辨力来决定的,而物镜的分辨力又是由它的数值孔径和照明光线的波长决定的。

当用普通的中央照明法(使光线均匀地透过标本的明视照明法)时,显微镜的分辨距离为d=0.61λ/NA

式中d——物镜的分辨距离,单位 nm。

λ——照明光线波长,单位 nm。

NA ——物镜的数值孔径

例如油浸物镜的数值孔径为1.25,可见光波长范围为400—700nm ,取其平均波长550 nm,则d=270 nm,约等于照明光线波长一半。一般地,用可见光照明的显微镜分辨力的极限是0.2μm。

(二)、目镜

因为它靠近观察者的眼睛,因此也叫接目镜。安装在镜筒的上端。

1、目镜的结构

通常目镜由上下两组透镜组成,上面的透镜叫做接目透镜,下面的透镜叫做会聚透镜或场镜。上下透镜之间或场镜下面装有一个光阑(它的大小决定了视场的大小),因为标本正好在光阑面上成像,可在这个光阑上粘一小段毛发作为指针,用来指示某个特点的目标。也可在其上面放置目镜测微尺,用来测量所观察标本的大小。

目镜的长度越短,放大倍数越大(因目镜的放大倍数与目镜的焦距成反比)。

2、目镜的作用

是将已被物镜放大的,分辨清晰的实像进一步放大,达到人眼能容易分辨清楚的程度。

常用目镜的放大倍数为5—16倍。

3、目镜与物镜的关系

物镜已经分辨清楚的细微结构,假如没有经过目镜的再放大,达不到人眼所能分辨的大小,那就看不清楚;但物镜所不能分辨的细微结构,虽然经过高倍目镜的再放大,也还是看不清楚,所以目镜只能起放大作用,不会提高显微镜的分辨率。有时虽然物镜能分辨开两个靠得很近的物点,但由于这两个物点的像的距离小于眼睛的分辨距离,还是无法看清。所以,目镜和物镜即相互联系,又彼此制约。
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目前商品化的高端透射电镜,最大放大倍数在2百万倍左右,极限分辨率在0.1纳米左右。
扫描透射模式下标称的放大倍数最大可达上亿倍,不过实际对放大倍数的定义是有差别的,不好比较。
通常用来比较设备有效放大能力的是分辨率而不是放大倍数。
蔡司啊还有国产的有的也很好,但要看你主要干什么用,百度一下找找。
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显微镜日常维护和注意事项
1.所有镜头表面必须保持清洁,落在镜头表面的灰尘,可用吹风球吹去,也可用软毛刷轻轻的掸去掉。
2.当镜头表面沾有油污或指纹时,可用脱脂棉蘸少许3:7无水乙醇和乙醚的混合液轻轻擦试。
3.不能用有机溶液清擦其它部件表面,特别是塑料零件,可用软布蘸少量中性洗涤剂清擦。
4.在任何情况下操作人员不能用棉团、干布块或干镜头纸擦试镜头表面,否则会刮伤镜头表面,严重损坏镜头,也不要用水擦试镜头,这样会在镜头表面残留一些水迹,因而可能滋生霉菌,严重损坏显微镜。
5.仪器工作的间歇期间,为了防止灰尘进入镜筒或透镜表面,可将目镜留在镜筒上,或盖上防尘塞,并用防尘罩将仪器罩住。
6.仪器使用完毕,必须用防尘罩盖上,并入置在干燥的工作橱内,在其附近不得存入有挥发性的化学药品,以防仪器锈蚀。
7.显微镜移动时应轻拿轻放,避免碰撞。
看不到病毒的。

解释如下:
因为病毒很小。多数单个病毒粒子的直径在100nm左右,也就是说,把10万个左右的病毒粒子排列起来才可能用肉眼勉强看得到。
 病毒如此细小,绝大多数病毒必须借助电子显微镜才能观察,电子显微镜的分辨率是光学显微镜的1000倍。不同病毒间大小差异很大。最小的如植物的联体病毒(Geminiviruses)直径仅18-20nm,最大的动物痘病毒(Poxviruses)大小达300-450nm×170-260nm,最长的如丝状病毒科(Filoviridae)病毒粒子大小为80nm×790-14000nm。
光学显微镜的分辨距离为d=0.61λ/NA 式中
d——物镜的分辨距离,单位 nm。
λ——照明光线波长,单位 nm。
NA ——物镜的数值孔径
例如油浸物镜的数值孔径为1.25,可见光波长范围为400—700nm ,取其平均波长550 nm,则d=270 nm,约等于照明光线波长一半。一般地,用可见光照明的显微镜分辨力的极限是0.2μm也就是200nm,大于病毒的直径,因此用光学显微镜是看不到病毒的。
细菌就比病毒大得多,单个球菌的直径约在0.8~1.2μm左右,大多数杆菌中等大小长2~5μm,宽0.3~1μm,在光学显微镜的可观测范围内。
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简易显微镜如何制作? 123
静寂丶烟岭丿2017-12-03
如何制作一个简易显微镜?已有:一个5mm凸透镜一个25mm凸透镜。
请问如何制作一个简易的显微镜?
最好有一个光路图
物镜和目镜的距离如何计算?
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