| ||||||||
| ||||||||
| Copyright © 1996 - , Metkinen Chemistry, Microkatu 1,Microtower osa M,70210 Kuopio,Finland,Phone: +358 40 736 4885, +358 40 554 2218.E-mail: info@metkinenchemistry.com | ||||||||
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
成像原理:
光学显微镜
光学显微镜主要由目镜、物镜、载物台和反光镜组成。目镜和物镜都是凸透镜,焦距不同。物镜的凸透镜焦距小于目镜的凸透镜的焦距。物镜相当于投影仪的镜头,物体通过物镜成倒立、放大的实像。目镜相当于普通的放大镜,该实像又通过目镜成正立、放大的虚像。经显微镜到人眼的物体都成倒立放大的虚像。反光镜用来反射,照亮被观察的物体。反光镜一般有两个反射面:一个是平面镜,在光线较强时使用;一个是凹面镜,在光线较弱时使用,可会聚光线。
电子显微镜
电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。
电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的最小间距来表示。20世纪70年代,透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米(人眼的分辨本领约为0.1毫米)。现在电子显微镜最大放大倍率超过300万倍,而光学显微镜的最大放大倍率约为2000倍,所以通过电子显微镜就能直接观察到某些重金属的原子和晶体中排列整齐的原子点阵。
详见百度百科:http://baike.baidu.com/view/2921.htm
历经3年多的协同奋战,北京大学联合中国人民解放军军事医学科学院组成跨学科团队,成功研制新一代高速高分辨微型化双光子荧光显微镜,重量仅为2.2克。该科研团队通过这一微型显微镜获取了小鼠在自由行为过程中大脑神经元和神经突触活动清晰、稳定的图像。原始论文于5月29日在线发表于《自然》杂志子刊NatureMethods。
5月31日上午的发布会上,程和平院士进行了详细介绍。新一代微型化双光子荧光显微镜体积小,重仅2.2克,适于佩戴在小动物头部颅窗上,实时记录数十个神经元、上千个神经突触的动态信号。
在大型动物上,还可望实现多探头佩戴、多颅窗不同脑区的长时程观测。相比单光子激发,双光子激发具有良好的光学断层、更深的生物组织穿透等优势,其横向分辨率达到0.65μm,成像质量与商品化大型台式双光子荧光显微镜可相媲美,远优于目前领域内主导的、美国脑科学计划核心团队所研发的微型化宽场显微镜。
采用双轴对称高速微机电系统转镜扫描技术,成像帧频已达40Hz(256*256像素),同时具备多区域随机扫描和每秒1万线的线扫描能力。此外,采用自主设计可传导920nm飞秒激光的光子晶体光纤,该系统首次实现了微型双光子显微镜对脑科学领域最广泛应用的指示神经元活动的荧光探针(如GCaMP6)的有效利用。同时采用柔性光纤束进行荧光信号的接收,解决了动物的活动和行为由于荧光传输光缆拖拽而受到干扰的难题。未来,与光遗传学技术的结合,可望在结构与功能成像的同时,精准地操控神经元和神经回路的活动。
微型化双光子荧光显微成像改变了在自由活动动物中观察细胞和亚细胞结构的方式,可用于在动物觅食、哺乳、跳台、打斗、嬉戏、睡眠等自然行为条件下,或者在学习前、学习中和学习后,长时程观察神经突触、神经元、神经网络、远程连接的脑区等多尺度、多层次动态变化。
《中国科学报》记者了解到,该成果在2016年底美国神经科学年会、2017年5月冷泉港亚洲脑科学专题会议上报告后,得到包括多位诺贝尔奖获得者在内的国内外神经科学家的高度赞誉。
冷泉港亚洲脑科学专题会议主席、美国著名神经科学家加州大学洛杉矶分校的AlcinoJSilva教授在评述中写道,“从任何一个标准来看,这款显微镜都代表了一项重大技术发明,必将改变我们在自由活动动物中观察细胞和亚细胞结构的方式。它所开启的大门,甚至超越了神经元和树突成像。系统神经生物学正在进入一个新的时代,即通过对细胞群体中可辨识的细胞和亚细胞结构的复杂生物学事件进行成像观测,从而更加深刻地理解进化所造就的大脑环路实现复杂行为的核心工程学原理。毫无疑问,这项非凡的发明让我们向着这一目标迈进了一步。”
据悉,目前,该研发团队正在领衔建设“多模态跨尺度生物医学成像”十三五国家重大科技基础设施,积极参与即将启动的中国脑科学计划。可以期待,微型化双光子荧光显微成像系统将为实现“分析脑、理解脑、模仿脑”的战略目标发挥不可或缺的重要作用。
激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是近年来迅速发展起来的一种新型高精度显微镜,不仅用于观察经固定的各种细胞和组织结构,而且还可对活细胞的形态、结构,离子的实时动态等进行观察和定量荧光测定,以及定量图像分析。目前国内LSCM技术应用前景广泛,并且发表众多具影响力的文章。为了推动LSCM技术的创新发展、促进相关人员技术的提升,我们特此制定激光共聚焦显微镜高级应用培训,面向生物医药领域从事成像技术方法创新的科研人员和成像平台管理者,充分发挥现有成像设备的作用,通过理论加实践的系统学习,最大限度地掌握该技术的使用方法,独立判断与排除科研常见问题和障碍。
2017年8月26日星期六
08:30-08:45报道
08:45-08:50欢迎致辞
08:50-09:05清华大学细胞影像中心介绍
09:05-09:45光学显微镜的选择和如何拍出高质量共聚焦图像王文娟
09:45-10:15休息与讨论
10:15-11:00多色影响与荧光光谱扫描及线性分析孙悦
11:00-11:45荧光漂白后恢复(FRAP)冯倩倩
11:50-13:30午餐
13:30-16:30上机操作培训(根据情况进行分组操作)
8:30-8:45学习内容回顾与总结
2017年8月27日星期日
09:00-09:15培训回顾
09:15-10:00荧光共振能量转移(FRET)王瑾瑜
10:00-10:45转盘共聚焦显微镜成像张彦丽
10:40-11:00休息与讨论
11:00-11:50图像处理基础与荧光共定位分析王文娟
11:50-13:30午餐
13:30-16:30上机操作培训(根据情况进行分组操作)
8:30-8:45学习内容回顾与总结
2017年8月28日星期一
09:00-09:30培训回顾与总结
09:30-10:00培训测验
10:00-10:30颁发证书
10:30-10:40合影
清华大学细胞影像中心是在生命学科校级平台(清华大学生物医学测试中心、清华大学蛋白质研究技术中心)范围内、跨中心、多平台联合组建的虚体技术中心,简称细胞影像中心。中心包括的平台有:生物医学测试中心细胞生物学平台光学显微镜机组、共享仪器平台光学显微镜机组、尼康生物影像中心、蛋白质研究技术中心细胞影像平台。细胞影像中心作为一个综合型光学成像平台,以科研服务为宗旨,主要提供细胞生物学影像及分析测试服务。包含的仪器有:激光扫描共聚焦(Confocal:Zeiss、Nikon、Leica、Olympus)、转盘共聚焦(SpinningDiskConfocal)、激光显微切割、双光子显微镜、超高分辨SIM/STORM/STED、全内反射(TIRF)荧光显微镜、荧光寿命成像-荧光相关光谱系统(FCS/FLIM)、高分辨活细胞成像系统、活细胞工作站、全自动数字玻片扫描系统和图像处理工作站(软件有Imaris,Image-ProPremier/Plus,Huygens,AutoQuant,MetaMorph和NIS-Elements等),为实验提供一站式的解决方案。
转盘共聚焦显微镜拍摄,发表于Eph/ephrinsignalingmaintainstheboundaryofdorsalforerunnercellclusterduringmorphogenesisofthezebrafishembryonicleft-right
使用Nikon超分辨率显微镜拍摄,N-SIM显微镜显示NRK细胞稳定的表达线粒体标记20-GFP。标尺,1μm。WangC,DuW,YuLi*,etal.Dynamictubulationofmitochondriadrivesmitochondrialnetworkformation[J].Cellresearch,2015,25(10):1108.
使用ZeissLSM710激光共聚焦显微镜拍摄,图为人眼晶状体祖细胞中的晶状体球蛋白聚集体。绿色:绿色荧光蛋白和晶状体球蛋白融合蛋白;红色:P62蛋白;蓝色:细胞核;标尺:10μm。发表于Lanosterolreversesproteinaggregationincataracts.Nature,2015(523),607-611
使用ZeissLSM780激光共聚焦显微镜拍摄,图为酿酒酵母十二号染色体的设计与合成。发表于ZhangW,ZhaoG,LuoZ,etal.EngineeringtheribosomalDNAinamegabasesyntheticchromosome.[J].
王文娟博士清华大学细胞影像中心主任,高级工程师。毕业于北京大学,美国纽约大学医学中心博士后,主要从事光学显微成像和图像处理技术。技术专长:1.光学显微镜技术用于生物医学的研究,包括激光共聚焦、超高分辨、全内反射和荧光寿命成像等技术。2.单分子成像光学仪器搭建与单分子荧光成像3.图像处理、展示和数据分析。
冯倩倩共享仪器平台主管,工程师。技术专长:激光共聚焦显微镜影像技术
孙悦共享仪器平台主管,工程师。技术专长:激光共聚焦显微镜、全自动数字玻片扫描和双光子成像技术
王瑾瑜尼康生物影像中心负责人,工程师。技术专长:光诱导蛋白相关技术(FRET、FRAP、PA-GFP等)和超高分辨率技术
张彦丽张彦丽,工程师。技术专长:转盘共聚焦成像、双光子成像
培训时间:2017年8月26日-28日
报到时间:2017年8月25日12:00-18:002017年8月26日08:00-08:45
培训地点:清华大学生物技术馆会议室
报名费用:
单人:3000元/人
两人:2400元/人
三人及以上:2000元/人
(含注册费、培训费、资料费、茶歇费、午餐费)主办方可协助学员预定住宿(费用自理,需提前一周预定)
报名截止时间:8月20日
在线报名链接:http://www.damor.cn/app/wap-activity/sign-up/index.html
总放大倍数 = 物镜放大倍数 * 数字放大倍数
物镜放大倍数 = 大物镜放大倍数 * 镜头放大倍数
数字放大倍数 = 监视器尺寸 * 25.4/CCD靶面对角线尺寸大小
CCD靶面对角线尺寸大小:1/3 " 为6mm1/2 " 为8mm 2/3 " 为11mm
例:0.7X - 4.5X的标配主机配1/3 "CCD摄像机配14 " 监视器
数字放大倍数:14 * 25.4 / 6 = 59.3X
总放大倍数:(0.7X - 4.5X) * 59.3=41.5X - 266.9X
那么照此配置,总的放大倍率就在41.5X到266.9X之间连续可调。





Catalogue number: 203-41IUPAC name: 2"-Amino-2"-deoxyinosinePurity: > 99%Description: white to off-white crystalsStorage of dry compound: 3 years at +4ºCPrice and Ordering InformationFor bulk quantities please enquire