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活体荧光成像一般有三种标记方法:荧光蛋白标记、荧光染料标记以及量子点标记。荧光蛋白适用于标记肿瘤细胞、病毒、基因等。通常使用GFP/EGFP/RFP等。荧光染料常用Cy3,Cy5以及Cy7。可以标记抗体、多肽、小分子药物。量子点标记是一种新的标记方法,楼主可自行查询
谢谢!
查了有关文献:
1.2.5裸鼠皮下移植瘤模型的建立
裸鼠,6~7周龄,体重(20±2)g,雌性。取对数生长期的A549细胞和A549-luc细胞制备单细胞悬液,PBS调整细胞浓度为2.5×107/mL。经台盼蓝染色测定细胞活性后,取200μL悬液接种于裸鼠右背侧近腋部皮下,共接种3只。采用美国精诺真活体成像系统(IVIS200)观测皮下肿瘤细胞的生长情况。观测前每只鼠腹腔注射150μL30mg/mL荧光素底物,注射后10~25min进行活体成像。每周1次,连续4周。
1.2.6SCID鼠尾静脉移植瘤模型的建立
SCID小鼠,6~7周龄,体重为(20±2)g,雌性。取对数生长期A549细胞和A549-luc细胞制备单细胞悬液,PBS调整细胞浓度至2.5×107/mL。经台盼蓝染色测定细胞活性后,取200μL悬液尾静脉注射SCID鼠,共接种3只。采用美国精诺真活体成像系统(IVIS200)观测体内肿瘤的生长和转移情况。观测前每只鼠腹腔注射150μL30mg/mL荧光素底物,注射后10~25min进行活体成像。每3天1次,连续观察4周。
但是,我想问一下,这个活体成像的话,用哪种方式建模更好呢。活体成像一般是怎样收费的?图片出来的话,一般选取哪几个点弄比较好呢?谢谢大家!
丙酮法属于溶液法,是以有机溶剂稀释或溶解聚氨酯(或预聚体),再进行乳化的方法。在溶剂存在下,预聚体与亲水性扩链剂进行扩链反应,生成较高分子量的聚氨酯,反应过程可根据需要加人溶剂以降低聚氨酯溶液粘度,使之易于搅拌,然后加水进行分散,形成乳液,最后蒸去溶剂。溶剂以丙酮、甲乙酮居多,故称为丙酮法。此法的优点是丙酮、甲乙酮的沸点低、与水互容、易于回收处理,整个体系均匀,操作方便,由于降低粘度同时也降低了浓度,有利于在乳化之前制得高分子量的预聚体或聚氨酯树脂,所得乳液的膜性能比单纯预聚体法的好。而预聚体法由于粘度的限制,为了便于剪切分散,预聚体的分子量不能太高,可能会影响水性聚氨酯性能,例如粘度高则乳化困难,粒径大,乳液稳定性差;预聚体分子量小则NCO基团含量高,乳化后形成的脲键多,胶膜硬,缺乏柔软性。
还有你所用的荧光物质也有关系,Cy5以上应该可以活体成像。只看药物器官分布的话LZ可以用普通的小白鼠
然后剖腹观察,染料用Cy3或者其他普遍的FITC都行。
(1)普通凝胶成像分析系统:可以对蛋白电泳凝胶,DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析,样品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸监测;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染色的蛋白质凝胶如考染等。(或UV,EB和有色及可见样品成像);(2)化学发光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、紫外-荧光、有色及可见样品成像;(3)多色荧光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像;(4)多功能活体成像分析系统:UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像和离体组织和小型动物,及大型型动物。
我知道所以你知道!
图2 光声断层成像系统构架图
图3 光声显微镜系统 (a)多轴光纤;(b)聚焦透镜;(c)锥型透镜;(d)光学聚焦镜和超声探测器;(e)水箱;(f)动物固定支架;(g)采样器和参考光纤;(h)温度控制器;(i)电机电源;(j)计算机;(k)数字示波器;(l)控制电机的计算机
目前光声成像的主要研究分支有光声断层成像(Photoacoustic tomography, PAT,见图2)、光声显微成像(Photoacoustic microscopy, PAM,见图3)、光声内窥成像(Intravascular photoacoustic imaging, IVPAI)。光声断层成像清晰地探测到活体小鼠脑血管分布(见图4),根据血容量、血流、血氧等参数反映了脑功能信息。光声成像技术将为脑功能研究提供新的技术手段。基于光声成像反映光吸收的特性,研究者发展了多波长光声成像技术并且应用于肿瘤成像,获得高分辨率的肿瘤新生血管的形态学信息、由血氧饱和度反映的肿瘤代谢信息。光声成像技术为肿瘤的早期诊断与治疗监控提供了强大的技术支持。多波长光声成像在检测活体深层荧光蛋白表达以及基因活性方面取得令人振奋的效果。多波长内窥光声成像针对动脉粥样硬化斑块进行检测,通过光谱解析获得了动脉粥样硬化斑块组份信息(见图5),为光声内窥成像应用于心脑血管疾病检测奠定了实验基础。随着光声显微镜的出现,光声成像发展到了一个新的阶段。光声显微镜将横向分辨率提高了一个数量级达到了45µm。利用光声显微成像技术不仅可以获得高分辨率黑色素瘤的实体和周围的微血管的形态结构图像(见图6),还可以得到活体动物的血氧饱和度信息(见图7)。亚波长光学分辨率光声显微镜的出现将光声成像技术的分辨率提高到前所未有的高度,达到了221 nm。光学分辨率的光声显微镜(OR-PAM)可以轻而易举地对黑色素瘤细胞和血红细胞进行单细胞成像。光声纳米探针的发展为光声成像增添了活力。基于外源光声纳米探针,研究者们发展了光声分子成像和光声治疗。光声分子成像实现了在磁环境中对在血液中循环的肿瘤细胞进行探测以确定肿瘤细胞是否转移,最后发展成了光声流式细胞仪。
图4 光声脑部损伤恢复过程的连续监控成像,(a)~(f)分别为小鼠损伤后第1天、3天、5天、7天、9天和11天的脑部皮层血管光声重建图像;(g)为损伤恢复后小鼠脑部解剖照片
图5 通过光谱解析方法获得的动脉粥样硬化血管内窥光声图像
图6 光声显微镜监测小鼠耳部黑色素瘤生长过程 (a)注射黑色素瘤前小鼠耳部血管的光声显微成像结果;(b)注射部位的在体光声成像,RBC表示红细胞;(c)注射黑色素瘤细胞4天后血管网络光声图像,MT表示黑色素瘤;(d)光学显微成像结果。
图7 使用第二代光学分辨率的显微镜检测老鼠耳朵中血氧含量
作为新一代的无损医学成像技术,光声成像可以无标记地对单个细胞成像、可以对血管形态的高分辨成像、对不同组织的成份进行解析和对血液参数高特异性的功能检测。光声成像实现了从细胞到组织结构的多尺度示踪及功能成像。光声成像可以用于研究动物体脑功能、肿瘤细胞转移和肿瘤形态结构,生理、病理特征,血流异常、药物代谢功能、深层荧光蛋白表达、基因活性等方面的内容,为生物医学应用领域提供了重要研究及监测手段,具有良好的发展前景和广泛的生物医学应用潜力。预期光声成像技术将会引起基础生命科学以及临床医学影像领域的变革。向左转|向右转
还有你所用的荧光物质也有关系,Cy5以上应该可以活体成像。只看药物器官分布的话LZ可以用普通的小白鼠
然后剖腹观察,染料用Cy3或者其他普遍的FITC都行。

