凝胶成像主要用于蛋白、核酸凝胶成像及分析,系统提供白光和紫外光两种光源进行拍摄凝胶,由系统自带的图像捕捉软件捕捉拍摄图像,然后由系统自带的图像分析软件对拍摄的图像进行分析。
中文名
类属
成像仪
应用
生物医学、医药领域
功能
自动寻找凝胶条带
图像分析程序,适用于ID胶、斑点/狭缝印迹、平板、菌落、放射自显影、多排胶、蛋白胶、GFP、PCR、考马斯亮蓝及银染的胶及ZYMA胶;可进行凝胶图像分析、克隆计数分析、手动条带定量和斑点分析。
凝胶分析软件主要应用于生物医学、医药领域,为科研人员提供了分析凝胶图像及其它生物学条带的途径。
1.凝胶图像剪辑处理,标记;
2.自动寻找凝胶条带;
3.与公用的标准条带或自选的标准条带比较;
4.条带(泳道)迁移路径的校正;
5.核酸、蛋白的处理,计算相应的分子量等数值;
6.详细的分析结果可输出成EXCEL格式,根据需要编辑。
从整体总的来说凝胶成像(系统)可应用于:蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析
(1)分子量定量
对于一般常用的DNA胶片,利用分子量定量功能,通过对胶上DNAMarker条带的已知分子量注释,自动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。通过这种方法所得到的结果较肉眼观察估计要准确很多。
(2)密度定量
一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)浓度的方法是紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。利用凝胶成像系统和软件,先将DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带进行密度标定以后,可以方便的单击其他未知条带,根据与已知条带的密度做比较,可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于对PAGE蛋白胶条带的浓度测定。
(3)密度扫描
在分子生物学和生物工程研究中,我们最常用到的是对蛋白表达产物占整个菌体蛋白的百分含量的计算。传统的方法就是利用专用的密度扫描,但利用生物分析软件结合现在实验室常规配备的扫描仪或者直接用白光照射的凝胶成像就能完成此项工作。
(4)PCR定量
PCR定量主要是指,如果PCR实验扩增出来的条带不是一条,那么可以利用软件计算出各个条带占总体条带的相对百分数。就此功能而言,与密度扫描类似,但实际在原理上并不相同。PCR定量是对选定的几条带进行相对密度定量并计算其占总和的百分数,密度扫描时并对选择区域生成纵向扫描曲线图并积分。
(1)普通凝胶成像分析系统:可以对蛋白电泳凝胶,DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析,样品包括:EB、SYBRGreen、SYBRGold、TexasRed、GelStar、Fluoroscecin、RADIantRed等染色的核酸监测;以及CoomassieBlue、SYPROOrange、各种染色的蛋白质凝胶如考染等。(或UV,EB和有色及可见样品成像);
(2)化学发光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、紫外-荧光、有色及可见样品成像;
(3)多色荧光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像;
(4)多功能活体成像分析系统:UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像和离体组织和小型动物,及大型型动物。
凝胶成像仪属于高科技产品,是需要软、硬件紧密一致配合的高端分子生物分析仪器。主要用于科研、医疗、教学等项目,目前国内进口品牌和国产品牌的市场占有率差不多。
目前凝胶成像厂家很多,市场上常见的凝胶成像如:
进口品牌美国的市场上见的是相对比较多的有:UVP、伯乐、alpha、SIM、KODAK、GE、Wealtec等;德国品牌主要有:Royal、Raytest等;英国品牌:UVI、Fedbio等;法国品牌:VL、VilberLourmat等;以色列DNR;日本品牌:富士、ATTO等;荷兰Isogen等等。目前这些国内进口品牌和国产品牌的市场占有率差不多,但是价格高于国产品牌。
中国本土企业也掌握了凝胶成像核心技术,性能方面不比进口差,价格又比进口的低。
自动对焦(AutoFocus)凝胶成像分析系统,解决了学生在拍摄凝胶照片过成中,经常发生的被拍摄照片的亮度和对比度,焦距不准使照片不清晰的问题,拍摄过程只需在被摄凝胶上拉一个框10秒搞定被拍摄照片的亮度,对比度,自动对焦和曝光时间,再只需轻点一下拍摄按键就搞定了凝胶照片的拍摄。
简介
自动对焦(AutoFocus)是利用物体光反射的原理,将反射的光被相机上的传感器CCD接受,通过计算机处理,带动电动对焦装置进行对焦的方式叫自动对焦.它多分为二类:一是主动式,另一个则是被动式。
分类
1、主动式自动对焦:相机CCD上的红外线发生器、超声波发生器发出红外光或超声波到被摄体。相机CCD上的接受器接受反射回来的红外光或超声波进行对焦,其光学原理类似三角测距对焦法,广泛用于各种平视取景相机.主动式对焦对斜面,光滑面对焦困难.对亮度大,远距离的被摄体对焦困难.这是由于发出的光被反射到其它方向,或达不到被摄体所至.主动式由于是相机主动发出光或波,所以可以在低反差、弱光线下对焦.对细线条的被摄体,对动体都能自动对焦.缺点是当被摄体能吸收光或波时对焦困难,还会被玻璃反射故透过玻璃对焦困难。
2、被动式自动对焦:即直接接收分析来自景物自身的反光,进行自动对焦的方式.这种自动对焦方式的优点是;自身不要发射系统。对具有一定亮度的被摄体能理想的自动对焦,在逆光下也能良好的对焦.对远处亮度大的物体能自动对焦。但缺点是对细线条的被摄体自动对焦较困难.在低反差,弱光下的对焦困难.对动体自动对焦能力差.对含偏光的被摄体自动对焦能力差.黑色物体或镜面的对焦能力差。主动、被动式自动对焦方式各有千秋,好在我们首创的凝胶成像自动对焦拍摄系统上有二种自动对焦方式,可以互补使用,自动切换,发挥其强项,克服其弱点。
以某品牌凝胶成像为例:
技术参数
全自动对焦凝胶成像仪
n数码CCD:数字专业低照度积分CCD
n检测灵敏度:可测出低至0.02ng的核酸
n效像素:2592×1944(可自动转换为1392×1040)
n镜头:采用日本Computar高通透自动变焦镜头F=1:1.2,12.5~75mm,根据要求随意缩放凝胶尺寸
n数据位数:16bit(65536灰阶)
n像数整合:1×1,2×2,3×3,4×4
n像素点大小:4.4μm×4.4μm
n信噪:≥60dB
n对焦方式:全自动光学数码对焦(可全自动亮度,对比度,自动对焦和曝光时间)
快门控制:电子快门
n曝光时间:4ms至60分钟长时间曝光,可连续采集和存储全部图片,并具有图像校正功能
n传输接口:单一USB2.0可完成控制传输与图像采集,即插即用的特性使得整套图像系统的安装、连接、维护变得尤其简单、方便和快捷。
n割胶装置:专用观察和割胶装置(可视角度与物体为90°)
n滤色镜片:专为多种荧光染料凝胶成像特性研制的镀膜滤镜标配590nmEB/SYBRGreen,BP
n机箱控制:可通过机箱面板进行变焦、焦距、光圈、透射紫外灯及反射灯的全自动控制
n电脑控制:高度程序化(电脑控制自动对焦/暗箱/电源/紫外及白光灯的开关/光圈/变焦/焦距)
n定时关机:可自行设置定时关机功能(0—1小时),有效延长紫外灯管和紫外玻璃的使用寿命
n仪器的开门方式:下拉式开门和抽屉式载样台
n紫外透射载样板:透射波长:302nm(254nm、365nm为选配件),尺寸:20cm×25cm(特殊规格可定制)
n白光反射:冷光,电压12v,
n白光透射载样板:冷光,电压12v,,机箱内部折叠式20cm×25cm(特殊规格可定制)
n外观尺寸:长50CM×宽37CM×高82CM
n应用范围:可用于DNA/RNA凝胶、蛋白质凝胶、印迹杂交膜放射自显影胶牌、酶标板、薄层层析板、培养皿的成像及分析
130万、140万、500万高像素专业数字CCD摄像头,分析图像更清晰,分辨率更高。
专业软件系统支持的全电脑控制触摸控制面板双控制体系开关的四种302nmUV、254nmUV、365nmUV及白光,扩展了应用范围。
触摸控制电源开关、光源控制、光圈、聚焦等观察和拍摄工作,实现污染现场和电脑操作现场隔离,防止交叉污染,确保操作者安全,抽屉式样品载物台,方便取放样品。先进的暗箱技术,操作安全,防辐射:密封效果好保证了图片的获取和UV的传说。
紫外工作台及主机装备有排风风扇,主机内有独家专利设计的密闭排风通道,有效降低室内温度,最大程序减小对样品的影响,避免测试过高使胶弥散过快。
领成凝胶成像可直接切胶:首先按系统中间的观察窗,打开装有进口防紫外玻璃的观察窗口,然后打开左右两侧专为割胶所设计的小门,即可进行切胶操作。
,