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제품특징
□ 특징
● CRISPR/Cas9 genome editing을 위한 sgRNA의 합성 (in vitro transcription)
● 간편한 프로토콜로 고품질, 고수율 (12ug 이상)의 sgRNA 제작 가능
● 합성한 sgRNA는 추후 delivery (transfection, electroporation)에 이용 가능
● Screening Kit에 포함되어있는 Cas9 단백질과 조합하여, 실제 세포 실험 전에 sgRNA의 유효성 및 효율 확인 가능
(sgRNA screening)
□ 제품설명
Guide-it™ sgRNA In vitro Transcription Kit (Code 632635)는 in vitro transcription 반응으로 간편하게 12ug 이상의 고품질, 고수율의 sgRNA를 제작할 수 있다. 본 제품 내에는 Phenol/Chloroform 방식이 아닌 스핀컬럼 방식의 RNA 정제 키트인 Guide-it™ IVT RNA Clean-Up Kit (Code 632638)가 포함되어있다. 정제한 sgRNA는 그대로transfection, electroporation 또는 in vitro cleavage assay에 적용할 수 있다. Guide-it™ Complete sgRNA ScreeningSystem (Code 632636)은 Guide-it™ sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code 632635)와Guide-it™ sgRNA Screening Kit (Code 632639) 제품으로 구성되어있다. 본 제품을 사용하여 in vitro transcription으로 합성한 sgRNA와 제품 내 포함된 Cas9 재조합 단백질을 실험 튜브 내에서반응시킴으로써, 실제 세포 실험 전에 in vitro cleave assay를통하여 sgRNA의 유효성 및 절단 효율을 확인 가능하다. 본제품 이용 시, sgRNA의 절단부위를 포함한 DNA는 PCR 증폭 후, 재조합 Cas9nuclease로 절단을 하며, 이 절단 효율은agarose gel eletrophoresis로 확인할 수 있다.
□ 기존 제품과의 차이점
본 제품은 기존 제품과 제품명은 같지만, 버전 업그레이드 출시되었으며 아래와 같이 변경되었다. Guide-it™ sgRNA InVitro Transcription Kit
● 용량: 10회 → 50회로 변경
● 프로모터및 scaffold 서열 변형으로 sgRNA 합성 수율 3배 이상 향상(12ug 이상) 및 genome editing 효율 향상
● Forward primer 서열 변경: T7 promoter와 scaffold 서열 변형으로 Primer 총 길이가 69nt → 56-58nt로 변경
[신규]- total length 56-58nt
● Template DNA(sgRNA encoding template)의 PCR 증폭을위하여 PrimeSTAR® Max DNA Polymerase를 적용하여
비특이적 증폭 감소, Agarose gel purification 방법 불필요
● Phenol/Chloroform 정제 대신 스핀 컬럼 방식의 RNAClean-Up Kit으로 RNA 정제
Guide-it™ sgRNAScreening Kit
● 용량: 30회 → 50회로 변경
● Target DNA(DNA cleavage template)의 조제에 TerraPCR Mix을 이용하여 Direct PCR 가능
□ 상세내용 및 데이터
그림1. Flow chart describing how the Guide-it sgRNA InVitro Transcription Kit (including the Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit) andGuide-it sgRNA Screening Kit work together in the Guide-it Complete sgRNAScreening System, which can be used to synthesize and test the efficacy ofsgRNAs.
그림2. Schematic highlighting the key steps for using Guide-it kits for the production of high amounts of single guide RNA (sgRNA) andscreening for cleavage efficacy at the desired target site using recombinantCas9 protein.
그림3. RNA quality produced via in vitro transcription. sgRNAs produced using the Guide-it sgRNA In Vitro TranscriptionKit were compared with sgRNAs produced using a competitor’s kit. The Guide-itkit produced a high-quality, single band for each reaction, while thecompetitor’s kit showed unwanted byproducts.
그림4. sgRNA yield and quality for different gene targets using the Guide-itComplete sgRNA Screening System.Panel A. 20μl of each sgRNA in vitro transcription (IVT) reaction was incubated for4 hr at 37°C. The yield for each transcribed sgRNA was quantified using aNanoDrop spectrophotometer. Panel B. Each sgRNA IVT reaction was a runon an Agilent Bioanalyzer to assay for sample quality.
□ 보존
Guide-it™ sgRNA InVitro Transcription Components v2 : -20℃Guide-it™ IVT RNA Clean-Up Kit : 실온Guide-it™ sgRNA Screening Kit : -20℃
ebiomall.com
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纽约大学的研究团队在CRISPR-Cas9的基础上开发了一个定向检测基因组区域的活体成像系统。该系统能够精确观测基因组位点和细胞核结构，揭示细胞核改变在基因表达调控和其他细胞过程中的重要作用。
CRISPR-Cas9原本是细菌在漫长的进化史中演化出的重要防御机制。规律成簇的间隔短回文重复CRISPR与内切酶Cas9的组合，可以在sgRNA的指引下，靶标并切割入侵者的遗传物质。2012年研究者们利用这一特点，将CRISPR系统发展成了强大的基因组编辑工具。现在CRISPR-Cas9基因组编辑系统的应用延伸到了基因敲除、删除、染色体重排、RNA编辑、全基因组筛选等众多领域。
研究人员用病毒RNA和sgRNA生成了嵌合转录本。这种转录本与缺乏剪切活性的Cas9共表达，可以把荧光标记的病毒RNA结合蛋白招募到基因组指定位点。为了证实CRISPR成像技术的效率和灵活性，研究人员同时标记了小鼠染色体12的两种卫星序列，以及不同的基因组位点。他们在文章中指出，这是一种快速、稳定的低背景成像技术，可以用来追踪染色质互作动态和验证表观遗传学过程。
为了更好的研究非编码RNA，哈佛大学的科学家们以CRISPR为基础打造出了一个定向的RNA定位法——CRISPR-Display（CRISP-Disp）。他们利用失去催化活性的dCas9，将整合在sgRNA中的大片段RNA带到特定DNA位点。文章通讯作者是RNA领域的著名青年科学家JohnRinn博士，他曾被评为2009年美国国内撼动科学界的青年英才。
在CRISPR系统的基础上使用sgRNA文库进行遗传筛选，是鉴定基因调控子的一种有效方法。研究者们可以通过CRISPR筛选在基因组非编码区域中寻找功能性元件。不过这样的应用需要高度覆盖又简单实用的自定义sgRNA文库。耶鲁大学医学院的研究人员开发了一个名为MolecularChipper的新技术。该技术能够针对指定基因组区域生成密集覆盖的sgRNA文库。
酿脓链球菌的Cas9现在已经被广泛用于基因组编辑。那么，对Cas9进行基因工程改造将面临哪些限制呢？加州大学伯克利分校的研究团队通过随机插入突变对Cas9结构进行了全面分析，鉴定了这种蛋白的基因改造热点。这些位点可以耐受PDZ结构域的插入，不影响Cas9的结合和剪切功能。
光系统设计难各种光系统都各自特点所像质优化重点全致 没像数或者物理领域种著名课题 希望能帮
请问成像系统工作站请问那家的产品做得比较好以及专业一些呢？
图1 光声成像工程 (a)光声信号激发与探测；(b)光声成像实现过程示意图
光声成像过程可以分为三个部分：信号的产生、信号的接收和信号处理及图像重建（见图1）。由于脉冲激光器具有光声转换效率高的优点，因此通常被作为光声成像研究中产生信号的激励源。脉冲激光器发出的激光束照射在待研究组织样品上，由于组织样品的吸收效应，在样品内部形成了与组织光学参数相关的能量沉积分布。由于激光脉宽很窄（ns）吸收的能量不能在短时间内释放，导致瞬间温度变化，从而通过热弹机制转化为热膨胀。周期性热流使周围的介质热胀冷缩而激发超声波，由于这种超声波信号的特殊产生机理，为了区别于其它的超声信号，通常称为光声信号。利用超声探测器接收光声信号并对采集到的信号进行适当地处理和采用相应的图像重建算法，就能够得到样品内部光能量沉积的分布。当保证入射光的均匀性的前提下，光声重建图像与吸收分布具有一一对应的关系。向左转|向右转
显微镜是OlympusDP71，弄比例尺的时候出来个“衸”，这是什么鬼啊？如何换算成微米？测量的那个选项我选的是10微米，也只有那个选项可以点。然后倍数选择200，然后他就出来这个200衸，选100倍数是500衸，400倍是200也衸，但长度是200的两倍，**各位大神帮帮忙，要怎样才能换成微米？另外1衸是多少微米？
总局关于发布医用磁共振成像系统临床评价等4项医疗器械注册技术审查指导原则的通告（2017年第6号）
2017年01月16日发布http://www.sfda.gov.cn/WS01/CL0087/168596.html
为加强医疗器械产品注册工作的监督和指导，进一步提高注册审查质量，国家食品药品监督管理总局组织制定了《医用磁共振成像系统临床评价技术审查指导原则》《口腔颌面锥形束计算机体层摄影设备注册技术审查指导原则》《体外除颤产品注册技术审查指导原则》《光固化机注册技术审查指导原则》（见附件），现予发布。
特此通告。
附件：1.医用磁共振成像系统临床评价技术审查指导原则
2.口腔颌面锥形束计算机体层摄影设备注册技术审查指导原则
3.体外除颤产品注册技术审查指导原则
4.光固化机注册技术审查指导原则
食品药品监管总局
2017年1月10日
2017年第6号通告附件1.docx
2017年第6号通告附件2.docx
2017年第6号通告附件3.doc
2017年第6号通告附件4.docx
实验室新组建，想咨询一下Camag薄层色谱成像系统的价格及一套显微成像的设备清单与价格。显微成像主要用于中药材的显微鉴别
