求甘露寡糖检测方法

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求甘露寡糖检测方法

2021-07-24

问题描述：

哪位前辈有饲料添加剂甘露寡糖的检测方法？公司刚开始用甘露寡糖，但不知道如何检测，能分享或发给小妹一份吗？我的E-mail:minosa@163.com先谢啦！:huahua:

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根据β-葡聚糖和甘露寡糖在流动相和液相色谱柱的固定相之间具有不同的分配系数，将样品注入液相色谱柱，用H2O做流动相，糖类分子流出后，经示差检测器检测，用外标法定量。试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂；蒸馏水或去离子水或符合GB/T6682中规定的一级水或相当纯度的水。试验中所用制品按GB/T 603的规定制备。盐酸：37%。乙腈：色谱纯氢氧化钠：40%。葡萄糖和甘露糖混合标液（1000mg/L）：分别称取葡萄糖和甘露糖各0.100g，用纯水定容100mL后用0.45μm微孔滤膜过滤，备用。仪器：水浴锅、漩涡混合器、电炉、手提式压力蒸汽灭菌锅、高压液相色谱仪、带示差检测器。分析步骤样品处理精确称取1.000g（准确至0.0002g）样品放入一个20mL的耐热玻璃制的带螺帽的小试管中，加入7.5mL盐酸（37%），小心的将小瓶盖近后用漩涡混合器混合，得到均一的悬浮液。将小瓶放入30℃水浴中处理45min，每15min用漩涡混合器震荡混合一次。然后将悬浮物定量的转移到200mL杜氏瓶中（同时用约70-80mL的水洗涤后倒入瓶中），将瓶子放入高压灭菌锅121℃处理60min。完成后马上冷却，将溶液调pH到6-7，然后定容至200mL。使用0.45微米孔径的醋酸纤维素膜过滤备用。测定液相色谱参考条件：1、色谱柱：Hyper REZ XP Carbohydrate Ca++，长300mm，内径7.7mm，粒径8μm；2、柱温：70℃；3、流动相：H2O，用前过0.22μm滤膜；4、流速：0.6 ml/min；5、进样体积:40μl；标准曲线的绘制：分别吸取甘露糖/葡萄糖标液12.5、25.0、37.5mL到50mL容量瓶中，用高纯水定容到刻度，得到甘露糖、葡萄糖各为250、500、750、1000mg/L的混合标样。在上述色谱条件下准确进样40μl，得到色谱峰面积和标准物质量浓度之间的回归方程，绘制标准曲线。样品的测定在同样的色谱条件下，将处理好的样品注入色谱仪中，记录各色谱峰的保留时间和锋面积。用糖标样色谱峰的峰面积来定量，计算出样品中葡萄糖、甘露糖的含量。结果计算与表示结果计算试样中β-葡聚糖或甘露寡糖含量X以质量分数（%）表示，按式（A.1）计算： file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image002.gif file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/msohtml1/01/clip_image004.gif……………………………………（A.1）式中：A——根据样品溶液的峰面积，在标准曲线上查得的样品溶液的葡萄糖或甘露糖的含量，单位为毫克每升(mg/L)；m——样品质量，单位为克（g）；0.2——样品处理定容的体积，单位为升（L）；0.9——将葡萄糖或甘露糖换算成β-葡聚糖或甘露寡糖的系数。结果表示每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果，结果保留到小数点后一位。重复性在重复条件下或得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%

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想检测甘露寡糖的含量哦，有没有比较系统或标准的检测方法？查看原帖>>

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