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제품특징
□ 특징
● 높은 signal-to-noise 비율
● 넓은 dynamic range
● 용이한 monitoring과 형광 정보 판독
전통적인 promoter reporter 분석법은 일반적으로 대부분의 promoter가 엄격하게 조절되지 않기 때문에 분석의 어려움이 있다. 이로 인하여 발생되는 background는 실제 promoter induction 후 noise에 비하여 상대적으로 낮은 signal을 유도 한다. 이러한 leaky-promoter의 문제점을 해결하기 위한 이전의 접근 방법은 reporter를 매우 빠르게 항시적으로 분해되도록 변형하는 것이었다. 그러나 이 방법은 높은 background 문제점에 대한 접근법으로 promoter가 활성화되어 있는 세포에서도 많은 양의 reporter molecule을 축적할 수없는 한계가 있다. 결과적으로 이런 형태의 분석은 낮은 signal을 나타낼수 밖에 없다.On-Demand Fluorescent Protein Reporter Systems은 이러한 문제점을 해결하기 위해 여러 가지 기술을 조합하여 사용하고 있다. 각 system은 bright fluorescent protein repoter (AmCyan1, tdTomato, ZsGreen1)를 이용하여 signal 강도를 높이는 동시에 ligand-dependent ProteoTuner protein stabilization/destabilization 기술로 background를 제거하고 있다 (1). Signal을 측정하고자 할 때는 세포막을 통과할 수 있는 ligand인 Shield 1을 첨가하여 reporter를 안정시키면 된다.On-Demand Fluorescent Reporter System은 일반적인 plasmid vector를 이용하는 제품과 lentiviral vector를 이용하는 제품이 있다. Lentiviral System에는 vector에 맞게 진보된 4세대 Lenti-X HT Packaging System이 포함되어 있다 (2).Clontech의 ProteoTuner protein stabilization/destabilization 기술에 관한 자세한 내용은 www. clontech.com/ptuner를 참조하여 주십시오.
Figure 1. DD-Fluorescent Protein promoter reporters provide a much greater fold increase in signal intensity than traditional fluorescent protein reporters, which do not contain the DD. HEK 293 cells were transfected with plasmids encoding the following reporters: CRE-tdTomato, CRE-DDtdTomato, CRE-ZsGreen1, and CRE-DD-ZsGreen1. 24 hr later, the cells were stimulated with 10 μM forskolin and simultaneously treated with 1 μM Shield1. After 4.5 hr, fluorescence intensity was measured via flow cytometry, and fold induction was calculated. The tdTomato and ZsGreen1 reporters containing the DD had three- and six-fold greater fluorescence intensity respectively, than the versions without the DD, due to the latter’s increased background levels.
□ Components & Storage Conditions
각 제품 구성물과 보관조건은 Certificate of Analysis 를 참조하십시오.
□ References
1. Quick & Reversible Control of Your Protein of Interest (April 2008) Clontechniques XXIII(2):1-2.2. Live Cell Reporters, Now with Lentiviral Delivery (April 2009) Clontechniques XXIV(2):14-15.
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加入溶液把搅拌子放在烧杯溶液中，将控温探头固定在橡胶夹头上，加热头插入至溶液中，不能影响到搅拌子，然后先插上仪器接插的电源插头，再接通电源打开电源调速开关，指标灯亮，即开始工作。
调速是由低速逐步调至高速，不允许高速档直接起动，以免搅拌子不同步，引起跳动。加热有开关控制，打开加热源开关，选择所需的温度，绿灯亮表明加热盘工作，红灯亮表明停止加热盘工作，此时进入恒温状态，不工作时应切断电源，为确保安全，使用时请接上地线．仪器应保持清洁干燥，严禁溶液进入机内，以免损坏机件防止剧烈震动．向左转|向右转
如下图示
问题是：有没有驱动和罐体分开的，像实验室用的那种，如下图：
后者使用移动配液罐，方便灭菌。
请问各位大神，做注射液中试时所用到磁力搅拌器需要资质吗？
小弟好苦恼啊，求各位老师指点迷津！
版主shitou0307留言:
鼓励
用一个微型电动机驱动一块磁钢转动，利用磁钢转动所产生的旋转磁场带动搅拌器托盘上玻璃容器内的搅拌转子转动，从而达到搅拌溶液的目的。
(2)磁力搅拌器的结构
磁力搅拌器是由电动机、磁钢、搅拌转子、搅拌器托盘、调运装置等部分组成的。金属托盘用丁放置化学电池，此外没有用于夹持测量电极和参比电极的电极架。托盘下安装一块永久磁钢，连接在电动机的转动轴L，电动机的旋转带动永久磁钢旋转，利用其磁力吸引搅拌转于旋转，从而起到搅拌作用。如果磁力搅拌器具有加热功能，则还具有电阻加热丝和云母绝缘层。搅拌转于也称磁于p通常是用玻璃管或塑料管密封的小铁棒(避免与溶液起反应)，搅拌转子随磁钢转动而转动。面板装配有调速旋钮、控温加热开关、指不灯等，以实现接通电源、控制磁钢转动和加热的目的。
参考资料:Hi.baidu/=。www.jingda17.net。DI
裂解液配方：
尿素7M
硫脲2M
CHAPS4%
二次水至20ml
使用前加DTT至65mM，tris至40mM，PMSF至1mM
上样液配方：
尿素8M
CHAPS2%
1%溴酚蓝0.002%
二次水至10ml
使用前加DTT至18mM，IPGbuffer至0.5%
由于都含有尿素，特别难溶解，好像含有尿素的温度不能超过37度，就在磁力搅拌器上一直搅着，发现过了一两个小时还没溶解，怎么回事么？中间还在34度左右水浴锅里水浴过，还是没溶解，溅在烧杯壁上的液体都已经结晶了。
有人碰到这样的问题么，很着急，急求帮助。
1.裂解液和上样液配方有无问题？
2.尿素怎么老不容，有没有什么方法加速其溶解？
