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abfrontier/T4 DNA Polymerase/T4 DNA Polymerase, 500 U/2040A
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제품특징
□ 농도 2~5 U/㎕
□ 형상
| 200 mM | Potassium Phosphate (pH6.5) |
| 10 mM | 2-Mercaptoethanol |
| 50% | Glycerol |
□ 보존 -20℃
□ 첨부 Buffer 조성(10×)
| 330 mM | Tris-acetate (pH7.9) |
| 660 mM | CH3COOK |
| 100 mM | (CH3COO)2Mg |
| 5 mM | DTT |
□ 기원
Escherichia coli carrying the plasmid containing phage T4 DNA polymerasegene
□ 제품설명
본 효소는 주형 DNA와 프라이머를 필요로 하여, 주형에 상보적인 nucleotide를 프라이머의 3’-OH 말단에 순차적으로 부가하는 반응을 촉매한다.본 효소는 Klenow Fragment에 비하여 약 100~1,000배 강한 단일가닥 DNA 특이적 3’→ 5’exonuclease 활성을 갖고 있으나, 5’→ 3’exonuclease 활성은 갖고 있지 않다. 3’→ 5’exonuclease 활성은 polymerase 활성의 약 3배 turnover number를 갖고 있어 통상의 조건에서 이중가닥 DNA 말단의 분해도 가능하다.dNTP가 존재하는 통상의 조건에서는 polymerase 활성을 나타내나, 말단합성 종료 후, dNTP가 고갈된 시점에서 DNA의 분해반응으로 바뀐다.3’→ 5’Exonuclease 활성에 의한 단일가닥 DNA의 분해활성은 사슬의 길이에 의존하여, 길이가 10배로 되면 (예 : 300 → 3,000 bp) 분해속도는 1/100이 된다. E. coli DNA polymerase I과 달리 nick으로 부터의 합성은 불가능하지만 T4 gene 32 산물을 첨가하면 가능해진다(저이온 농도). Polymerase 활성에 비하여 exonuclease 활성은 쉽게 온도의 영향을 받으므로 합성반응은 저온에서 장시간 하는 것이 좋다. 본 효소는 DNA 2차 구조의 영향을 받기 쉽고 T4 gene 32 산물의 도움없이는 2차 구조를 넘어서 계속 합성하기 어렵다. 반대로 두가닥 부분까지 합성이 진행되면 그 부분에서 반응이 정확히 정지하는 것으로 알려져 있다.
□ 활성의 정의
열변성 송아지 흉선 DNA를 주형/프라이머 로써 사용하여 37℃, pH8.8 조건에서 30분 동안 모든 10 nmol의 모든 뉴클레모티드를 산불용성 침전물의 합성기질로 사용하는 것을 효소활성 1 U으로 한다.
□ 활성 측정용 반응액 조성
| 67 mM | Tris-HCl (pH8.8) |
| 6.7 mM | MgCl2 |
| 16.6 mM | (NH4)2SO4 |
| 10 mM | 2-Mercaptoethanol |
| 6.7 μM | EDTA |
| 0.0167% | BSA |
| 0.2 mg/ml | 기질 DNA |
| 각 330 μM | dCTP, dATP, dGTP |
| 330 μM | [3H]dTTP |
□ 순도
2 U의 본 효소와 1 ㎍의 closed circular (RFI) pBR322 DNA를 37℃, 16시간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 일어나지 않는다.
□ 사용상의 주의
- pH7.5 와 pH9.7에서는 50%의 활성을 나타낸다.- 활성의 발현에 Mg2＋을 요구하며, 최대활성을 나타내기 위해서는 SH 환원제를 요구한다.- 반응계 전체의 이온농도가 100 mM를 넘으면 저해된다.- 주형 DNA의 고차구조의 영향을 받기 쉽고, T4 gene 32 산물에 의해 polymerase 활성은 현저히 활성화되지만 3’→ 5’
exonuclease 활성은 완전히 저해된다.- 10× 첨부 버퍼에 0.1% BSA를 직접 첨가하면 다량의 백색 침전이 생기므로 반응액을 조제할 때는 다음의 순서로 시약을
첨가한다. dH2O → 10× 첨부 버퍼 → 0.1% BSA → 기질 DNA
□ 용도
- 강력한 3’→ 5’exonuclease 활성을 이용한 replacement synthesis에 의한 DNA 단편의 3’말단의 표식- DNA 단편의 말단의 평활화
□ 관련제품
DNA Blunting Kit (TaKaRa Code 6025)蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2019-04-17
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2021-07-23
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2019-04-09
全钢通风柜通风厨排烟柜排风柜fumehood187561山东龙腾电力科技有限公司全钢通风柜通风厨排烟柜排风柜 查看更多
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2019-04-07
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2018-12-16
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2019-03-07
上海枫津实验室设备有限公司是专业实验室家具、实验室设备的生产商。为您提供实验室家具、实验台、钢木实验台、全钢实验台、通风柜、全钢通风柜、实验室通风柜、全钢走入式通风柜、防静电工作台等实验室设备。上海枫津实验室家具公司是上海实验室家具厂家,专业制造实验室家具,提供实验室家具服务,是上海实验室家具及中国实验室家具行业实力较大公司." /> 查看更多
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2019-01-17
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2019-03-07
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2021-08-07
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2019-03-07
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常见问题
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RNA的提取方法步骤及原理. 123
lvhr06262021-08-01
如何防止降解？
【求助】实验室通风橱紫外灯应该用哪种规格? 制剂技术讨论版...123
当归meijuan2021-08-12
最好添上出处，谢谢各位！
实验室通风系统布置123
2017-10-02
玻璃钢管道。
玻璃钢管道是一种轻质、高强、耐腐蚀的非金属管道。它是具有树脂基体重的玻璃纤维按工艺要求逐层缠绕在旋转的芯模上，并在纤维之间远距离均匀地铺上石英砂作为夹砂层。其管壁结构合理先进，能充分发挥材料的作用，在满足使用强度的前题下，提高了钢度，保证了产品的稳定性和可靠性。玻璃钢夹砂管以其优异的耐化学腐蚀、轻质高强，不结垢，抗震性强，与普通钢管比较使用寿命长，综合造价低，安装快捷，安全可靠等优点，被广大用户所接受。
玻璃钢管道是一种轻质、高强、耐腐蚀的非金属管道。它是具有树脂基体重的玻璃纤维按工艺要求逐层缠绕在旋转的芯模上，并在纤维之间远距离均匀地铺上石英砂作为夹砂层。其管壁结构合理先进，能充分发挥材料的作用，在满足使用强度的前题下，提高了钢度，保证了产品的稳定性和可靠性。玻璃钢夹砂管以其优异的耐化学腐蚀、轻质高强，不结垢，抗震性强，与普通钢管比较使用寿命长，综合造价低，安装快捷，安全可靠等优点，被广大用户所接受。
实验室常见有毒物质防护策略整理需在通风橱内操作类123
wonning9122021-08-10
实验室没有通风橱，老板让我拿电扇吹：（
通风柜、通风橱、超净工作台等的区别_常用设备综合讨论仪器社区_...123
anydodo2021-07-29
毒气只能是往外平排的，通风柜就随便进排风了。
下列气体须在通风橱内进行操作的是()_123
wonning9122007-11-19
我们实验室没有通风橱，老板让我拿一个风扇吹：（
为什么实验室通风橱不能储存易燃易爆物品_问答详情_通风橱_洁净清...123
guozhangsheng12017-10-02
通风橱往往是负压，易燃易爆物品在负压的情况下更容易燃烧爆炸
以下物质中,哪些应该在通风橱内操作 123
寻找涵の1792021-08-07
氯化氢
以下物质中,哪些应该在通风橱内操作?
A. 氢气 B. 氮气 C. 氦气 D. 氯化氢
以下物质中,哪些应该在通风橱内操作?
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通风橱和通风柜有什么区别_其他_土巴兔问吧123
iktdyhmp3471932021-08-13
国际化智能通风橱当无工作人员在通风橱范围活动的时候，通风橱的全部拉门 总是处于关闭状态，在其探测器感应到有物体突出，通风橱自动停止。这是国 际化智能通风橱的创新性解决方案。区别就在于它们智能控制方面。未名雷蒙 特有进口德国Kottermann品牌的通风橱实验室家具。
【求助】有谁知道通风橱操作及维护规程吗?急啊! 微生物学和寄生...123
wqs962021-07-20
谢谢告知啊！
核医学通风橱中通风排放系统有何特殊要求123
辉仔3618542017-10-02
永久密闭 1、用黄土、红砖、水、沙等不燃性材料构筑，严密不漏风，中间用黄 土夯实，墙体厚度不小于 0.5m。 2、密闭前无瓦斯积聚。 3、设有统一规格的瓦斯检查牌板、说明牌板、栅栏和警标。 4、密闭前 5m 内支护完好，无片帮、漏顶、无杂物、积水和淤泥。所 有导电体不能进入密闭(正常的瓦斯抽放管路必须采取绝缘措施进行处理)。 5、密闭内有水时应设反水池或反水管，有自然发火煤层的采空区密闭 要设观测孔、措施孔且孔口设置阀门。 6、密闭内有积水时，前后墙要有一定高度的水泥抹面，墙内底部要先 用红粘土掺白灰捣实后，在填黄土或用混凝土砌筑墙体，并在密闭底部设反 水池或反水管，孔口要封堵严实。 7、密闭周边掏槽，应掏至硬帮、硬底、硬顶，并与煤岩接实。在岩巷 构筑密闭时，嵌入周边岩石的深度不应小于 0.2m；在煤巷构筑密闭时，掏 槽深度进入实体煤不应小于 0.5m， 掏至硬顶后再进入实体煤不应小于 0.2m。 8、密闭墙面要平整，无裂缝、重缝和空缝，并进行勾缝或抹面 0.1m 内
PP通风柜与全钢通风柜的区别是什么？ 博泰科创123
zinfandel000002017-10-02
防爆是有防爆等级以及有防爆证书的，可用于有可燃爆炸性气体区域场所；而全钢是从材质上讲的与防爆不防爆没有联系，全钢的不能说就是防爆的或者不防爆的；同样防爆型的材质可能是铸铁的也可以有钢材质的。
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