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angelxiaohei
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关于修复的方法: 1:热修复 切片在抗原修复液中加热,修复的温度一般是95到97度,维持20分钟,然后自然晾至室温。微波修复也应该把温度控制在上述的温度范围内。2:酶消化修复时,在胰酶溶解液中应添加氯化钙溶液,维持其稳定性。
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rstar1978
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高压抗原修复的【操作步骤】:1.常规组织切片后经二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱水后,浸泡于蒸馏水中待用。2.取一定量的PH值为6.0的枸橼酸缓冲液(800-1500ml)于压力锅中,大火加热直至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于不锈钢或耐高温的的塑料切片架上,放入沸腾的缓冲液中。盖上锅盖,扣上压力阀,继续加热至喷气,即达到工作温度和压力(扣阀至喷气以6min为最佳),开始计时,1-2min后,压力锅离开热源,1min后用自来水淋锅体使之冷却至室温,去阀开盖,取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS(PH值为7.2-7.4)冲洗两次,每次3min。【注意事项】:1.用过的枸橼酸缓冲液必须弃去不得再用。呵呵不必节约。2.玻片必须经过防脱片处理。具体操作论坛中有。3.加热时间非常重要,组织切片加热的总时间以5-8min为宜。时间长会使背景加深。4.压力锅使用后及时清洗,凉干备用。
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海之梦
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to 阿荣:你讲的不错啊!!!!
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angelxiaohei
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to 阿荣: 我没有接触过高压修复,我有一个问题,抗原修复的目的是使抗原位点充分暴露,如果底片的温度大起大落的话,肯定要影响修复效果,可是上面你提到的方法中,其温差很大的,这是我不明白的,能不能再解释一下。不知道用这种方法修复的切片与用普通热修复的结果那一个好一点。
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rstar1978
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加热修复的方法可分为:高压法、微波法、水浴法三种,实验证实,高压抗原修复法在染色强度和重复性等方面均优于水浴法和微波法。抗原修复中抗原修复液非常重要,而柠檬酸缓冲液为免疫组化首选和常规使用的抗原修复液。上述高压抗原修复angelxiaohei 应该看到,组织切片要加热5-8min,足可使抗原位点充分暴露了,在修复液的情况下不会影响修复结果的。
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rstar1978
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斑竹,怎么分数这么难得啊?一分也没有啊?
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野原
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rstar1978 斑竹,怎么分数这么难得啊?一分也没有啊?不要着急啊,新战友打分从宽,不过也得给我一个时间啊,一般不超过48小时。GOOD LUCK!
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