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DYCZ-40D型迷你转印槽是由北京泽兰西科技有限公司代理或销售的六一品牌的仪器,产品来源于北京。北京泽兰西科技有限公司是中国最权威的DYCZ-40D型迷你转印槽销售服务商之一,在北京等地方销售DYCZ-40D型迷你转印槽已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业DYCZ-40D型迷你转印槽仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的DYCZ-40D型迷你转印槽产品 查看更多>
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2021-08-31
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Western 免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。为利于更好的实验效果,不同蛋白,转膜条件略有不同,迪申生物技术(上海)有限公司专注于生产免疫组化相关产品多年,对 WB 实验有一定了解,今天跟各位同学一起分享下实验过程中发现的不同蛋白的转膜条件。蛋白来源:RAW264.7 总蛋白蛋白名称:一些转录因 ... 查看更多>
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恒流进行转的,小的分子量的90分钟就转好了,但是我的mTOR的分子量为289KD,半干式转膜仪2个半小时,也就是150分钟,为什么转膜还不完全呢?急需解决,谢谢
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题?电泳后的条带正常?可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
挺贵吧 至少他们家连个玻璃板都死贵 这最好还是去问代理 电泳槽和转膜曹可以用一个
转膜时从下到上,依次是四层滤纸,一层PVDF膜,一层胶,再四层滤纸。
应该注意以下2个方面
1 用玻璃棒将气泡赶净 有气泡的位置不导电 蛋白就转不上
2 半干式转膜仪要保证一定量的转移缓冲液,如果转膜一个小时以上,缓冲液要多一些
电泳槽~转膜仪~显色仪~
一、制备样品DNA
二、限制性内切酶消化样品DNA
三、凝胶电泳分离消化产物
四、如果靶序列>5kb,在0.25M的HCl中进行震荡脱嘌呤10min,ddH2O洗一次
五、用变性液震荡处理30min,ddH2O洗一次
六、中和液震荡处理30min
七、裁取合适大小的尼龙膜或硝酸纤维素膜进行转膜操作,可用真空转膜仪或者搭滤纸桥,需要20×SSC
八、制备探针,可用地高辛标记(以地高辛为例)
九、将膜放入杂交瓶,42°C预杂交30min
十、倒掉预杂交液,加入杂交液,适当的温度进行杂交4h至过夜
十一、洗膜,先用2×SSC+0.1%SDS,20-25°C洗2×5min,再用0.5×SSC+0.1%SDS洗2×15min。然后用washing buffer洗1-5min,接着用blocking solution洗30min后,用antibody solution洗30min,再用washing buffer洗2×15min,再用detection buffer洗2-5min后,取出膜,放于保鲜膜上,在结合有DNA的一面滴加CSPD ready-to-use后,立刻盖上保鲜膜,让CSPD ready-to-use均匀的布满膜表面,室温放置5min后,37°C温育10min以上
十二、放射自显影,可用成像系统信号累积模式显影或用X-ray显影
大家好!我们实验室的做western的Bio-Rad转膜仪有根铂丝断了,还能转膜就是温度非常的高,可能没办法修了,不知道有没有师兄师姐知道能否修,还有就是有个叫浩海仪器的公司代理Bio-rad的产品,他们报了个价钱说是683美金,不知道这个价钱是否合理?在此先谢过了!:D
我用Bio-Rad转膜仪进行转膜,电压初设置为100V,电流设置为400mA,start后电流瞬间升到了400mA,电压升不到100V,是什么情况造成的呢?谢谢回复。
半干转膜仪123
feiyundaozhang2021-07-29
我想买一半干转膜仪,本来想买Bio-Rad的,但是定货时间太长,要两个月,后来听说六一厂也有,并且到货快,但不知六一厂的半干转膜仪质量怎么样,有用过的吗?好用吗?谢了
我算算看,台式离心机,水浴锅,超近工作台,细胞培养箱,倒置显微镜,微波炉,酶标仪等等、制冰机,液氮罐,若干普通冰箱,-80冰箱。
搞核酸的:PCR仪器,电泳槽,电泳仪,凝胶扫描设备
搞蛋白的:各类电泳设备,转膜仪,摇床,有需要还要特别搞一个暗房间
基本就这些吧,话说,兄台真要筹建一个实验室,为何不亲自到一个实验室转一圈呢?
半干转要用专门的半干转膜仪,而湿转用电泳仪配附件即可;半干转所需时间较短,但控制不好,中间发热比较大容易把膜和胶烘坏;而湿转耗时较长,尤其对大分子量的蛋白转膜效果较好。相对来讲,还是湿法转膜的实验室多一些。
实验室做WB的人太多了,仪器都不够抢的

鄙人想自己买套SDS-PAGE电泳仪转膜仪,请问下大家有没有好推荐呀,

质量好,速度快的
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