IsolationfromHEK293Cells:PARP1andTnks1
●RNF146WWEAffinityResinSetTheTulipBiolabs,Inc.RNF146WWEAffinityResinSetisdesignedfortheisolationofpoly-ADP-ribosylatedproteinsfromculturedcellsandtissuesamples.ThroughtheuseofahighlyspecificWWEaffinityresin,poly-ADP-ribosylated(PARylated)proteinsareisolatedfromcellortissuelysateswithouttheuseofanti-PARantibodies. Theresinboundproteinscanbeelutedfromtheaffinityresin,andanalyzedbyimmunoblottingorothermethods.
Cat.#4306Setcontains1eachofthefollowing(canbeorderedseparately):
•WWEResin,0.5mgWWEfusionproteinsuppliedasaslurrycontaining ~50µLresin,Cat.#2334
•WWENegControlResin,0.5mgfusionproteinsuppliedasaslurrycontaining~50µLresin, Cat.#2335
TheWWEAffinityResin,Cat.#2334ishighlypurifiedGST-RNF146(100-175)fusionproteinconstructexpressedinE.coli,andboundtoglutathionebeads.
WWENegativeControlResin,Cat.#2335isidenticaltothe#2334resinexceptforR163Asubstitution,whicheffectivelyabolishesPARbinding. Thenegativecontrolresinisusefultocontrolfornon-specificbinding,anditsuseisoptional.
Pleaseseethe Cat.#4306 Datasheet(pdf) foracompletedescription.
TulipBiolabs生产用于Poly(ADP-核糖)和合成大麻素研究的蛋白质,抗体和试剂盒,可用于学术,制药,工业和政府实验室。Tulip还提供定制的ELISA分析开发生化分析,以及大分子的生物分析方法验证。专注于开发和执行针对生物分子和药物的专门化验。TulipBiolabs,Inc.成立于2000年,是一家私人研究和产品开发实验室。多年来,Tulip扩大了产品线,并完成了许多项目的合同工作。Tulip对开发用于药物发现的聚ADP-核糖基化研究试剂和测定法感兴趣。Tulip还对开发用于大分子药物组织分析和滥用药物的检测方法感兴趣。Tulip的实验室设施位于美国宾夕法尼亚州的兰斯代尔。
抗pADPr,克隆10H,小鼠单克隆抗体该小鼠单克隆抗体,克隆10H,识别聚(ADP-核糖)。它由H.Kawamitsu等人开发并最初描述。(1984)Biochemistry23,3771。聚(ADP-核糖)是由称为聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的一类酶合成的聚合物。使用NAD+作为底物,PARP可催化聚合物pADPr的形成,链长范围为2至300个残基,在链中包含约2%的支链。pADPr附着于核蛋白和PARP自身(自动修饰)。克隆10H单克隆抗体的用途已在文献中进行了广泛描述,包括Western印迹,免疫染色,基于ELISA的PARP活性筛选和免疫斑点印迹。
抗PARP1,全蛋白IgY鸡多克隆抗体TulipBiolabs,Inc.抗PARP1,目录号1051的IgY鸡多克隆抗体,是使用在杆状病毒表达系统中表达的高度纯化的重组全长人PARP1制备的。由WB,Cat。#1051识别完整的PARP1MW=113kDa,89kDa细胞凋亡诱导的裂解产物以及其他较低分子量的PARP1片段。
PARP14m3MARylated磁性亲和树脂TulipBiolabs,Inc.PARP14m3磁性树脂设计用于从细胞和组织裂解物中分离单ADP-核糖基化(MARylated)蛋白质。通过使用高度特异性的PARP14m3亲和树脂,可以从细胞或组织裂解物中分离出单ADP-核糖基化(MARylated)蛋白。使用与PARP14m3共价结合的磁珠的便利性进行纯化。可以从亲和树脂中干净地洗脱与树脂结合的蛋白质,然后通过质谱,免疫印迹和其他方法进行分析。PARP14m3磁性亲和树脂,产品目录。#2414是高度纯化的人PARP14巨域3融合蛋白构建体,在大肠杆菌中表达,并化学结合到1μm超顺磁珠上。
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一、脑电图脑电图(EEG)检查:是在头部按一定部位放置8-16个电极,经脑电图机将脑细胞固有的生物电活动放大并连续描记在纸上的图形。正常情况下,脑电图有一定的规律性,当脑部尤其是皮层有病变时,规律性受到破坏,波形即发生变化,对其波形进行分析,可辅助临床对及脑部疾病进行诊断。对脑波的频率、波幅、两侧的对称性以及慢波的数量、部位、出现方式及有无病理波等进行分析。许多脑部病变可引起脑波的异常。如颅内占位性病变(尤其是皮层部位者)可有限局性慢波;散发性脑炎,绝大部分脑电图呈现弥漫性高波幅慢波;此外如脑血管病、炎症、外伤、代谢性脑病等都有各种不同程度的异常,但脑深部和线部位的病变阳性率很低。须加指出的是,脑电图表现没有特异性,必须结合临床进行综合判断,然而对于癫痫则有决定性的诊断价值,在阗痫发作间歇期,脑电图可有阵发性高幅慢波、棘波、尖波、棘一慢波综合等所谓“痛性放电”表现。为了提高脑电图的阳性率,可依据不同的病变部位采用不同的电极放置方法。如鼻咽电极、鼓膜电极和蝶骨电极,在开颅时也可将电极置于皮层(皮层电极)或埋入脑深部结构(深部电极);此外,还可使用各种诱发试验,如睁闭眼、过度换气、闪光刺激、睡眠诱发、剥夺睡眠诱发以及静脉注射美解眠等。但蝶骨电极和美解眠诱发试验等方法,可给病人带来痛苦和损害,须在有经验者指导下进行。随着科技的日益发展,近年来又有了遥控脑电图和24小时监测脑电图。
二、脑电地形图(BEAM)
是在EEG的基础上,将脑电信号输入电脑内进行再处理,通过模数转换和付立叶转换,将脑电信号转换为数字信号,处理成为脑电功率谱,按照不同频带进行分类,依功率的多少分级,最终使脑电信号转换成一种能够定量的二维脑波图像,此种图象能客观地反映各部电位变化的空间分布状态,其定量标志可以用数字或颜色表示,再用打印机打印在颅脑模式图上,或贮存在软盘上。它的优越性在于能发现EEG中较难判别的细微异常,提高了阳性率,且病变部位图象直观醒目,定位比较准确,从而客观对大脑机能进行评价。主要应用于缺血性脑血管病的早期诊断及疗效予后的评价,小儿脑发育与脑波变化的研究,视觉功能的研究,大浮肿瘤的定位以及精神药物的研究等。
三、脑磁图
电流在导体内流动进,导体周围可以产生磁场。同理,脑细胞的电活动也有极微弱的磁场,可用高灵敏度的磁场传感器予以检测,并记录其随时间变化的关系曲线,是即脑磁图,其图形与EEG图形相似。与EEG相比,优点是:可发现有临床意义而又不能被EEG记录到的波形,或检测到皮质局限性的异常电磁活动;此外,磁检器不与头皮接触,也减少了干扰造成的伪差。若与EEG同时描记,还可对不同物理方位的皮质群进行分析。但由于屏蔽、电磁装置以及其他设备复杂、昂贵,目前国内尚无此项设备。
四、诱发电位
给人体感官、感觉神经或运动皮质、运动神经以刺激,兴奋沿相应的神经通路向中枢或外周传导,在传导过程中,产生的不断组合传递的电位变化,即为诱发电位,对其加以分析,即或反映出不同部位的神经功能状态。由于诱发电位非常微小,须借助电脑对重复刺激的信号进行叠加处理,将其放大,并从淹没于肌电、脑电的背景中提取出来,才能加以描记。主要是对波形、主波的潜伏期、波峰间期和波幅等进行分析,为临床诊断提供参考,目前临床常用的有视觉、脑干听觉、体感、运动和事件相关诱发电位,以及视网膜图和耳蜗电图等,可分别反映视网膜、视觉通路、内耳、听神经、脑干、外周神经、脊髓后索、感觉皮质以及上下运动神经元的各种病变,事件相关诱发电位则用以判断患者的注意力和反应能力。诱发电位具有高度敏感性,对感觉障碍可进行客观评诂,对病变能进行定量判断。对心理精神领域可进行一定的检测,故当前广泛应用于对神经系统病变的早期诊断,病情随访,疗效判断,予后估计,神经系统发育情况的评估以及协助判断昏迷性质和脑死亡等。但图形无特异性,必须结合临床资料进行判断;不在有关神经传导径路中的病变,不能发现异常。近年,诱发电位的频谱分析和诱发电位地形图也在临床上逐渐开始应用,进一步提高了其临床应用价值。
五、肌电图(EMG)
是用肌电图仪记录神经和肌肉的生物电活动,对其波形进行测量分析,可以了解神经、肌肉的功能状态,协助对下运动神经元或肌肉疾病的诊断。目前常用的方法有三种:①针极肌电图:亦称普通肌电图,是将特制的针电极刺入肌腹,或用表面电极置于肌肉表面皮肤,在示波器上或记录纸上观察肌肉在静止、轻收缩、重收缩三种状态下的电位变化,以帮助判断疾病究系神经源性或肌源性损害。②神经传导速度测定:也即运动神经传导速度(MCV)和感觉神经传导速度(SCV)测定。系在神经干的近端(MCV)或远端(SCV)给以脉冲刺激,在远端效应肌(MCV)或近端神经走行部位(SCV)接收波形,测理两点之间的潜伏期和距离,即可计算出运动神经或感觉神经传导速度,主要用于了解神经传导功能情况。③其他:如重复频率试验,F波、H反射、牵张反射等检查以及单纤维肌电图检查等,可进一步了解神经、肌肉、神经一肌接头以及脊髓反射弧的功能状态。
六、脑阻抗血流图(REG)
是检查头部血管功能和供血情况的一种方法。其原理是通过放置在头部的电极给以微弱的高频电流,由于血液的电阻率最小,其电阻可随心动周期供血的变化而变化,这种节律性的阻抗变化,经血流图仪放大,可描记出波动性曲线,对其进行测量、计算、分析,可间接了解外周阻力、血管弹性和供血情况。本法简便易行,但因影响因素比较多,如情绪、气温、检查当时的血管功能状态等,故对其判断应加慎重。须结合临床症状,体征等进行判断。常用于脑动脉硬化、闭塞性脑血管病、偏头痛以及药物疗效观察等。
具体操作是:局麻下将3~4根电极导管经股静脉、锁骨下静脉送入冠状静脉窦、高位右心房及希氏束、右心室等部位,刺激心房和心室诱发与临床一致的心动过速,定位心动过速起源点,然后将消融用的电极导管送达已定位的起源点并与体外的射频发生器相连。放电后重复电生理检查,若不能诱发心动过速且临床随访无发作,则说明消融成功。
此方法治疗的疾病有:预激综合征和房室结双经路引起的阵发性室上性心动过速、房扑和房颤、室性心动过速及房性心动过速。
磁共振 CT 脑电图 多普勒 肌电图 诱发电位 脑脊液检查 血液检查。。。。。。。。。。。。
心内科
心脏电生理记录系统、有创血压监测系统、心脏射频消融仪、心电分析系统、多参数监护仪、医疗网络产品等。
产品主要用于心脏射频消融、心脏电生理检查、冠脉造影、经皮冠状动脉成型术、支架植入、二尖瓣球囊扩张等心脏介入手术;人体生理参数监测;心电图分析等
我们一般是在心导管室内,要在特殊的X线设备,可以转动的C臂心血管造影机,影像增强设备和电视荧屏设备,多导电生理记录仪,心脏程控刺激仪等。高档可以有三维电解剖生理定位标测系统比如CARTO,EnSite3000,这仅仅国内少数顶尖医院才有。
我们做电生理检查是通过你自身的血管放入心导管,直到心脏相应部位,一般主要局部麻醉,小孩则需要全麻。手术前必须停用抗心律失常药物至少5个半衰期以上,一般至少要3天,一般抗凝药物也是需要停用的。
我们局部需要手术前备皮,也就是局部皮肤清洁,有毛发的也需要清理干净。然后铺上洞巾。仅仅暴露局部血管穿刺部位。
我们穿刺血管插入诱发电极导管是根据不同需要来的,比如通常我们需要至少放置冠状静脉窦电极,右心室电极,高位右心房电极,和His束电极,那么冠状静脉窦电极是一般通过左锁骨下静脉或者右颈内静脉穿刺放置的,而右心室、高右房和His束电极则通过右股静脉放置。这些和体表心电图构成都可以让医生在电视屏幕上看到你不同的心电图图形,这样可以更加明确你心律失常的机制,部位。那么我们就可以标定你需要消融的部位(靶点)
我们通过插入电极导管,然后我们就进行心电生理检查,也就是人工给与各种电刺激,诱发你心律失常,比如我们可以采用输出电刺激信号比如用S1S1 刺激,也可以采用S1S2刺激等等,有时候可以静脉点滴异丙肾上腺素等药物,增加诱发的成功率,术前我们停用抗心律失常药物也是这个目的,就是诱发出你心律失常,这样我们根据体表和心内心电图,可以准确判断并定位你心律失常发生机制和部位,为下一步射频导管消融作准备,其实标定,是最为关键的一步,你只有找准敌人才能准确打击。准确的标定,也就是找准敌人的位置,那么就为打击敌人,做出关键的作用。我们的射频导管就像导弹一样,但是你必须先直到敌人在哪里,把它标定好,然后我们的导弹就可以直接定点清除。
目前比较新的高档的比如CARTO,就是类似于全球定位系统GPS的原理,可以准确三维立体定位你心律失常形成的部位和路径。一般我们针对最多是折返造成的心律失常,比如最多用于房室结双径路或者房室旁路引起的阵发性室上速,成功率一般是95%以上。
如果是房扑,主要是经典房扑,那么一般我们需要用一个Halo导管,一根可以弯折的上面带有很多对电极的导管,沿着折返环,环形放置。那么成功率也可以到95%。
1.在没有开始记录(空跑的状态下)和开始记录时的波形的基线都不在0点而是处于负值,是因为仪器设备设置的问题还是仪器本身有损坏?
2.记录ACC场电的通道50Hz干扰特别大,接地线排干扰后仍然存在,可能是什么问题呢?
3.Brownlee440的Amplifier上有Gain,lowpassfilter,Highpassfilter的设置,这个设置对ACC场电的记录有影响吗?如果记录ACC的场电,一般常用的参数是多少啊?
4.有没有用过这个仪器记录过肌电的前辈,我用A-B模式可以记录到类似Chart5软件记录的肌电波形。可是用clampfit10.2的Analyze--statistics--Measurement--Area分析,分析出来的数值太小,与波形不符。从波形看,明显有强的肌肉收缩,但是数值却没有明显差异。有前辈分析过肌电吗?是否我的分析方法不对?或者是应为问题1中提到的基线不在0点所引起的曲线下面积分析的误差?
感谢!
先来个简单介绍:
电生理检查在临床中的应用
(electrophysiologicalexamination)
一、脑电图
脑电图(EEG)检查:是在头部按一定部位放置8-16个电极,经脑电图机将脑细胞固有的生物电活动放大并连续描记在纸上的图形。正常情况下,脑电图有一定的规律性,当脑部尤其是皮层有病变时,规律性受到破坏,波形即发生变化,对其波形进行分析,可辅助临床对及脑部疾病进行诊断。
脑波按其频率分为:δ波(1-3c/s)θ波(4-7c/s)、α波(8-13c/s)、β波(14-25c/s)γ波(25c/s以上),δ和θ波称为慢波,β和γ波称为快波。依年龄不同其基本波的频率也不同,如3岁以下小儿以δ波为主,3-6岁以θ波为主,随年龄增长,α波逐渐增多,到成年人时以α波为主,但年龄之间无明确的严格界限,如有的儿童4、5岁枕部α波已很明显。正常成年人在清醒、安静、闭眼时,脑波的基本节律是枕部α波为主,其他部位则是以α波间有少量慢波为主。判断脑波是否正常,主要是根据其年龄,对脑波的频率、波幅、两侧的对称性以及慢波的数量、部位、出现方式及有无病理波等进行分析。许多脑部病变可引起脑波的异常。如颅内占位性病变(尤其是皮层部位者)可有限局性慢波;散发性脑炎,绝大部分脑电图呈现弥漫性高波幅慢波;此外如脑血管病、炎症、外伤、代谢性脑病等都有各种不同程度的异常,但脑深部和线部位的病变阳性率很低。须加指出的是,脑电图表现没有特异性,必须结合临床进行综合判断,然而对于癫痫则有决定性的诊断价值,在阗痫发作间歇期,脑电图可有阵发性高幅慢波、棘波、尖波、棘一慢波综合等所谓“痛性放电”表现。为了提高脑电图的阳性率,可依据不同的病变部位采用不同的电极放置方法。如鼻咽电极、鼓膜电极和蝶骨电极,在开颅时也可将电极置于皮层(皮层电极)或埋入脑深部结构(深部电极);此外,还可使用各种诱发试验,如睁闭眼、过度换气、闪光刺激、睡眠诱发、剥夺睡眠诱发以及静脉注射美解眠等。但蝶骨电极和美解眠诱发试验等方法,可给病人带来痛苦和损害,须在有经验者指导下进行。随着科技的日益发展,近年来又有了遥控脑电图和24小时监测脑电图。
二、脑电地形图(BEAM)
是在EEG的基础上,将脑电信号输入电脑内进行再处理,通过模数转换和付立叶转换,将脑电信号转换为数字信号,处理成为脑电功率谱,按照不同频带进行分类,依功率的多少分级,最终使脑电信号转换成一种能够定量的二维脑波图像,此种图象能客观地反映各部电位变化的空间分布状态,其定量标志可以用数字或颜色表示,再用打印机打印在颅脑模式图上,或贮存在软盘上。它的优越性在于能发现EEG中较难判别的细微异常,提高了阳性率,且病变部位图象直观醒目,定位比较准确,从而客观对大脑机能进行评价。主要应用于缺血性脑血管病的早期诊断及疗效予后的评价,小儿脑发育与脑波变化的研究,视觉功能的研究,大浮肿瘤的定位以及精神药物的研究等。
三、脑磁图
电流在导体内流动进,导体周围可以产生磁场。同理,脑细胞的电活动也有极微弱的磁场,可用高灵敏度的磁场传感器予以检测,并记录其随时间变化的关系曲线,是即脑磁图,其图形与EEG图形相似。与EEG相比,优点是:可发现有临床意义而又不能被EEG记录到的波形,或检测到皮质局限性的异常电磁活动;此外,磁检器不与头皮接触,也减少了干扰造成的伪差。若与EEG同时描记,还可对不同物理方位的皮质群进行分析。但由于屏蔽、电磁装置以及其他设备复杂、昂贵,目前国内尚无此项设备。
四、诱发电位
给人体感官、感觉神经或运动皮质、运动神经以刺激,兴奋沿相应的神经通路向中枢或外周传导,在传导过程中,产生的不断组合传递的电位变化,即为诱发电位,对其加以分析,即或反映出不同部位的神经功能状态。由于诱发电位非常微小,须借助电脑对重复刺激的信号进行叠加处理,将其放大,并从淹没于肌电、脑电的背景中提取出来,才能加以描记。主要是对波形、主波的潜伏期、波峰间期和波幅等进行分析,为临床诊断提供参考,目前临床常用的有视觉、脑干听觉、体感、运动和事件相关诱发电位,以及视网膜图和耳蜗电图等,可分别反映视网膜、视觉通路、内耳、听神经、脑干、外周神经、脊髓后索、感觉皮质以及上下运动神经元的各种病变,事件相关诱发电位则用以判断患者的注意力和反应能力。诱发电位具有高度敏感性,对感觉障碍可进行客观评诂,对病变能进行定量判断。对心理精神领域可进行一定的检测,故当前广泛应用于对神经系统病变的早期诊断,病情随访,疗效判断,予后估计,神经系统发育情况的评估以及协助判断昏迷性质和脑死亡等。但图形无特异性,必须结合临床资料进行判断;不在有关神经传导径路中的病变,不能发现异常。近年,诱发电位的频谱分析和诱发电位地形图也在临床上逐渐开始应用,进一步提高了其临床应用价值。
五、肌电图(EMG)
是用肌电图仪记录神经和肌肉的生物电活动,对其波形进行测量分析,可以了解神经、肌肉的功能状态,协助对下运动神经元或肌肉疾病的诊断。目前常用的方法有三种:①针极肌电图:亦称普通肌电图,是将特制的针电极刺入肌腹,或用表面电极置于肌肉表面皮肤,在示波器上或记录纸上观察肌肉在静止、轻收缩、重收缩三种状态下的电位变化,以帮助判断疾病究系神经源性或肌源性损害。②神经传导速度测定:也即运动神经传导速度(MCV)和感觉神经传导速度(SCV)测定。系在神经干的近端(MCV)或远端(SCV)给以脉冲刺激,在远端效应肌(MCV)或近端神经走行部位(SCV)接收波形,测理两点之间的潜伏期和距离,即可计算出运动神经或感觉神经传导速度,主要用于了解神经传导功能情况。③其他:如重复频率试验,F波、H反射、牵张反射等检查以及单纤维肌电图检查等,可进一步了解神经、肌肉、神经一肌接头以及脊髓反射弧的功能状态。
六、脑阻抗血流图(REG)
是检查头部血管功能和供血情况的一种方法。其原理是通过放置在头部的电极给以微弱的高频电流,由于血液的电阻率最小,其电阻可随心动周期供血的变化而变化,这种节律性的阻抗变化,经血流图仪放大,可描记出波动性曲线,对其进行测量、计算、分析,可间接了解外周阻力、血管弹性和供血情况。本法简便易行,但因影响因素比较多,如情绪、气温、检查当时的血管功能状态等,故对其判断应加慎重。须结合临床症状,体征等进行判断。常用于脑动脉硬化、闭塞性脑血管病、偏头痛以及药物疗效观察等。