小鼠DRG急性分离膜片钳技术求助

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小鼠DRG急性分离膜片钳技术求助

2017-05-12

问题描述：

新手一枚，希望大家能帮帮我，先谢谢啦

细胞状态很差，显微镜下看到的细胞大多数里面呈现颜色较深的颗粒状物质，细胞核很明显很大（如图）有做过出现这种情况的朋友么，可以帮忙分析下不
我们酶是胰酶1mg/ml和胶原酶2.6mg/ml，37℃,30min（这个条件是copy一个实验室的，他们可以做出来，但是我就做不出来

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zhdreamice

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就是看着透明的那种，对细胞状态影响比较大的我觉得应该注意1. 玻璃片的处理，处理不好大量细胞流失2. 消化时间，过长会使得细胞很脆弱

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yezi-dxy

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展开引用zhdreamice就是看着透明的那种，对细胞状态影响比较大的我觉得应该注意1.玻璃片的处理，处理不好大量细胞流失2.消化时间，过长会使得细胞很脆弱......哈哈，我之前就是看了一个你的帖子，上面说可能是消化短的原因，最近我把时间延长了，但是效果还是不好，我要找的是DRG小细胞，但是看到的大多数都是很大的核也很明显的那种感觉快死的细胞，我要找的那种细胞很少，你的那张图是培养的细胞么？看着有轴突的

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zhdreamice

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叶子儿yezier哈哈，我之前就是看了一个你的帖子，上面说可能是消化短的原因，最近我把时间延长了，但是效果还是不好，我要找的是DRG小细胞，但是看到的大多数都是很大的核也很明显的那种感觉快死的细胞，我要找的那种细胞很少，你的那张图是培养的细胞么？看着有轴突的这张是培养了3，4天的照片。你的是当天做吗，还是需要培养几天？你最好看看消化后，细胞悬浮液中细胞的状况，如果没问题。那就可能是你培养液或者玻璃片等的问题了

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yezi-dxy

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zhdreamice这张是培养了3，4天的照片。你的是当天做吗，还是需要培养几天？你最好看看消化后，细胞悬浮液中细胞的状况，如果没问题。那就可能是你培养液或者玻璃片等的问题了对不起，前段时间没做就忘了回复了。是当天做，悬浮液的细胞状态我没看，下次来看看，但是我感觉最大的可能还是消化问题，我想问下前辈你做的时候消化液和条件是怎么的，可以说下么

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