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yesbiotech/mAb anti-Human S100A7 (psoriasin), 5C2/0.1 mg/MO-T40088D
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Details

Description:Mouse monoclonal antibody to human S100A7 (psoriasin)

Purification:Protein G affinity purified

Product Type: Primary antibody

Target Protein:Human S100A7 (psoriasin)

Immunogen:A short peptide (tdyhkqshgaapcsggs) derived from human S100A7 (psoriasin) was conjugated with KLH for immunization.

Fusion Myeloma:Sp2/0-Ag14

Specificity:This antibody is reactive to S100A7 peptide (tdyhkqshgaapcsggs) and GST tagged recombinant S100A7 protein.

Species Reacitvity:Human, others not tested

Host / Isotype:Mouse, IgG2a Kappa

Formulation:Lyophilized from a solution in 0.01M PBS, pH 7.0

Reconstitution:Double distilled water is recommended to adjust the final concentration to 1.00mg/mL.

Storage: Store at -20oC

Research Area:Oncology, psoriasis

Background:

S100A7 is 11 kilo-dalton calcium binding protein with 2 EF motifs. It is also called psoriasin due to its significantly elevated level in the skin lesion of psoriasis. The protein is over-expressed in squamous cell tumors of the skin, lung and breast. S100A7 expression is induced after activation of epidermal growth factor receptor.

Application:

Western blot (see image): This antibody is reactive to 36.85KD GST tagged recombinant S100A7 protein.

The GST tagged recombinant S100A7 was loaded at 200ng/lane. The anti-S100A7 clone 5C2 was used at 1μg/ml, and the HRP conjugated goat anti-mouse IgG was used at 1:2,000 dilution.

ELISA:This antibody is reactive to recombinant S100A7 protein.

References:

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Product SpecificitymAb anti-Human S100A7 (psoriasin), 5C2
ApplicationWB, EIA
Size0.1 mg
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钾离子通道 TWIK 相关酸敏感钾(TASK)-1 通道与其他钾离子通道共同控制肺动脉的静息低张力。Src 家族酪氨酸的激酶(SrcTK)可以根据氧分压的变化控制人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)中的钾离子通道功能,同时临床使用 SrcTK 抑制剂亦发生部分可逆性肺动脉高压。来自格拉茨医科大学路德维希·玻尔兹曼肺血管研究学院的 ChandranNagaraj 等人对 SrcTK 在 hPASMCs 钾离子通道缺氧诱导抑 查看更多>
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膜片钳123
chliang20062021-08-13
做了个膜片钳的PPT,其中部分内容转自网上,部分内容偷自老师,见谅,传上来供大家拍砖,另外,恳请版主能赏给一分,无分寸步难行啊

膜片钳基础.pptx(11746.01k)
看IV曲线是怎么看,?
一般情况下 如果想了解细胞的特性用电流钳 了解细胞receptor 用 电压钳
各位大神好,我是一名新手正在学习膜片钳无奈师兄师姐没人愿意带,说明书又不知道在哪里了。麻烦各位给我说下微操的4个按钮分别是什么意思谢谢
膜片钳的发展与应用123
JY_Maxwell2021-08-10

小弟是神经科学研究生新生一枚,导师叫我分分钟把钠钾钙离子通道的全细胞记录方法给他,现在查了一些文献有了一些内外液配方,但是不知道电压钳刺激的protocol怎么编。悬赏35蚁豆(基本全部家当)求protocol,只有钙通道的也OK哟~

本人是一名专业研究生,正在参加北京市规培。尽管作为一名专硕,导师交给的却是基础课题,实验需要用到膜片钳,本人对此一无所知,科里实验室目前也没有膜片钳,还要联系外面实验室学习。听一个师兄说,他当初光学技术就有近半年时间,对此真是苦恼,实在觉不出规培能挤出那么多时间。

请问做过的老师,膜片钳学习曲线一般要多久?你们认为我一个专硕在完成规培的前提下能兼顾到膜片钳实验么?

很多都有、膜片钳主要是从事神经生物学研究的实验室会用,哪个学校有神经科学专业基本就会有,当然只是电生理实验室、系统实验室会有,做分子神经生物学的不一定用。
学校的话、中科院神经所有很多膜片钳、清华北大、浙大交大复旦肯定都有,n多学校有,这东西一台约60万,所以不算高端
电极尖端与细胞膜接触后,电极与其对应的以小片膜之间形成的电阻。电阻越大,漏电流越小,说明封接的越成功。一般到G欧姆(好的到10几G欧姆)就形成高阻封接。然后就可以选择记录模式了(全细胞、内面向外等)。

今天做膜片钳,发现能给出正压,但是刚看到有气流冲出,维持不过5s正压就没有了,而后发现电极立马被堵,一整个下午都无法patch到细胞,有没有人有遇到这种状况,我怀疑是有漏气,求助

膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术(Conventional patch clamp technique)发展到全自动膜片钳技术(Automated patch clamp technique)。
1.生物体具有共同的物质基础和结构基础。细胞是一切动植物结构的基本单位。病毒没有细胞结构。细胞是生物体的结构和功能的基本单位。
2.新陈代谢是生物体进行一切生命活动的基础,是生物最基本的特征,是生物与非生物的最
本质的区别。
3.生物遗传和变异的特征,使各物种既能基本上保持稳定,又能不断地进化。生物的遗传特
性,使生物物种保持相对稳定。生物的变异特性,使生物物种能够产生新的性状,以致形
成新的物种,向前进化发展。
4.生物体具应激性,因而能适应周围环境。生物体都能适应一定的环境,也能影响环境。
5.组成生物体的化学元素,在无机自然界都可以找到,没有一种化学元素是生物界所特有的,这个事实说明生物界和非生物界具统一性。生物界与非生物界还具有差异性。组成生物体的化学元素和化合物是生物体生命活动的物质基础。
6.糖类是细胞的主要能源物质,葡萄糖是细胞的重要能源物质。淀粉和糖元是植物、动物细胞内的储能物质。蛋白质是一切生命活动的体现者。脂肪是生物体的储能物质。核酸是一切生物的遗传物质。
7.组成生物体的任何一种化合物都不能够单独地完成某一种生命活动,只有这些化合物按照一定的方式有机地组织起来,才能表现出细胞和生物体的生命现象。细胞就是这些物质最基本的结构形式。
8.细胞膜具一定的流动性这一结构特点,具选择透过性这一功能特性。
9.细胞壁对植物细胞有支持和保护作用。线粒体是活细胞进行有氧呼吸的主要场所。叶绿体是绿色植物光合作用的场所。核糖体是细胞内将氨基酸合成为蛋白质的场所。染色质和染色体是细胞中同一种物质在不同时期的两种形态。细胞核是遗传物质储存和复制的场所,是细胞遗传特性和细胞代谢活动的控制中心。
10.构成细胞的各部分结构并不是彼此孤立的,而是互相紧密联系、协调一致的,一个细胞是一个有机的统一整体,细胞只有保持完整性,才能够正常地完成各项生命活动。展开
1)细胞吸附式膜片(cell attached patch)是膜片钳的基本方式,其它方式由此衍生。这种膜片形式比较稳定,因细胞骨架及有关代谢过程是完整的,故对细胞结构和环境干扰最小。但这种膜片形式易在电极尖端形成囊泡,从而细胞骨架可能有所变化。另外这种膜片不能控制细胞内成分。且任何影响膜电位的处理均可影响其电位水平。
2)内面向外式膜片( inside outpatch)细胞内外和电极内的溶液均可调控,既能较容易地改变细胞内的离子或物质浓度,又能把酶等直接加于膜的内侧面,适宜研究胞内物质对通道活动的影响。但实验中难以改变膜外侧物质,且需浸于低钙液中。常用于研究依赖细胞内钙的离子通道,如钙敏感的钾通道,还可用于细胞内激素和第二信使与通道的调节作用。
3) 外面向外式膜片(outside outpatch)能接触膜的两侧,可以任意改变膜外物质的浓度,有利于研究离子、递质对膜外表面的作用,多用于研究细胞膜外侧受体控制的离子通道。这些受体直接作用于离子通道,而不需经过第二信使系统。因细胞外液容易更换,故加药方便。缺陷是实验中难以改变胞内成分,而且电极管内必须充以低钙液。
4) 全细胞式膜片(whole cell patch)方式使细胞内与浴槽之间的漏流极少。电极本身阻抗(1~10MΩ)与细胞封接后的阻抗相比较低,这种低接触阻抗使单管电压钳容易实现。电极管内与细胞之间弥散交换与平衡快,因而容易控制细胞内液的成分。细胞钳记录的是许多通道的平均电流,有利于综合分析。如果有目的地将膜电位钳制在某一程度,可做到选择性抑制某些通道的活性而只记录某种通道电流的总和,并可在同一细胞上观察几种不同通道的情况。通过改变内部介质,如改变电极液成分,或在电极液中加入所需药物,通过渗透很快改变胞浆成分并达到平衡,该手段在全细胞记录中广泛应用。它适合于小细胞的电压钳位,对于直径大于30μm的细胞很难实现钳位。不足之处是由于电极与细胞间交换快,细胞内环境很容易破坏,因此记录所用的电极液应与胞浆主要成分相同,如高K+,低Na+和Ca2+及一定的缓冲成分和能量代谢所需的物质。
5) 穿孔膜片(perforated patch)是为克服常规全细胞模式的胞质渗漏问题,有学者将与离子亲和的制霉菌素或二性霉素B经微电极灌流到含有类甾醇的细胞膜上,形成只允许一价离子通过的孔,用此法在膜片上做很多导电性孔道,借此对全细胞膜电流进行记录。由于此模式的胞质渗漏极为缓慢,局部串联阻抗较常规全细胞模式高,所以钳制速度很慢,也称为缓慢全细胞模式。
感觉这样的提问没有什么意义
建议,可以自己查阅下资料